張樂國(guó) ，朱翠敏 ，吳強(qiáng) ，張俊玲 ，王馥梅

1.滄州市中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河北滄州 061001；2.滄州市中心醫(yī)院兒內(nèi)科，河北滄州 061001

動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）是缺血性腦卒中的主要病理基礎(chǔ)，其發(fā)病機(jī)制有多種學(xué)說，其中以在損傷反應(yīng)學(xué)說的基礎(chǔ)上出現(xiàn)炎癥反應(yīng)被廣泛接受。β-淀粉樣蛋白 （amyloid β-protein，Aβ）的沉積誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，可能與果蠅樣受體 4（Toll-like receptor-4，TLR4）信號(hào)通路的激活有關(guān)[1-2]?？扇苄缘腁β1-42觸發(fā)突觸功能失調(diào)，突觸功能異常和丟失被廣泛認(rèn)為是認(rèn)知功能下降的細(xì)胞機(jī)制[3]。該研究通過對(duì)該院自2015年5月—2017年12月體檢健康人100例及確診為動(dòng)脈粥樣硬化患者128人、輕度認(rèn)知障礙的患者108例進(jìn)行血漿Aβ1-42的測(cè)定，以探討Aβ1-42在不同人群中的表達(dá)，研究其與動(dòng)脈粥樣硬化及輕度認(rèn)知障礙的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該院治療的符合入選標(biāo)準(zhǔn)的腦血管動(dòng)脈粥樣硬化患者128例、輕度認(rèn)知障礙患者108例，及健康體檢的正常例100例。其中男性170例，女性166例。年齡40～75歲，平均（59±8.9）歲。動(dòng)脈粥樣硬化患者中輕度狹窄者43例，中度狹窄者45例，重度狹窄者40例。輕度認(rèn)知障礙患者中遺忘型62例，非遺忘型46例。

1.2 入選/排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 入選標(biāo)準(zhǔn)①年齡范圍：40～75歲。②經(jīng)超聲確診有腦血管動(dòng)脈粥樣硬化的患者。符合2010年中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)病學(xué)分會(huì)癡呆與認(rèn)知障礙學(xué)組寫作組 《中國(guó)癡呆與認(rèn)知障礙診治指南：輕度認(rèn)知障礙的診斷與治療》的輕度認(rèn)知障礙的診斷標(biāo)準(zhǔn)的患者。健康體檢的正常人。③所有受試者均進(jìn)行Aβ1-42化驗(yàn)。④無嚴(yán)重合并癥（如惡性腫瘤，肝硬化，心衰，腎衰）的患者。⑤簽署知情同意書。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn) ①癥狀非常嚴(yán)重，病情垂危患者。②伴有嚴(yán)重心、肝、腎等合并癥的患者。③伴有惡性腫瘤及嚴(yán)重的血液系統(tǒng)疾病的患者。④拒絕簽署知情同意書。

1.3 方法

①血漿Aβ1-42測(cè)定 抽取靜脈血5 mL，置于肝素抗凝管搖勻，分離血漿，采用美國(guó)Biosource公司生產(chǎn)的Aβ1-42酶聯(lián)免疫試劑盒，用全自動(dòng)酶標(biāo)儀于450 nm讀取吸光度值，軟件直接讀取樣本濃度。

②該研究采用回顧性分析的原則，將研究對(duì)象的Aβ1-42等臨床數(shù)據(jù)輸入數(shù)據(jù)庫。并分為動(dòng)脈粥樣硬化及輕度認(rèn)知障礙兩個(gè)評(píng)價(jià)組，每組在知情同意下分患者小組和健康小組，統(tǒng)計(jì)對(duì)比臨床數(shù)據(jù)的差異性。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

使用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，分別采用 χ2檢驗(yàn)、t檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

Aβ1-42在動(dòng)脈粥樣硬化患者中的表達(dá) （164.87±24.13）pg/mL 較正常人（99.94±9.12）pg/mL 增加（P＜0.05），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；但在不同程度動(dòng)脈粥樣硬化中的表達(dá)（P＞0.05）無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1。

