楊娜，王涵，劉俊麗，劉金平，李平亞

（吉林大學(xué)藥學(xué)院人參創(chuàng)新藥物國(guó)家地方聯(lián)合工程研究中心，長(zhǎng)春 130021）

刺苞南蛇藤（Celastrus flagellaris Rupr.）為衛(wèi)矛科南蛇藤屬植物，是我國(guó)傳統(tǒng)藥用植物[1]，主要分布于長(zhǎng)白山區(qū)域[2]，具有祛風(fēng)除濕、消腫止痛等作用，臨床上用于治療筋骨疼痛、跌打損傷、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等[3-4]。對(duì)其非揮發(fā)性化學(xué)成分研究發(fā)現(xiàn)，刺苞南蛇藤的主要活性成分為 -二氫呋喃型倍半萜、三萜、黃酮和木脂素類[5-8]。微量元素含量豐富，其中以銅、錳、鎳、鋅元素含量較高[9]。

固相微萃取技術(shù)（Solid phase microext-raction,SPME）屬于非溶劑萃取法，是一種新型的樣品預(yù)處理方法[10]。此提取方法無(wú)溶劑、快速且靈敏，可以使樣品的制備最小化。固相微萃取是通過(guò)纖維頭從樣品中吸附待測(cè)物，并解吸于分析設(shè)備中的一種無(wú)溶劑樣品預(yù)處理技術(shù)，其集采集、萃取、濃縮于一體[11]，具有裝置簡(jiǎn)單、操作方便、適合與其他分析儀器聯(lián)用等優(yōu)點(diǎn)[12]。為全面了解刺苞南蛇藤的揮發(fā)性成分，本試驗(yàn)采用頂空固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)刺苞南蛇藤藤莖的揮發(fā)性成分進(jìn)行鑒定。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

刺苞南蛇藤采自吉林省長(zhǎng)春市雙陽(yáng)區(qū)，經(jīng)吉林大學(xué)李平亞教授鑒定為衛(wèi)矛科南蛇藤植物刺苞南蛇藤（C.flagellaris Rupr.）的藤莖。

1.2 試驗(yàn)儀器

5975-6890N氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀、20 mL樣品瓶（聚四氟乙烯膠墊瓶蓋）（美國(guó)Agilent公司）；手動(dòng)固相微萃取裝置（美國(guó)Supelco公司）；HP-1510氣相色譜頂空加熱器（上海濟(jì)成分析儀器有限公司）；FA1104N型電子分析天平（上海菁華科技儀器有限公司）。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 揮發(fā)性成分的提取 稱取1.0g樣品置于20mL樣品瓶中，密封。60℃下頂空萃取60min，260℃解吸2 min。

1.3.2 GC-MS分析 色譜條件：HP-35氣相毛細(xì)管柱（30 m 0.25 mm，0.25m）；程序升溫：起始溫度60℃，保持3min，以5℃/min升溫到280℃，維持280℃至完成分析；汽化室溫度260℃；載氣為氦氣（He，純度99.99%）；柱流量1.0mL/min，不分流進(jìn)樣。質(zhì)譜條件：電子電離源（Electronionization，EI），溫度230℃；四級(jí)桿溫度150℃；電離方式：EI，電子轟擊能量70 eV；溶劑延遲4 min；數(shù)據(jù)采集模式全掃描；質(zhì)量掃描范圍20～600 m/z；掃描速度 150 u/s。

用峰面積歸一化法計(jì)算各組分的相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)，對(duì)相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)大于0.01%的揮發(fā)油成分進(jìn)行積分并鑒定。

2 結(jié)果與分析

應(yīng)用HS-SPME技術(shù)收集刺苞南蛇藤中的揮發(fā)性成分，熱脫附后經(jīng)GC-MS分析，共檢出105個(gè)色譜峰，SPME-GC-MS分析總離子流圖見(jiàn)圖1。

圖1 固相微萃取刺苞南蛇藤揮發(fā)性總離子流圖Fig.1 Total ion current chromatogram of essential oil from C.flagellaris by SPME

通過(guò)HPMSD化學(xué)工作站檢索NIST02.L標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖庫(kù)，結(jié)合人工圖譜解析，共鑒定出102種化學(xué)成分，已鑒定的化合物主要包括有機(jī)酸、烷烴、烯烴、醇、醛和芳香類化合物等，占總流出峰面積的96.40%，采用面積歸一化法確定各組分的相對(duì)含量，結(jié)果見(jiàn)表1。由表1可知，含量較高的揮發(fā)油成分分別是乙基己醇（12.26%）、正壬醛（5.68%）、己酸（5.05%）、正十四烷（3.64%）、正癸醛（3.09%）、新醇（3.02%）、正十五烷（2.94%）、苯甲醛（2.43%）、香葉基丙酮（2.18%）等。

表1 刺苞南蛇藤揮發(fā)性成分的SPME-GC-MS分析結(jié)果Table 1 Analysis of C.flagellaris Rupr.by SPME-GC-MS

續(xù)表1

續(xù)表1

續(xù)表1

3 結(jié)論

本試驗(yàn)采用SPME-GC-MS方法分析了刺苞南蛇藤中的揮發(fā)性成分，共鑒定了102個(gè)化合物，以有機(jī)酸、烷烴、烯烴、醇、醛和芳香類化合物為主。含量較高單體成分為乙基己醇（12.26%）、正壬醛（5.68%）、己酸（5.05%）、正十四烷（3.64%）、正癸醛（3.09%）、新醇（3.02%）、正十五烷（2.94%）、苯甲醛（2.43%）、香葉基丙酮（2.18%）等。其中，有機(jī)酸類化合物具有揮發(fā)性，藥理作用廣泛，包括抗炎[13]、抗血栓、抗氧化等[14]，可能與刺苞南蛇藤祛風(fēng)除濕、活血止痛的藥理作用有關(guān)。

本實(shí)驗(yàn)首次采用SPME-GC-MS技術(shù)測(cè)定了藥用植物刺苞南蛇藤揮發(fā)性成分的含量，較為全面地對(duì)其揮發(fā)性成分進(jìn)行分析，結(jié)果表明，刺苞南蛇藤的揮發(fā)性成分豐富，為刺苞南蛇藤的進(jìn)一步研究和質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。