高廣雄，趙云翔 ，朱 琳，曹婷婷,，賴偉偉

(1 佛山科學技術(shù)學院生命科學與工程學院，廣東 佛山 510475；2 廣西揚翔股份有限公司，廣西 貴港 537000)

杜洛克是我國引進的國外優(yōu)良種公豬品種之一，其作為現(xiàn)代商品豬生產(chǎn)的終端父本，因其優(yōu)良的肉品質(zhì)以及高瘦肉率，不僅使我國養(yǎng)豬業(yè)得到了快速發(fā)展，而且也在各國養(yǎng)豬業(yè)中享有很高的聲譽。有研究認為，影響公豬精液品質(zhì)的因素有許多，如年齡、季節(jié)、氣候、品種和飼養(yǎng)管理方式等。其次，遺傳因素仍是不可忽視的影響因素[1]。目前，有關(guān)不同品種種公豬精液品質(zhì)差異的研究頗多，但對于相同品種不同品系公豬精液品質(zhì)差異的報道較少。揚翔華系杜洛克專門化品系(YXHX)是揚翔股份歷經(jīng)6年培育而成的杜洛克新品系，本文以不同品系杜洛克的公豬精液形態(tài)參數(shù)記錄為資料進行統(tǒng)計分析，尋找出杜洛克不同品系公豬在精液品質(zhì)上的差異，為提高杜洛克公豬的利用率、育種改良等方面提供有益的參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

選取廣西揚翔股份天梯山公豬站存欄的杜洛克3個品系共64頭公豬，其中丹系公豬26頭，美系公豬30頭，揚翔華系杜洛克專門化品系公豬8頭，將不同品系公豬按年齡(1年齡、2年齡和3年齡)分為三組，每頭公豬均在同等條件下飼養(yǎng)管理。

1.2 精液的采集及指標的檢測

公豬精液使用手握法采集，在采精過程中，棄去前、后段精液，收集中段富含精子部分的精液，并用4層滅菌紗布過濾精液。采集完后立即吸取10 μL精液，放入2 μL觀察池，置于負相差顯微鏡下觀察和檢測。采用計算機輔助精子分析系統(tǒng)(Computer-assisted Sperm Analysis，CASA)進行精液質(zhì)量分析，評定指標包括精子密度、活率、直線運動和總精子數(shù)，自動分析彎尾、卷尾、遠端質(zhì)滴、中端折斷和近端質(zhì)滴等形態(tài)指標。每個界面隨機選擇30個正常形狀精子并記錄其頭部長度、頭部寬度、頭部面積、頭部周長以及尾巴長度。

1.3 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析

利用Excel軟件對精液各種參數(shù)按品系分組進行初步整理，使用SPSS 19.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。對不同品系杜洛克公豬精子的頭部長度、寬度以及尾巴長度等指標使用一般線性模型，以品系和年齡作為固定因子進行雙因素方差分析，并進行Duncan多重比較，結(jié)果以“平均值±標準差”表示。

2 結(jié)果

2.1 不同品系杜洛克公豬精液品質(zhì)指標比較

由表1可知，杜洛克三個品系的公豬在精子密度方面，揚翔華系＞丹系＞美系，其中揚翔華系顯著(P＜0.05)高于丹系和美系，后兩者則差異不顯著(P＞0.05)；在活率、正常形態(tài)和總精子數(shù)方面均為揚翔華系＞美系＞丹系，且三個品系彼此間差異顯著(P＜0.05)；在直線運動方面，揚翔華系＞丹系＞美系，其中揚翔華系與丹系顯著高于美系(P＜0.05)，而前兩者差異不顯著(P＞0.05)。

2.2 不同品系杜洛克公豬精子畸形參數(shù)比較

由表2可知，杜洛克三個品系公豬精子無論在彎尾率、卷尾率、近端質(zhì)滴還是中端折斷方面均為美系＞丹系＞揚翔華系，且三者彼此間差異顯著(P＜0.05)；在遠端質(zhì)滴方面，丹系＞美系＞揚翔華系，其中丹系與揚翔華系差異顯著(P＜0.05)，美系和揚翔華系差異不顯著(P＞0.05)。

2.3 不同品系杜洛克公豬精子形狀參數(shù)比較

由表3可知，3種品系公豬精子在頭部寬度和頭部面積方面均為美系＞揚翔華系＞丹系，且彼此間差異顯著(P＜0.05)；在精子頭部長度、周長方面均為丹系＞美系＞揚翔華系，但三者差異均不顯著；在精子尾巴長度方面美系＞丹系＞揚翔華系，但差異也均不顯著。