表1 動(dòng)脈粥樣硬化組中不同狹窄程度患者與健康小組的Aβ1-42比較[（±s），pg/mL]

表1 動(dòng)脈粥樣硬化組中不同狹窄程度患者與健康小組的Aβ1-42比較[（±s），pg/mL]

注：動(dòng)脈粥樣硬化組與健康組比較，P＜0.05；動(dòng)脈粥樣硬化不同程度之間比較，P＞0.05。

動(dòng)脈硬化程度例數(shù) A β 1-4 2正常（健康）輕度中度重度1 0 0 4 3 4 5 4 0 9 9.9 4±9.1 2 1 6 6.0 7±2 5.7 2 1 6 5.6 9±2 2.6 2 1 5 3.0 5±2 6.7 3

Aβ1-42在輕度認(rèn)知障礙患者中的表達(dá) （247.30±30.09）pg/mL 較正常人（99.94±9.12）pg/mL 增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；且在遺忘型輕度認(rèn)知障礙中的表達(dá)較非遺忘型輕度認(rèn)知障礙的表達(dá)更明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 見表2。

表2 輕度認(rèn)知障礙組中不同類型患者與健康小組的Aβ1-42比較[（±s），pg/mL]

表2 輕度認(rèn)知障礙組中不同類型患者與健康小組的Aβ1-42比較[（±s），pg/mL]

注：輕度認(rèn)知障礙組與正常組比較，P＜0.05；輕度認(rèn)知障礙不同類型之間比較，P＜0.05。

不同類型輕度認(rèn)知障礙例數(shù) A β 1-4 2正常（健康）遺忘型非遺忘型1 0 0 6 2 4 6 9 9.9 4±9.1 2 2 6 7.3 2±1 7.0 2 2 1 6.8 0±1 4.4 9

3 討論

常態(tài)下，機(jī)體通過細(xì)胞內(nèi)清除、酶的降解、轉(zhuǎn)運(yùn)清除等機(jī)制阻止β-淀粉樣蛋白的沉積。Aβ1-42多肽可聚集成多種不同的形態(tài)，其中Aβ1-42寡聚體的神經(jīng)毒性更強(qiáng)[4]，但是，Aβ1-42寡聚體易聚集成纖維，引起氧化應(yīng)激、神經(jīng)炎癥等一系列毒性作用，最終引發(fā)神經(jīng)元損傷[5]。

該文中，健康組人群的 Aβ1-42表達(dá)為（99.94±9.12）pg/mL，而動(dòng)脈粥樣硬化組的表達(dá)為（164.87±24.13）pg/mL。與健康組相比較，動(dòng)脈粥樣硬化組中Aβ1-42的表達(dá)增加（P＜0.05），說明動(dòng)脈粥樣硬化與Aβ1-42的過度表達(dá)相關(guān)。王雅琳等[6]通過對(duì)Ⅱ型糖尿病3月齡及6月齡大鼠的腦血管進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，在3月齡糖尿病組Aβ1-42陽性血管數(shù)為（2.440±0.606）pg/mL，較正常組（0.580±0.228）pg/mL 明顯升高（P=0.001）；6月齡糖尿病組Aβ1-42陽性血管數(shù)為（4.800±0.837）pg/mL，較正常組（1.800±0.447）pg/mL 明顯升高（P=0.001）。糖尿病大鼠腦內(nèi)Aβ沉積存在血管壁內(nèi)沉積和血管周圍沉積兩種病理類型，這兩種類型均可影響血管的粥樣硬化，尤其是Aβ血管壁內(nèi)沉積更加劇了動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程，這種發(fā)現(xiàn)間接說明動(dòng)脈粥樣硬化與Aβ1-42具有相關(guān)性。

