李永娟 周文豪

北京英惠爾生物技術(shù)有限公司，北京100081

不同的發(fā)酵條件、生產(chǎn)工藝等會對發(fā)酵產(chǎn)品的性能產(chǎn)生影響，進而影響?zhàn)B殖動物的生產(chǎn)性能和健康狀況。在養(yǎng)殖生產(chǎn)中，常用消化率來評定原料的利用效果。劉勇等[1]以奧尼羅非魚為試驗對象，研究鮮雜魚- 豆粕發(fā)酵混合物替代魚粉對飼料營養(yǎng)物質(zhì)和蛋白質(zhì)消化率，發(fā)現(xiàn)混合發(fā)酵蛋白不同比例替代魚粉后對飼料干物質(zhì)消化率和蛋白質(zhì)消化率無顯著影響。在對不同飼料原料營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的研究中發(fā)現(xiàn)，凡納濱對蝦對酵解羽毛粉的消化率要高于水解羽毛粉，推測可能是因為羽毛粉在利用微生物發(fā)酵過程中產(chǎn)生了小肽、氨基酸等和大量的有益微生物菌群，從而能促進對營養(yǎng)物質(zhì)的利用率[2]。運用體外消化法測定加州鱸對不同原料的消化率，結(jié)果顯示，加州鱸對原料的利用效果因飼料原料不同而出現(xiàn)差異，其中動物性蛋白的效果最好[3]。同樣，大口黑鱸對發(fā)酵豆粕的干物質(zhì)表觀消化率要比普通豆粕高[4]。百惠康是經(jīng)液體深層和固體定向發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)的酵母培養(yǎng)物，富含生物活性代謝產(chǎn)物，具有多重功能，被用來維持和改善動物的消化道健康及其免疫功能，提高飼料的適口性和利用率，增強抵御不良應(yīng)激反應(yīng)的能力。本實驗室研究人員已對百惠康進行過多次驗證，結(jié)果證明百惠康可以作為蛋白原料運用到飼料中。生產(chǎn)過程中，我們也在不斷改進和優(yōu)化產(chǎn)品效果，所以本試驗選取草魚作為研究對象，研究了不同發(fā)酵條件下的3 種百惠康小試產(chǎn)品對草魚生長性能、消化率和抗感染能力的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗飼料

試驗飼料分為4 組，包括豆粕對照組和不同發(fā)酵條件百惠康等蛋白替代豆粕的試驗組，各處理組配方見表1。百惠康由北京英惠爾生物技術(shù)有限公司提供，粗蛋白55%。按照配方要求準確稱量粉碎后的各飼料原料，逐級放大混勻，用制粒機加工成3 mm的硬顆粒飼料。自然風(fēng)干，保存?zhèn)溆谩?/p>

表1 飼料配方及營養(yǎng)成分 %

1.2 養(yǎng)殖管理

試驗于北京英惠爾生物技術(shù)研究院室內(nèi)溫控循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中進行，魚苗經(jīng)暫養(yǎng)穩(wěn)定后開始試驗。養(yǎng)殖試驗開始前，禁飼24 h。試驗分為4 個處理組，每個處理4 個重復(fù)，每個重復(fù)放養(yǎng)大小規(guī)格一致、初始體重230 g 左右的健康草魚25 尾，于350 L玻璃桶中養(yǎng)殖50 d，分別于每天08:00、11:00、14:00、17:00 進行飽食投喂。養(yǎng)殖試驗進行7 d 后，開始收集糞便。投喂飼料后，收集形狀完整的糞便于-20 ℃冰箱保存。糞便于55 ℃烘干，每缸收集到干重10 g 左右后結(jié)束收集工作。試驗期間連續(xù)充氧以保證溶氧，定期檢測水質(zhì)。養(yǎng)殖期間溶氧＞6.0 mg/L，水溫28～32 ℃，pH 7.5～8.0，氨氮＜0.2 mg/L，亞硝酸鹽＜0.02 mg/L。

1.3 樣品采集

養(yǎng)殖試驗結(jié)束后，饑餓24 h 開始采集樣品，每桶單獨稱重并記錄尾數(shù)。稱重結(jié)束后，每桶隨機取3尾魚，單獨測量體長、稱體重，分別剝離內(nèi)臟、肝臟稱重，記錄數(shù)據(jù)。樣品采集結(jié)束后，每桶選8 尾魚腹腔注射嗜水氣單胞菌進行攻毒試驗，記錄7 d 的累積死亡率。

1.4 計算公式與統(tǒng)計分析

成活率（survival rate，SR）=試驗結(jié)束時魚尾數(shù)/試驗開始時魚尾數(shù)×100%；

增重率（weight gain rate，WGR）=（終末均重（g）－初始均重（g））/初始均重（g）×100%；

飼料系數(shù)（feed conversion rate，F(xiàn)CR）=攝食飼料干重（g）/（終末體重（g）－初始體重（g））；

攝食率（feed intake，F(xiàn)I）=100×飼料消耗量（g）/（（末體重（g）＋初體重（g））/2×天數(shù)）；

肝體比（hepatosomatic indices，HSI）=100%×肝臟質(zhì)量（g）/魚體質(zhì)量（g）；

臟體比（viscerosomatic indices，VSI）=100%×內(nèi)臟團重量（g）/魚體重（g）；

肥滿度（condition factor，CF，g/cm3）=100×魚體重（g）/魚體長3（cm3）；

飼料干物質(zhì)表觀消化率= [1－飼料中Y2O3%/糞便中Y2O3%]×100%；

營養(yǎng)成分表觀消化率= [1－（飼料中Y2O3%×糞便營養(yǎng)成分%）/（糞便中Y2O3%×飼料營養(yǎng)成分%）]×100%；

累積死亡率（Accumulative mortality rate，AMR）=累計死亡尾數(shù)/初始尾數(shù)×100%。

試驗數(shù)據(jù)用平均值±標準誤（mean±SE）表示，數(shù)據(jù)分析采用SPSS 20.0 軟件進行單因素方差分析（one-way ANOVA），組間若有顯著性差異，再作Duncan 氏多重比較檢驗，顯著性水平為P＜0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同發(fā)酵條件百惠康對草魚生長和飼料利用的影響

