李鐵純，侯冬巖，回瑞華，刁全平

(鞍山師范學(xué)院 化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，遼寧 鞍山 114007)

鯽魚(yú)學(xué)名Carassius auratus，簡(jiǎn)稱(chēng)鯽，俗名鯽瓜子、月鯽仔、土鯽、河鯽等,常見(jiàn)于歐亞地區(qū)，為淡水魚(yú).鯽魚(yú)主要是以植物為食的雜食性魚(yú)，肉質(zhì)細(xì)嫩，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值很高，富含蛋白質(zhì)、脂肪、脂肪酸、維生素、鈣、磷、鐵等礦物質(zhì).鯽魚(yú)藥用價(jià)值極高，其性平味甘，入胃、腎,具有和中補(bǔ)虛、除羸、溫胃進(jìn)食、補(bǔ)中生氣之功效,是我國(guó)重要食用魚(yú)類(lèi)之一.有關(guān)鯽魚(yú)的養(yǎng)殖、加工、營(yíng)養(yǎng)作用和食用的研究報(bào)道較多，而對(duì)于鯽魚(yú)營(yíng)養(yǎng)成分的研究報(bào)道較少，特別是關(guān)于鯽魚(yú)不同部位脂肪酸的研究未見(jiàn)報(bào)道.本文采用Bligh-Dyer提取方法分別對(duì)鯽魚(yú)不同部位的脂肪油進(jìn)行提取[1-3],進(jìn)行甲酯化處理,利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀對(duì)其組成和相對(duì)百分含量進(jìn)行比較分析,為更好地開(kāi)發(fā)和利用鯽魚(yú)提供依據(jù).

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器、試劑與材料

HP6890-5973氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國(guó)Hewlett Packard公司)；HH-2電子恒溫水浴鍋(深圳天南海北實(shí)業(yè)有限公司)；80-2B臺(tái)式離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠(chǎng))；KQ-250B型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；RE-52C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海亞榮盛華儀器廠(chǎng))；

石油醚(60～90 ℃)、正己烷、甲醇、氯仿、氫氧化鉀(所用試劑均為分析純，水為二次蒸餾水).

樣品：購(gòu)于鞍山市某水產(chǎn)市場(chǎng)，鯽魚(yú)5尾，每尾均150 g左右.

1.2 樣品前處理

將新鮮的鯽魚(yú)用清水洗凈后進(jìn)行解剖，分別取魚(yú)頭、魚(yú)肉、魚(yú)籽、魚(yú)皮，再清洗干凈，搗碎后，分別放入冰箱備用.

1.3 脂肪油的提取

采用Bligh-Dyer法提取鯽魚(yú)不同部位的脂肪油，準(zhǔn)確稱(chēng)取經(jīng)1.2處理過(guò)的魚(yú)頭、魚(yú)肉、魚(yú)籽、魚(yú)皮、各5.00 g放入500 mL錐形瓶中，分別加入150 mL甲醇-氯仿(2∶1.5 體積比)溶液和 40 mL蒸餾水，攪拌24 h后，加入50 mL氯仿和50 mL蒸餾水，再攪拌30 min，經(jīng)過(guò)濾，取有機(jī)相得到黃色透明油狀提取液[4].脂肪油提取率為：鯽魚(yú)皮26.4%、鯽魚(yú)頭16.0%、鯽魚(yú)籽15.2%、鯽魚(yú)肉12.0%，見(jiàn)圖1.

圖1 鯽魚(yú)不同部位脂肪油的提取率

1.4 脂肪酸的甲酯化

分別吸取鯽魚(yú)不同部位的脂肪油0.5 mL，加入8.0 mL正己烷和4.0 mL(0.5 mol/L)KOH-CH3OH溶液，水浴回流20 min，冷卻至室溫，加入10 mL水，超聲提取10 min，以3 500 r/min速度離心.取上清液并加入無(wú)水硫酸鈉干燥后，待做GC-MS分析.

