王曉培，劉 韜*

（成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，四川 成都 610000）

在本科室長(zhǎng)期臨床實(shí)踐結(jié)合現(xiàn)代藥理藥劑知識(shí)，基于局部消炎止痛，活血散結(jié)的理論，對(duì)川烏、白芷、赤芍、遠(yuǎn)志、蒲公英、三棱、莪術(shù)、延胡索甘草等進(jìn)行了研究，篩選出川烏、白芷、赤芍、遠(yuǎn)志、甘草為乳腺增生癥外用制劑作進(jìn)一步研究。本研究通過前期動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)此外用制劑對(duì)治療乳腺增生有一定的治療作用。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

選取健康SD雌性大鼠 30 只，隨機(jī)分為3 組: 實(shí)驗(yàn)組,對(duì)照組，空白組各10只。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

大鼠后腿內(nèi)側(cè)肌肉注射苯甲酸雌二醇0.5 mg/kg/d，連續(xù)25天，然后肌注黃體酮4 mg/kg/d，連續(xù)5天，制造乳腺增生病動(dòng)物模型。各組大鼠在造模的基礎(chǔ)上同時(shí)于造模大鼠乳腺部位分別外用賦形劑（空白組）、外用中藥制劑0.4 g（實(shí)驗(yàn)組）及三苯氧胺樣品0.1 g（對(duì)照組），每天1次，并按摩每只乳房1 min，共30天。每天1次，連續(xù)30 d。

1.3 用法

各組大鼠在造模的基礎(chǔ)上同時(shí)于乳腺部位分別外用賦形劑（空白組）、外用中藥制劑0.4 g（實(shí)驗(yàn)組）及三苯氧胺樣品0.1 g（對(duì)照組），每天1次，并按摩每只乳房1 min，30天。

1.4 標(biāo)本采取及觀察指標(biāo)

末次給藥后第二天，稱量大鼠體重，脫毛后測(cè)量大鼠右下腹部乳暈直徑和乳頭直徑。試驗(yàn)?zāi)⒋笫笠?%戊巴比妥鈉按40 mg/kg經(jīng)腹腔注射麻醉。將大鼠固定，從大鼠腹主動(dòng)脈抽取4 ml動(dòng)脈血，注入5 ml離心管中，在4℃下3000 r/min離心15 min,分離血清檢測(cè)E2、P。取3個(gè)試驗(yàn)組大鼠2、3對(duì)部分乳房，10%的福爾馬林固定，梯度酒精脫水，石蠟包埋切片切片厚4 um。HE染色后在光鏡下觀察增生程度。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)，P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié) 果

2.1 對(duì)體重的影響

大鼠肌注苯甲酸雌二醇30 d后體重明顯增加，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組分別與空白組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，空白組大鼠體內(nèi)雌激素水平增高，使大鼠體內(nèi)代謝水平紊亂，引起體重變化，而實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組抑制體內(nèi)雌激素水平，使其與空白組產(chǎn)生明顯差異。結(jié)果如表1。

表1 造模后對(duì)乳腺增生大鼠體重的影響(x±s)

2.2 對(duì)乳暈直徑及乳頭直徑的影響

空白組注射苯甲酸雌二醇后，乳暈、乳頭直徑明顯增大，實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組在分別使用外用中藥制劑及三苯氧胺30 d后，大鼠乳暈與乳頭直徑較空白組明顯減小(P＜0.05)。結(jié)果見表2。

表2 外用中藥制劑對(duì)乳頭及乳暈的影響(x±s)

2.3 病理形態(tài)觀察

病理性造模后大鼠乳腺小葉數(shù)量明顯增多，腺泡數(shù)增多，腺泡腔和腺導(dǎo)管腔擴(kuò)張，間質(zhì)水腫，纖維組織增生，與實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；實(shí)驗(yàn)組較空白組乳腺小葉及腺泡數(shù)較少，腺泡腔和腺導(dǎo)管擴(kuò)張不明顯，未見管腔明顯擴(kuò)大?？瞻捉M分別與實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組比較存在統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異(P＜0.05)。乳腺增生病變判斷標(biāo)準(zhǔn)采用方敏等報(bào)道標(biāo)準(zhǔn)[1]，具體內(nèi)容見表3。

表3 中藥外用制劑對(duì)大鼠乳腺增生模型的影響

2.4 對(duì)雌二醇、孕酮水平的影響

實(shí)驗(yàn)研究最后測(cè)定大鼠血清中雌二醇及孕酮含量，發(fā)現(xiàn)空白組大鼠E2含量增加，P含量降低，與實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)；而實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較無差異(P＞0.05)，具體見表4。

表4 中藥外用制劑對(duì)乳腺增生小鼠血清E2、P水平的影響

3 討 論

本研究使用的外用中藥制劑是我科多年臨床經(jīng)驗(yàn)總結(jié)而成，組方為川烏、白芷、赤芍、遠(yuǎn)志、甘草。川烏溫經(jīng)止痛，祛風(fēng)除濕，具有很強(qiáng)的麻醉止痛作用；其主要成分烏頭堿對(duì)神經(jīng)肌接頭活動(dòng)和神經(jīng)干復(fù)合電位在末梢傳導(dǎo)有阻遏作用，高濃度可使神經(jīng)干完全喪失興奮和傳導(dǎo)功能+。白芷消腫止痛，散結(jié)排膿。赤芍清熱涼血，活血化瘀，止痛；含有芍藥甙、樹脂等，具有較好的解痙作用。遠(yuǎn)志寧心安神，祛痰開竅，消散癰腫；含有遠(yuǎn)志皂甙元A和B、細(xì)葉遠(yuǎn)志素等。甘草益氣補(bǔ)中，清熱解毒，緩急止痛，調(diào)和諸藥；含有甘草甜素、甘草黃酮類化合物、甘草甙等。本研究造模成功后發(fā)現(xiàn)大鼠的雌激素明顯升高，孕激素降低，乳腺組織明顯增生，作為空白對(duì)照組。外用中藥制劑及三苯氧胺的大鼠，乳頭及乳暈直徑較空白組明顯縮小(P＜0.05);病理組織觀察中發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組的乳腺小葉數(shù)目明顯較少，小葉腺泡較少，腔內(nèi)分泌物少，說明本制劑及三苯氧胺對(duì)大鼠的乳腺增生組織有一定的緩解作用，并可在一定程度上恢復(fù)其組織形態(tài)。三苯氧胺對(duì)血清雌二醇及孕酮的作用是已經(jīng)明確的，實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)空白組大鼠血清雌二醇(E2)含量明顯增加，孕酮(P)含量顯著降低，與實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05);而實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較無差異(P＞0.05)，說明本外用中藥制劑在治療乳腺增生方面具有與三苯氧胺類似的作用，可以一定程度上降低雌二醇含量，同時(shí)升高孕酮，從而達(dá)到治療乳腺增生的作用。