李雅萌，王亞茹，周柏松，李平亞，劉金平，楊娜

（吉林大學藥學院，長春 130021）

延胡索為罌粟科植物延胡索（Corydalis yanhusuo W.T.Wang）的干燥塊莖，性味辛、苦、溫，是傳統(tǒng)的止痛類中藥材，在我國用藥歷史悠久，毒性低、安全性高、無成癮性，為非麻醉性鎮(zhèn)痛藥[1]。延胡索中含有生物堿、甾醇、三萜類等多種化學成分[2-6]，生物堿類化合物為其主要活性成分[7-9]，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)這些生物堿類化合物具有活血、利氣、止痛等多種藥理活性[10-11]。此外，現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，延胡索還具有催眠、抗心肌缺血[12]、擴張冠狀動脈、降壓以及抗胃腸潰瘍[13]、抗腫瘤[14]、抗炎、抗菌、抗病毒、提高抗應激能力等[15-16]藥理作用。

生長在土壤中的植物類藥材含有有害殘留物質(zhì)或污染物質(zhì)的概率較高，其種類主要是殘留農(nóng)藥、重金屬和生物毒素等。重金屬及有害元素在人體內(nèi)代謝緩慢，容易積累，對人體產(chǎn)生危害[17]，因此，重金屬及有害元素是評價中藥材及中藥飲片安全性的重要指標之一。藥材中的重金屬及有害元素主要是指鉛（Pb）、汞（Hg）、鎘（Cd）、銅（Cu）、鉍（Bi）、銻（Ti）、錫（Sn）、砷（As）等。本實驗采用電感耦合等離子體-質(zhì)譜（ICPMS）法測定延胡索藥材中重金屬及有害元素含量，為延胡索的進一步研究和應用提供科學依據(jù)。

1 材料

1.1 試驗材料

延胡索藥材由吉林金寶藥業(yè)股份有限公司提供，經(jīng)吉林大學藥學院李平亞教授鑒定為罌粟科植物延胡索（C.yanhusuo W.T.Wang）的干燥塊莖。

1.2 儀器與試劑

7500a型電感耦合等離子體質(zhì)譜儀（美國Agilent公司）；AL104型電子天平（瑞士Mettler2Toledo公司）；Milli-Q超純水機（美國Millipore公司）；720電熱板（浙江省諸暨縣馬劍電熱儀器廠）；標準檢驗篩200目篩（浙江上虞市張興紗篩廠）。

Cu、鎳（Ni）、鉻（Cr）、Pb、Cd、Sn、鈷（Co）、Hg、As 9 種元素標準溶液（10 mg/L），銦（In）、銠（Rh）單元素內(nèi)標溶液（50mg/L），鋰（Li）、釔（Y）、Co、鉍（Bi）質(zhì)譜調(diào)諧液（10mg/L）（Agilent公司）；超純水為18.2M/cm，硝酸為優(yōu)級純，氫氟酸為色譜純。

試驗用器皿均用10%硝酸浸泡過夜，用超純水沖洗后備用。本實驗所用各種酸均經(jīng)亞沸騰2次蒸餾后使用。

2 方法

2.1 儀器工作參數(shù)

用 Li、Y、Co、Bi調(diào)諧液（10mg/L）對儀器進行最佳工作條件的選擇，使儀器的各項參數(shù)均達到測量指標，條件參數(shù)見表1。

表1 儀器工作條件參數(shù)Tab.1 Working condition parameter of instrument

2.2 供試品溶液的制備

將延胡索樣品粉碎，精密稱取樣品0.2 g于5 mL聚四氟乙烯溶樣彈中，加入1.0 mL硝酸及0.5 mL雙氧水，在120℃的電熱板上加熱至液體呈濕鹽狀，加入1.4 mL氫氟酸、1.6 mL硝酸，加蓋，放入恒溫干燥箱，190℃保持48h。在箱內(nèi)自然冷卻至室溫后，在120℃的電熱板上，蒸至溶液呈濕鹽狀，冷卻，加50%硝酸3.0mL，加蓋，放入恒溫干燥箱，150℃保持12h。冷卻后，將消解液移至50 mL聚氯乙烯樣品瓶，用高純水定容至刻度，即得供試品溶液。按照上述同樣的方法制備空白試樣。

2.3 標準溶液的制備

精密吸取9種元素標準溶液，分別用3%HNO3溶液逐級稀釋成各系列濃度的標準溶液。

2.4 內(nèi)標溶液的制備

精密吸取In、Rh標準溶液，用3%HNO3溶液稀釋制成1μg/L的內(nèi)標溶液。

3 結果與討論

3.1 線性關系與檢出限

在設定的工作參數(shù)下，測定各元素標準溶液繪制標準曲線，進行線性回歸，得回歸方程。測定空白溶液10次，根據(jù)10次測定結果計算出標準偏差，以3倍標準偏差作為儀器檢出限，結果各元素的檢測限在0.001 6～0.022 7之間。見表2。

表2 線性關系及檢出限Tab.2 Linear relationship and Detection limit

續(xù)表2

3.2 精密度試驗

在表1條件下，取同一標準品溶液平行測定6次，計算出各元素的精密度，所測各元素RSD在1.13%～3.16%之間，表明儀器的精密度良好。

3.3 重復性試驗

取延胡索樣品粉末6份，按照“2.2”項下方法平行制備供試品溶液，“2.1”項下儀器條件進行測定，6次重復進樣的測定結果，各元素RSD在1.02%～3.25%之間，表明重復性良好。

3.4 加樣回收試驗

為驗證方法準確性，對延胡索樣品中各元素做加樣回收試驗。制備低、中、高3個濃度的供試品溶液，分別加入混合標準溶液，測定結果如表3所示，加樣回收率為96.0%～100.4%。

表3 加樣回收率Tab.3 Recovery of sample （%）

3.5 樣品測定結果

將“2.2”項下制備的各供試品溶液，按照“2.1”項下儀器條件進行測定，結果見表4。

表4 延胡索中重金屬及有害元素含量測定結果Tab.4 Content of 9 kinds of heavy metals and harmful elements in corydalis rhiozoma

4 結論

中藥材生長周期較長，重金屬及有害元素易在藥材體內(nèi)蓄積，盡管Mn、Cu、Zn等重金屬是生命活動所需要的微量元素，但Hg、Ag、Cd等大部分重金屬并非生命活動所必須?？刂浦兴幹兄亟饘偌坝泻υ氐暮渴谴_保中藥“安全、有效、可控”的首要問題之一[18]。我國《藥用植物及制劑進出口綠色行業(yè)標準》[19]中限定含量 Pb≤5.0g/g、Cd≤0.3g/g、Hg≤0.2g/g、As≤2.0g/g、Cu≤20.0g/g。本試驗采用ICP-MS法測定延胡索藥材中9種重金屬及有害元素含量，結果表明，實驗藥材中 Pb、Cd、Hg、As、Cu 5 種有害金屬含量均低于限量值，符合標準，可用于進一步的研究。