彭 羽 華 瑩

1.貴州省貴陽市花溪區(qū)動物衛(wèi)生監(jiān)督所，貴陽 550025；2.貴州省動物疫病預(yù)防控制中心，貴陽 550018

1 材料與方法

1.1 樣本采集

選擇貴州省貴陽市轄區(qū)范圍內(nèi)具有代表性的4家機械化生豬屠宰廠，隨機采集這4家機械化生豬屠宰廠出廠的豬肉及內(nèi)臟器官樣本，置于0～4℃保溫箱中，12 h內(nèi)送至貴州省進出口檢疫檢驗局測定中心進行鹽酸克侖特羅測定。

1.2 鹽酸克侖特羅殘留測定

稱取樣本5.0 g，用移液管向樣本中加20 mL 0.2 moL/L（pH=5.3）乙酸銨緩沖液，渦旋混勻器3 000 r/min振蕩1 min，用微量加樣槍向樣本中加0.1 mL 100 μg/mL 內(nèi)標(biāo) Clen-D9 與 100 μL β-鹽酸葡萄糖酸苷酶/芳基硫酸酯酶，圓周震蕩搖床500 r/min振蕩40 min。37℃恒溫培養(yǎng)箱放置16 h；取出樣本，渦旋混勻器3 000 r/min振蕩30 s，在超聲清洗器超聲處理1 min，再用低速冷凍離心機4℃1 000 r/min離心10 min，小心吸取上清液4 mL，放入干凈離心管Ⅱ中；用0.2 mol/L高氯酸將離心管Ⅰ中殘液調(diào)pH至1，渦旋混勻器3 000 r/min振蕩30 s，低速冷凍離心機20℃ 1 000 r/min離心3 min。若離心管出現(xiàn)沉淀，取上清液備用，棄沉淀。用10 mL飽和NaOH調(diào)上清液的pH至11，混勻。

1）提取有機相：向上述液體中加10 mL飽和NaCl溶液與10 mL異丙醇：乙酸乙酯（6∶4），3 000 r/min振蕩5 min，1 000 r/min離心10 min，取上層有機相于試管。

2）再提有機相：在上述所剩清液中加5 mL異丙醇：乙酸乙酯（6∶4），3 000 r/min振蕩30 s，1 000 r/min離心5 min，取上層有機相，合并2次所取有機相。

3）氮吹濃縮：將上述有機相45℃水浴，氮氣吹干；向試管中加5 mL乙酸銨緩沖液（0.2 mol/L pH=5.3），超聲混勻，使殘渣充分溶解，備用。

4）鹽酸克倫特羅的純化：將MCX陽離子交換小柱連接真空過柱裝置，將上述殘渣溶液上柱，依次用5 mL甲醇，5 mL去離子水進行活化，然后加5 mL樣品，再用3 mL去離子水，3 mL 2%甲酸（FA）進行淋洗，5%氨化甲醇溶液洗脫，收集洗脫液后45℃氮氣吹干，加20%乙腈定容至2 mL，過濾后收集樣本待檢。然后參照GB/T22286-2008進行鹽酸克侖特羅含量的測定。

2 結(jié)果與分析

采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法對貴陽市轄區(qū)內(nèi)4家機械化生豬屠宰廠出廠生豬肉品樣本進行鹽酸克倫特羅殘留量檢測，結(jié)果如表1所示。根據(jù)GB/T22286-2008，鮮豬肉及內(nèi)臟中鹽酸克倫特羅最小檢出量為0.5 μg/kg。從上述貴陽市機械化生豬屠宰廠抽樣檢測的結(jié)果可見，600份豬肉及內(nèi)臟樣本中，可檢出含有微量鹽酸克倫特羅（0.01～0.08 μg/kg）的有38份樣本，檢出率為6.33%，但檢測值明顯小于國家標(biāo)準(zhǔn)所限的0.5 μg/kg。因此，貴陽市機械化生豬屠宰廠出廠豬肉的鹽酸克倫特羅殘留量未超標(biāo)。

表1 貴陽市屠宰場豬肉及內(nèi)臟樣品中鹽酸克倫特羅殘留量測定結(jié)果

3 討論

鹽酸克倫特羅屬β-興奮劑類激素，是一種常見的腎上腺素類神經(jīng)興奮劑，若在生豬養(yǎng)殖生產(chǎn)中大劑量使用可明顯提高飼料轉(zhuǎn)化率和胴體瘦肉率，因而俗稱“瘦肉精”。醫(yī)學(xué)上使用常見于急救和肺科病的治療，當(dāng)使用劑量達治療劑量的5～10倍時，可激發(fā)組織和脂肪的B-腎上腺素受體，使脂肪激酶活化，促進甘油三酯分解，增加肌肉蛋白沉積，有效提高動物的瘦肉率。人食用殘留在食品中的鹽酸克倫特羅后會直接危害健康，食用過量會出現(xiàn)惡心、心慌、嘔吐、頭疼以及肌肉振顫等癥狀，心臟病、高血壓、甲亢和前列腺肥大等疾病患者食用過量的鹽酸克侖特羅的危害更大，出現(xiàn)嚴(yán)重的臨床癥狀，甚至造成死亡。本調(diào)查對600份豬肉及內(nèi)臟樣本進行檢測，檢出38份豬肉樣本中存在微量鹽酸克倫特羅殘留，但均小于國家標(biāo)準(zhǔn)所限的鹽酸克倫特羅最小檢出量，說明貴陽市轄區(qū)內(nèi)4家機械化生豬屠宰廠生產(chǎn)上市的豬肉沒有鹽酸克侖特羅超標(biāo)的情況，抽樣涉及的屠宰廠每天向貴陽市轄區(qū)市場供應(yīng)的豬肉約占貴陽市豬肉總消費量的70%。通過連續(xù)2年的檢測結(jié)果分析可知，貴陽市范圍內(nèi)市場上銷售的由當(dāng)?shù)赝涝讖S供應(yīng)的豬肉出現(xiàn)鹽酸克侖特羅超標(biāo)的可能性極低。