華明

（上海市靜安區(qū)衛(wèi)生事業(yè)管理中心醫(yī)管科 上海 200435）

幽門(mén)螺桿菌(Helicobacter pylori，Hp)已被證實(shí)是一種慢性感染性疾病，幽門(mén)螺桿菌感染與消化道一些常見(jiàn)疾病均有密切關(guān)系，可引起消化性潰瘍、反流性食道炎、慢性胃炎、胃潰瘍等，也被確認(rèn)是成人胃癌發(fā)生的一級(jí)病因[1]。有報(bào)道中國(guó)人群感染率為40%～90%。目前國(guó)內(nèi)診斷幽門(mén)螺桿菌感染的金標(biāo)準(zhǔn)仍是胃鏡下胃竇黏膜活檢RUT或組織切片染色。而社區(qū)醫(yī)院應(yīng)設(shè)備技術(shù)限制普遍使用13C-或14C-尿素呼氣試驗(yàn)和血清HP抗體檢測(cè)[2]。找到一種患者易于接受，適合各年齡段人群檢測(cè)，特別是老人、孕婦和兒童，不需要儀器設(shè)備，檢測(cè)快速，特別適合于大范圍人群初步篩查的手段尤為重要[3]。本實(shí)驗(yàn)使用幽門(mén)螺旋桿菌唾液測(cè)定試劑盒（干化學(xué)法）（Helicobacter pylori in Saliva，HpS）測(cè)定120例有消化道癥狀的患者，同時(shí)經(jīng)胃鏡活檢組織快速尿素酶試驗(yàn)（rapid urease test，RUT）檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選擇2016年12月—2017年12月底因消化道癥狀來(lái)社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心全科門(mén)診就診的患者120例為對(duì)象，其中男性66例，女性54例；年齡32～86歲，平均61歲。所有患者均要求完成在本社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心HpS檢測(cè)，同時(shí)全科醫(yī)生開(kāi)具轉(zhuǎn)檢單于二級(jí)綜合醫(yī)院消化內(nèi)科進(jìn)行胃鏡下RUT。

1.2 排除條件

在最近4周內(nèi)使用過(guò)各類(lèi)抗生素，H2受體拮抗劑，質(zhì)子泵抑制劑，口服鉍劑或已經(jīng)行抗HP治療的患者。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)本采集 針對(duì)需要采集標(biāo)本的患者，囑咐患者在標(biāo)本采集前先使用清水漱口。使用消毒棉簽將深入到患者口腔中，在靠近患者臉頰的內(nèi)側(cè)使用棉簽來(lái)回的刮拭十幾下，同時(shí)不停的旋轉(zhuǎn)棉簽以收集盡可能多的唾液標(biāo)本?？偣彩占颊?～2ml的標(biāo)本，將收集到的標(biāo)本置于試管中進(jìn)行檢驗(yàn)。

1.3.2 HpS檢測(cè) 應(yīng)用HpS檢測(cè)試劑盒（本溪泰斯捷特生物科技有限公司生產(chǎn)），參照如下步驟進(jìn)行相應(yīng)的檢測(cè)：取采集到的唾液進(jìn)行檢查，使用吸管吸取2～4滴唾液，將其滴在試劑盒中同充分搖勻，唾液中HP分泌的尿素酶分解試劑盒底部的尿素產(chǎn)生氨氣（堿性），使試劑盒頂部的酚紅試紙變色，觀察3-5分鐘，顏色由黃色變?yōu)榉奂t色或紫色為HP感染陽(yáng)性，不變色為陰性結(jié)果。

1.3.3 胃鏡下胃竇黏膜活檢RUT檢測(cè) 采用胃幽門(mén)螺桿菌快速尿素酶診斷試劑盒（珠海克迪科技開(kāi)發(fā)有限公司生產(chǎn)）做RUT檢測(cè)。實(shí)際檢測(cè)的時(shí)候，相關(guān)操作均嚴(yán)格參照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，持續(xù)觀察5min后如果顏色顯示為為粉色提示檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS20.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，胃與口腔Hp感染檢測(cè)結(jié)果采用配對(duì)設(shè)計(jì)的卡方檢驗(yàn)（McNemar檢驗(yàn)），一致性采用Kappa分析。以RUT檢測(cè)為金標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)HpS進(jìn)行真實(shí)性評(píng)價(jià)。

2.結(jié)果

120例患消化道癥狀的患者中，使用HpS檢出的陽(yáng)性率為65.83%，RUT檢測(cè)的陽(yáng)性率為63.33%（表1）?？ǚ綑z測(cè)P=0.648（P＞0.05），說(shuō)明兩種方法檢測(cè)結(jié)果無(wú)顯著差異（表2）。一致性檢驗(yàn)kappa值為0.654，（P＜0.01），說(shuō)明二次測(cè)量結(jié)果一致性高（表3）。120例患者中HpS檢出真陽(yáng)性68例，靈敏度為89.47%，HpS檢出真陰性33例，特異度為75%，漏診率為13.92%，誤診率為25%（表4）。HpS診斷幽門(mén)螺桿菌感染的ROC曲線(xiàn)下面積為0.822（圖1），標(biāo)準(zhǔn)誤為0.044，P＜0.0001，面積的95%CI為（0.737，0.908），提示診斷價(jià)值中等(表5)。

