劉洋 米蕊 黃曉智

【摘要】目的：探討食管癌組織中β-catenin和Wnt-1的表達(dá)與意義。方法：取2016年5月至2018年5月期間醫(yī)院診治的四十五例食管癌患者，其病理資料完整，手術(shù)切除后獲得食管癌蠟塊標(biāo)本45例、癌旁組織15例。檢測標(biāo)本中β-catenin表達(dá)、Wnt-1的表達(dá)水平，使用免疫組化技術(shù)。最終評(píng)估組織β-catenin表達(dá)、Wnt-1表達(dá)水平與細(xì)胞分化、預(yù)后之間的關(guān)系。結(jié)果：①高分化組β-catenin和Wnt-1的高表達(dá)率最高，其次是中分化組，低分化組位列最末（P<005）;②死亡組β-catenin高表達(dá)率、Wnt-1高表達(dá)率較生存組高（P<005）。結(jié)論：食管癌組織β-catenin表達(dá)水平、Wnt-1的表達(dá)水平，和食管癌進(jìn)展、預(yù)后存在一定關(guān)聯(lián)性。

【關(guān)鍵詞】食管癌;β-catenin;Wnt-1;腫瘤進(jìn)展;預(yù)后

【中圖分類號(hào)】R82.1.4+2

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

【文章編號(hào)】2095-6851（2019）10-2.10-01

現(xiàn)階段，醫(yī)學(xué)工作者往往通過評(píng)估β-catenin和Wnt-1表達(dá)水平判斷腫瘤分化程度以及患者預(yù)后，但是否適用于食管癌，尚未可知。為此，筆者特開展本次分組對(duì)照試驗(yàn)證明。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

納入四十五例食管癌患者、十五例癌旁組織，納入時(shí)間為：2016年5月至2018年5月;納入標(biāo)準(zhǔn)：①本組患者均接受食管癌根治術(shù)，術(shù)后獲得蠟塊標(biāo)本，其中，研究組病例中男三十四例，女十一例;年齡在四十歲至八十八歲之間，四十歲至六十歲者二十例，六十一歲至八十八歲者二十五例;②病理資料和隨訪資料均完整無缺;③將45例食管癌組織設(shè)為研究組，將距離癌組織4cm以上的黏膜組織十五例設(shè)為對(duì)照組。④根據(jù)癌細(xì)胞分化程度：高分化癌八例，中分化癌十二例，低分化癌二十五例;⑤根據(jù)隨訪結(jié)果：根據(jù)3年隨訪結(jié)果分為：生存人員二十一例，死亡人員二十四例。

1.2 檢測方法

免疫組化技術(shù)操作方法：①脫蠟，即應(yīng)用適應(yīng)切片機(jī)對(duì)蠟塊標(biāo)本切片，在60攝氏度的溫烤箱中烤載玻片1個(gè)小時(shí)左右，使用二甲苯進(jìn)行三次脫蠟處理，水化后PBS沖洗。②抗原修復(fù)。加熱枸櫞酸鹽緩沖液（一千五百毫升）到沸騰，待不銹鋼壓力鍋緩慢噴氣，則再次計(jì)時(shí)兩分鐘，獲得切片后清洗。③顯色。使用鼠抗人β-catenin免疫組化單克隆抗體、兔抗人Wnt-1免疫組化單克隆抗體，各取50μL孵育，除去PBS液后加入100μLDAB溶液，以顯微鏡觀察。④封片，再實(shí)行圖像分析。。

1.3 觀察指標(biāo)

對(duì)免疫組化結(jié)果進(jìn)行判定，以顯現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性表達(dá)。根據(jù)半定量法進(jìn)行判斷，完全不染色、淺棕黃色、棕黃色、深棕黃色對(duì)應(yīng)0分、1分、2分、3分，陽性細(xì)胞百分比1-2.4%、2.4-49%、50-74%、75-100%對(duì)應(yīng)計(jì)分1、2、3、4分;乘積是陽性總得分。以得分的中位數(shù)做分組標(biāo)準(zhǔn)，<中位數(shù)者為低表達(dá)，>中位數(shù)者為高表達(dá)。。

14 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

SPSS200統(tǒng)計(jì)學(xué)法：無序分類資料實(shí)施SymbolcA@2檢驗(yàn)，P<005，則有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié)果

2.1 β-catenin和Wnt-1表達(dá)水平與癌細(xì)胞分化程度的關(guān)系

高分化組β-catenin和Wnt-1的高表達(dá)率最高，其次是中分化組，低分化組為最末（*Z=3657，*P=0025）（#Z=3254，*P=0022），詳見表1

2.2β-catenin和Wnt-1表達(dá)水平與預(yù)后的關(guān)系死亡組的β-catenin和Wnt-1高表達(dá)率均高于生存組（P<005），詳見表2

3 討論

β-catenin、Wnt-1作為細(xì)胞中重要信號(hào)分子、Wnt通道重要成員，與腫瘤產(chǎn)生、浸潤、轉(zhuǎn)移均存在密切關(guān)系[。食管癌作為國內(nèi)高發(fā)性腫瘤，分析其分子蛋白水平，探討本病發(fā)生機(jī)制、預(yù)后已經(jīng)成為醫(yī)學(xué)界研究熱點(diǎn)之一1]。在國內(nèi)，關(guān)于Wnt通道、腫瘤之間的關(guān)系也備受關(guān)注，但檢測β-catenin和Wnt-1表達(dá)水平，對(duì)于食管癌診斷和預(yù)后評(píng)價(jià)究竟有何意義，有待驗(yàn)證[2]

鑒于上，筆者特開展本次研究，對(duì)40例食管癌標(biāo)本組織中的β-catenin和Wnt-1表達(dá)水平，應(yīng)用免疫組化技術(shù)進(jìn)行定量分析，結(jié)果提示：高分化組β-catenin和Wnt-1的高表達(dá)率最高，且死亡組的β-catenin和Wnt-1高表達(dá)率均高于生存組，可見分析β-catenin和Wnt-1表達(dá)水平有助于判斷病人預(yù)后、癌細(xì)胞分化程度：二者表達(dá)水平越低，證明癌細(xì)胞分化程度越低，而病人預(yù)后越好，醫(yī)師可借鑒這一點(diǎn)，用于食管癌診斷中，提高診斷準(zhǔn)確性。

參考文獻(xiàn)：

[1] 李亞蓉， 毛紅， 趙湜，等. 糖尿病大鼠表皮組織表皮干細(xì)胞的β-catenin、Cyclin D1、Wnt-1、K6表達(dá)變化[J]. 山東醫(yī)藥， 2017， 57（35）：36-38

[2] 馬瓊，牛陽，周波，等.Wnt/β-catenin信號(hào)通路養(yǎng)營活血湯對(duì)肝纖維化大鼠Wnt1、β-catenin和TGF-β1的影響[J]. 寧夏醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)， 2018， 40（3）：1.2-18