由表2可知，各組之間增重率、特定生長率、飼料系數(shù)和攝食率均沒有顯著差異；百惠康1 組和百惠康2 組增重率高于對照豆粕組，百惠康3 組增重率低于對照組；特定生長率與增重率趨勢一致；百惠康1 組和百惠康2 組飼料系數(shù)低于對照組，百惠康3 組高于對照組；百惠康1 組攝食率高于對照組，其他2 組均低于對照組。

表2 不同發(fā)酵條件百惠康對草魚生長和飼料利用的影響

2.2 不同發(fā)酵條件百惠康對草魚形體的影響

由表3可知，各組肥滿度、臟體比和肝體比均沒有顯著差異；百惠康組肥滿度高于對照組，臟體比低于對照組；百惠康1 組和百惠康2 組肝體比高于對照組，百惠康3 組低于對照組。

表3 不同發(fā)酵條件百惠康對草魚形體的影響

2.3 不同發(fā)酵條件百惠康對草魚消化率的影響

由表4可知，對照組和百惠康1 組干物質(zhì)和粗蛋白質(zhì)消化率顯著高于百惠康2 組和3 組，各組粗脂肪消化率之間沒有顯著差異。

表4 不同發(fā)酵條件百惠康對草魚消化率的影響

2.4 不同發(fā)酵條件百惠康對草魚累積死亡率的影響

由圖1可知，第7 天時，各組死亡率均接近100%。其中，百惠康3 組最高，百惠康1 組最低。

3 討 論

圖1 不同發(fā)酵條件百惠康對草魚累積死亡率的影響

研究發(fā)現(xiàn)，不同發(fā)酵條件導(dǎo)致花生粕的營養(yǎng)成分和風(fēng)味物質(zhì)等不同[5]。羅琳等[6]在研究加工工藝即膨化和硬顆粒對鯉生長性能的影響時發(fā)現(xiàn)，膨化工藝飼料對魚體的生長有顯著效應(yīng)。本試驗以不同發(fā)酵條件的酵母培養(yǎng)物（百惠康）為材料，研究其對草魚飼喂效果的影響，以篩選出效果更優(yōu)的產(chǎn)品，促進百惠康產(chǎn)品的改進。試驗結(jié)果顯示，各組生長性能指標均沒有差異性，但是百惠康1 組和百惠康2 組的效果略高于對照組，而百惠康3 組略低于對照組，這表明不同發(fā)酵條件對百惠康會產(chǎn)生一定的影響。在對大口黑鱸的研究中，也顯示5 g/kg 酵母水解物除可促進蛋白沉積外，對其他生長指標沒有顯著影響[7]。酵母提取物經(jīng)8 周飼喂后對中華絨螯蟹的生長性能略有促進作用，但也沒有產(chǎn)生顯著影響[8]。

消化酶活性可以衡量動物對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收能力，啤酒酵母粉替代牛蛙飼料中50%的魚粉后，會使腸道消化酶活性降低，從而使飼料干物質(zhì)、粗蛋白和粗脂肪的表觀消化率顯著下降[9]。在對蝦的研究中，酵母水解物可以提高肝胰腺胰蛋白酶和脂肪酶的活性[10]。同樣，消化率也可以用來評價營養(yǎng)物質(zhì)的利用情況。在本試驗中，不同發(fā)酵條件百惠康對草魚消化率的影響效果不同，百惠康1 組干物質(zhì)和粗蛋白質(zhì)的表觀消化率略高于對照組，其他2 組低于對照組。這可能是由于不同的發(fā)酵條件過程中會產(chǎn)生不同的代謝產(chǎn)物，從而影響營養(yǎng)物質(zhì)的利用。

酵母源產(chǎn)品已被廣泛證明對動物的抗病能力有促進作用。在研究酵母培養(yǎng)物對鯽抗感染能力的影響中，酵母培養(yǎng)物替代鯽飼料中20%魚粉組的累積死亡率與對照組沒有顯著差異[11]，活性酵母制劑可以促進刺參的抗病力，提高病原感染能力[12]，酵母培養(yǎng)物可以改善烏蘇里擬鲿抗氧化和抗感染能力[13]。在本試驗中，百惠康1 組前期死亡較快，但最終累積死亡率與對照組相同，低于百惠康其他組，證明了酵母產(chǎn)品的抗病性能，同時表明了不同發(fā)酵條件的百惠康效果存在差異性。

4 結(jié) 論

百惠康替代豆粕可以提高草魚的生長性能，改善草魚的形體指標，影響營養(yǎng)物質(zhì)的消化率，降低死亡率。綜合上述結(jié)果，百惠康1 組的效果優(yōu)于百惠康2 組和百惠康3 組，結(jié)合生產(chǎn)工藝和草魚的生長效果推薦使用百惠康1 組的發(fā)酵條件。