表1 兩種幽門(mén)螺桿菌檢測(cè)結(jié)果比較

表2 卡方檢驗(yàn)

表3 對(duì)稱(chēng)度量

表4 HpS法與金標(biāo)準(zhǔn)RUT法的檢測(cè)結(jié)果

圖1 HpS法診斷幽門(mén)螺桿菌感染的ROC曲線(xiàn)

表5 曲線(xiàn)下的面積檢驗(yàn)結(jié)果變量: HpS

3.討論

隨著生活方式及飲食方式的改變，臨床中受幽門(mén)螺桿菌感染的人數(shù)呈現(xiàn)逐年上升的趨勢(shì)，這給人們的生命健康構(gòu)成巨大的威脅[4]。在以往的研究中，多數(shù)的學(xué)者與醫(yī)師常常認(rèn)為Hp感染的部位是胃部，但是隨著臨床研究的不斷深入，人們?cè)诳谇恢幸步?jīng)常發(fā)現(xiàn)Hp感染，這使得關(guān)于口腔Hp的預(yù)防也受到人們的廣泛關(guān)注[5]。針對(duì)口腔Hp感染，及時(shí)檢出感染，給予患者使用合適的抗菌藥物是關(guān)鍵。

目前國(guó)內(nèi)診斷 Hp 感染的方法很多，主要分為侵入性檢查和非侵入性檢測(cè)二大類(lèi)，其中侵入性檢查方法包含細(xì)菌培養(yǎng)、組織學(xué)檢查及RUT檢查等方式，其中RUT檢查需要借助胃鏡才能觀察到檢測(cè)結(jié)果；非侵入性檢測(cè)則包括血清學(xué)方法、同位素標(biāo)記法及分子生物學(xué)檢測(cè)等[6]。考慮到侵入性操作常常需要借助精密的儀器進(jìn)行檢測(cè)，且檢測(cè)時(shí)間比較長(zhǎng)，社區(qū)由于自身?xiàng)l件限制，因此基本不進(jìn)行侵入性檢查，而行Hp篩查時(shí)多采用13、14C呼氣試驗(yàn)及唾液HP檢測(cè)[7]。近些年來(lái)有學(xué)者提出HpS方法行口腔Hp檢測(cè)，該檢測(cè)方法具有特異性高、敏感性高、操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)，適用于社區(qū)大范圍HP感染的篩查工作。HpS檢測(cè)最早由美國(guó)學(xué)者葉國(guó)欽于2006年研制成，并且申請(qǐng)了專(zhuān)利，其檢測(cè)的原理為：借助膠體金來(lái)標(biāo)記Hp所釋放的尿素酶，當(dāng)結(jié)合物移向固定抗體部位的時(shí)候，能夠同這一區(qū)域的抗體產(chǎn)生特異性的結(jié)合，讓Hp得到截留并且大量聚集在檢測(cè)帶上面，此時(shí)能夠使用目測(cè)的方式來(lái)獲得準(zhǔn)確的結(jié)果，游離的標(biāo)準(zhǔn)物越過(guò)檢測(cè)帶可顯示檢測(cè)結(jié)果[8]。使用HpS這種手段進(jìn)行檢測(cè)，一般在15min內(nèi)就可以得出結(jié)果，且檢測(cè)的時(shí)候并不需要使用到一些特殊的儀器，因此應(yīng)用價(jià)值較高。本中心自2016年底開(kāi)展HpS方法檢測(cè)以來(lái)，發(fā)現(xiàn)同RUT檢測(cè)，HpS方法檢測(cè)HP感染同有創(chuàng)的RUT檢查在社區(qū)人群HP感染初篩中有一定的優(yōu)勢(shì)。HpS與RUT二者一致性檢驗(yàn)kappa值為0.654，提示二種檢查結(jié)果高度一致，HpS方法靈敏度為89.47%，特異度為75%，靈敏度相對(duì)較高，但特異度不高，HpS診斷幽門(mén)螺桿菌感染的ROC曲線(xiàn)下面積為0.822，提示診斷價(jià)值中等。

綜上所述，在本社區(qū)口腔唾液檢測(cè)的過(guò)程中，采用HpS檢測(cè)法具有一定的價(jià)值，在社區(qū)HP感染的檢測(cè)中，可將HpS檢測(cè)作為人群初篩Hp感染的一個(gè)重要手段，故建議HpS檢測(cè)僅適用于社區(qū)大范圍初篩?？紤]HpS檢測(cè)結(jié)果受多種因素，如患者唾液含量、采購(gòu)檢驗(yàn)試劑質(zhì)量、操作誤差、人為選擇檢測(cè)方式、實(shí)驗(yàn)人員辨別試劑結(jié)果能力等多方面影響，今后還有待需要進(jìn)一步的認(rèn)證其實(shí)用性，如擴(kuò)大樣本含量，進(jìn)行相關(guān)研究，如Meta分析等來(lái)進(jìn)一步驗(yàn)證。