1.5 色譜條件

色譜柱：HP-530 m×0.25 mm×0.33 μm彈性石英毛細(xì)管柱；色譜柱溫度：150 ℃升到200 ℃，升溫速率為10 ℃/min，200 ℃升到250 ℃，升溫速率為5 ℃/min，250 ℃升到280 ℃，升溫速率為10 ℃/min(保持5 min)；進(jìn)樣口溫度為300 ℃；溶劑延遲3 min；進(jìn)樣量：0.4 μL；分流比：50∶1；載氣：氦氣.

1.6 質(zhì)譜條件

離子源：電子轟擊源；離子源溫度：230 ℃；電離電壓：70 eV；電子倍增器電壓：1 988 V；發(fā)射電流：34.6 μA；接口溫度：230 ℃；掃描范圍:20～500 m/z.

1.7 分析測(cè)定

取0.4 μL經(jīng)1.4處理過(guò)的樣品,用GC/MS進(jìn)行測(cè)定.由化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)檢索譜圖庫(kù),并與質(zhì)譜圖集的標(biāo)準(zhǔn)譜圖進(jìn)行對(duì)照,確定鯽魚(yú)不同部位化學(xué)成分及各化學(xué)成分的相對(duì)百分含量.

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

鯽魚(yú)不同部位脂肪酸甲酯組成的總離子流圖如圖2～5所示.

圖2 鯽魚(yú)頭脂肪酸甲酯總離子流圖

圖3 鯽魚(yú)肉脂肪酸甲酯總離子流圖

圖4 鯽魚(yú)籽脂肪酸甲酯總離子流圖

圖5 鯽魚(yú)皮脂肪酸甲酯總離子流圖

鯽魚(yú)不同部位脂肪酸甲酯組成及相對(duì)百分含量測(cè)定結(jié)果對(duì)比如表1.

表1 鯽魚(yú)各部位脂肪酸甲酯組成及相對(duì)百分含量

由表1可知，鯽魚(yú)頭中鑒定出10種脂肪酸，飽和脂肪酸為20.17%，不飽和脂肪酸為61.12%，檢出率為81.29%；鯽魚(yú)肉中鑒定出9種脂肪酸，飽和脂肪酸為22.67%，不飽和脂肪酸為68.79%，檢出率為91.46%；鯽魚(yú)籽中鑒定出24種脂肪酸，飽和脂肪酸為21.04%，不飽和脂肪酸為73.78%，檢出率為94.82%；鯽魚(yú)皮中鑒定出17種脂肪酸，飽和脂肪酸為22.40%，不飽和脂肪酸為67.26%，檢出率為89.66%.

3 討論

鯽魚(yú)不同部位脂肪酸含量均較高，其組成主要是不飽和脂肪酸.采用 Bligh-Dyer法提取鯽魚(yú)不同部位脂肪油避免了在提取過(guò)程中由于溫度升高引起不飽和脂肪酸的變性和損失.

由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，鯽魚(yú)不同部位均含有豐富的脂肪酸，飽和脂肪酸的相對(duì)百分含量從多到少的順序是:鯽魚(yú)肉、鯽魚(yú)皮、鯽魚(yú)籽、鯽魚(yú)頭.不飽和脂肪酸的相對(duì)百分含量從多到少的順序是:鯽魚(yú)籽、鯽魚(yú)肉、鯽魚(yú)皮、鯽魚(yú)頭.

鯽魚(yú)不同部位均鑒定出二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)，其結(jié)構(gòu)式如圖6.

圖6 EPA和DHA的結(jié)構(gòu)式

EPA和DHA主要來(lái)源于海洋魚(yú)類(lèi)，植物油中不含有EPA和DHA[5].EPA和DHA是人體不能合成的必需脂肪酸，在人體中具有重要的生物學(xué)意義[6-12].近年來(lái)，隨著人們對(duì)EPA和DHA作用的深入了解和普遍認(rèn)同，EPA、DHA保健品和藥品的研究及開(kāi)發(fā)將成為海洋魚(yú)類(lèi)綜合利用的一個(gè)重要領(lǐng)域.