該文將動(dòng)脈粥樣硬化組分為輕度、中度、重度3種不同的程度，程度的區(qū)分取決于頸部血管的內(nèi)中膜厚度及狹窄程度。輕度動(dòng)脈粥樣硬化組43例，Aβ1-42表達(dá)為（166.07±25.72）pg/mL； 中度動(dòng)脈粥樣硬化組 45 例，Aβ1-42 表達(dá)為（165.69±22.62）pg/mL；重度動(dòng)脈粥樣硬化組 40例，Aβ1-42 表達(dá)為（153.05±26.73）pg/mL；將三種不同硬化程度患者的Aβ1-42的表達(dá)進(jìn)行比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），說明Aβ1-42不隨著動(dòng)脈粥樣硬化程度加重而表達(dá)增加。

在該文中，將輕度認(rèn)知障礙 (mild cognitive impairment，MCI)組根據(jù)累及的認(rèn)知域分為遺忘型MCI(amnestic MCI，aMCI)組和非遺忘型 MCI(non-amnestic MCI)組，兩者的區(qū)別在于是否存在記憶損害。Aβ在細(xì)胞外沉積形成老年斑，在細(xì)胞內(nèi)則使tau蛋白過度磷酸化形成神經(jīng)纖維纏結(jié)[7-8]，從而導(dǎo)致認(rèn)知障礙。在本文中，輕度認(rèn)知障礙組中Aβ1-42 的表達(dá)為（247.30±30.09）pg/mL，與健康組（99.94±9.12）pg/mL相比較，輕度認(rèn)知障礙組中Aβ1-42的表達(dá)增加（P＜0.05），說明輕度認(rèn)知障礙與Aβ1-42的過度表達(dá)相關(guān)。 在遺忘型 MCI組 Aβ1-42表達(dá)為（267.32±17.02）pg/mL，而非遺忘型 MCI組 Aβ1-42 表達(dá)為（216.80±14.49）pg/mL，兩者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.05），遺忘型MCI中Aβ1-42的表達(dá)較非遺忘型MCI顯著升高，說明Aβ1-42的表達(dá)越高，遺忘型輕度認(rèn)知障礙的可能性就越大。

常以腦脊液Aβ1-42、Tau蛋白檢測(cè)以及腦淀粉樣蛋白-β-PET來輔助確診認(rèn)知障礙。Goudey B等[9]通過對(duì)血漿Aβ1-42建立模型評(píng)估腦脊液Aβ1-42的水平，從而預(yù)測(cè)發(fā)生認(rèn)知障礙的風(fēng)險(xiǎn)。Nakamura A等[10]研究發(fā)現(xiàn)血漿Aβ1-42與淀粉樣蛋白-β-PET負(fù)荷和腦脊液中Aβ1-42水平相關(guān)，血漿生物標(biāo)志物在個(gè)體水平上預(yù)測(cè)腦淀粉樣蛋白-β-PET有潛在的臨床效用。本文中以血漿Aβ1-42作為研究對(duì)象，證實(shí)其與輕度認(rèn)知障礙存在相關(guān)性，也符合以上觀點(diǎn)。Li X等[11]研究發(fā)現(xiàn)動(dòng)脈硬化的嚴(yán)重程度與認(rèn)知障礙呈正相關(guān)，Aβ蛋白沉積是關(guān)聯(lián)兩者的橋梁之一。針對(duì)Aβ1-42的靶向藥物治療可有效減少動(dòng)脈粥樣硬化和認(rèn)知障礙的發(fā)生。Gandbhir O等[12]研究發(fā)現(xiàn)Amytrapper體外清除Aβ1-42可能是治療認(rèn)知障礙中淀粉樣蛋白積累的一種方法，為Aβ1-42的精準(zhǔn)治療提供了更為廣闊的前景。

綜上所述，Aβ1-42與動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)，但其不隨著動(dòng)脈粥樣硬化程度加重而表達(dá)增加。Aβ1-42與輕度認(rèn)知障礙相關(guān)，并在遺忘型輕度認(rèn)知障礙中的表達(dá)較非遺忘型更明顯。