3 討論與分析

3.1 不同品系杜洛克公豬精子品質(zhì)參數(shù)分析

由本次試驗結(jié)果表明，不同品系杜洛克公豬精子品質(zhì)存在較大差異。揚翔華系杜洛克公豬的精子密度顯著高于美系和丹系公豬的，丹系公豬的精子密度雖然高于美系公豬的，但兩者差異并不顯著。精子密度的差異不僅表現(xiàn)在不同品系公豬間，而且在不同品種公豬上差異性也很大。農(nóng)秀艷等[2]研究了杜洛克、長白和大白三個品種公豬精液品質(zhì)，結(jié)果表明杜洛克公豬的精子密度顯著高于長白公豬和大白公豬的，另外Kondracki等[3]認為公豬的精子密度與其射精體積存在負相關(guān)，因此可以進一步推測不同品系杜洛克公豬的射精體積大小順序依次為美系公豬、丹系公豬和揚翔華系公豬。伏彭輝等[4]認為公豬精子的活率和運動能力與精子結(jié)構(gòu)和功能的完整性緊密相關(guān)，而李諾[5]和韋凌婭[6]等研究認為，運動能力是公豬精子獨有的特征，尤其精子的直線運動不僅能夠直觀地反映精子品質(zhì)，還能夠間接地反映精子的受精能力，即在直線運動占優(yōu)勢的精子可以高效地穿過母豬生殖道，從而快速地到達受精部位，完成受精。在本次研究中，揚翔華系杜洛克公豬在精子密度、活率、正常形態(tài)、直線運動以及總精子數(shù)方面上均占優(yōu)勢，因此，揚翔華系杜洛克公豬的精液品質(zhì)較好，美系公豬的次之，丹系公豬的則相對較差。

3.2 不同品系杜洛克公豬精子異常形態(tài)參數(shù)分析

原生質(zhì)滴由細胞內(nèi)的其他物質(zhì)濃縮而成，是精子缺陷的一個主要形式，其包括精子遠端質(zhì)滴和近端質(zhì)滴。Hurtgen[7]和Saacke[8]等研究認為，精子遠端質(zhì)滴對精子品質(zhì)的影響遠大于近端質(zhì)滴，建議用于人工授精的精液存在原生質(zhì)滴精子數(shù)不應(yīng)超過15%。本次試驗研究結(jié)果表明，3個品系杜洛克公豬精子異常形態(tài)主要是遠端質(zhì)滴，其次為近端質(zhì)滴和中端折斷，而彎尾和卷尾則占比較小。丹系杜洛克公豬精液中遠端質(zhì)滴精子所占比例最大，較揚翔華系杜洛克公豬的高0.63%。雖然3個品系杜洛克公豬精子在原生質(zhì)滴中占比較大，但均不超過10%。揚翔華系杜洛克公豬在各精子異常形態(tài)參數(shù)中占比最低，表明該品系公豬所產(chǎn)的精液中精子正常形態(tài)占大多數(shù)，這與表1所得出的結(jié)果相一致。另外D. Waberski等[9]研究認為，母豬受胎率和產(chǎn)仔數(shù)與種公豬精液有關(guān)，且均與精液中遠、近端質(zhì)滴精子所占比率存在極顯著負相關(guān)，并且趙志超等[10]研究表明，揚翔華系杜洛克母豬的產(chǎn)仔性能高于丹系杜洛克和美系杜洛克母豬，而在本次研究中，揚翔華系杜洛克公豬精子的這兩項異常形態(tài)參數(shù)中均低于美系和丹系公豬，這有可能是揚翔華系杜洛克母豬產(chǎn)仔數(shù)高于美系和丹系母豬的原因之一。

3.3 不同品系杜洛克公豬正常精子形狀參數(shù)分析

精子大小形狀是影響精子運動和授精能力的重要因素[11-12]。精子頭部大小除了受到不同品種和公豬年齡的影響外，精液的儲存方式也會影響其大小，同時精子頭部是影響精液品質(zhì)的重要因素之一，也是授精過程中的遺傳信息載體，因此其大小和形狀在動物遺傳育種過程中發(fā)揮重要的作用。Ostermeier等[13]認為，頭部形狀大小與染色質(zhì)結(jié)構(gòu)和完整性有關(guān)，從而影響種公豬的繁殖性能。另外Saravia等[14]研究后認為，繁殖力高的種公豬所產(chǎn)精子的頭部更小、更短。有關(guān)精子形態(tài)分析顯示，精子頭部變大是精液品質(zhì)降低的重要因素[15]，在本次試驗研究中，美系杜洛克公豬的精子頭部面積顯著大于揚翔華系與丹系公豬，因而對其精液品質(zhì)產(chǎn)生一定的影響。Noorafshan等[16]認為，精子總長度是評價精子活力的另外一個重要因素，結(jié)果認為精子總長度與精子運動速度呈正相關(guān)，即種公豬精子總長度越長，精子活力越強。此外，精子尾巴長度與精子活力之間也同樣存在聯(lián)系，根據(jù)Marmor和Grob-Menende等[17]的一項研究結(jié)果表明，在低活力的精子中有近50%是精子尾巴長度較短，表明精子尾巴長度與精子活力大小也呈正相關(guān)，而同樣在Noorafshan和Karbalay-Dust的研究中也證明了這一結(jié)論[16]。在本次試驗中，3個品系杜洛克精子僅在精子頭部寬度及面積上存在顯著差異，而精子頭部長度和尾巴長度等作為評價精子運動能力的指標均不存在顯著性差異。

4 結(jié)論

綜上所述，不同品系杜洛克公豬在精液品質(zhì)中存在較大差異，而精子形狀則在不同品系間差異較小。無論從精液品質(zhì)，還是精子異常形態(tài)方面，揚翔華系杜洛克公豬表現(xiàn)最佳。