劉慧萍，張廷偉，劉長仲，楊嵐青

（甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院，甘肅省農(nóng)作物病蟲害生物防治工程實(shí)驗(yàn)室，蘭州 730070）

苜蓿（Medicago sativa）是多年生豆科牧草，有“牧草之王”美譽(yù)[1]，是甘肅省乃至西北地區(qū)畜牧業(yè)發(fā)展的重要牧草，也是我國種植面積最大的牧草。豌豆蚜（Acyrthosiphon pisumHarris）屬昆蟲綱，半翅目蚜科，是世界性豆科植物上重要的寡食性害蟲[2]。豌豆蚜除直接取食為害外，還能傳播苜?；ㄈ~病毒、豌豆耳突花葉病毒等25種病毒。我國西北地區(qū)由于苜蓿蟲害的危害，每年造成的經(jīng)濟(jì)損失達(dá)10%～30%，已成為我國北方豆類作物以及苜蓿生產(chǎn)中的重要威脅和障礙[3]。由于長期以來蚜蟲的防治主要依賴化學(xué)殺蟲劑，而化學(xué)農(nóng)藥容易造成環(huán)境污染、殺傷害蟲天敵等環(huán)境問題，同時(shí)導(dǎo)致抗藥性害蟲種類、數(shù)量不斷增加[4-8]。自1908年Melander[9]首次發(fā)現(xiàn)美國梨園蚧（Aspidiotus perniciosusComstock）對石硫合劑的抗藥性以來，害蟲的抗藥性已經(jīng)成了世界性的問題。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，截至目前，至少已有600多種昆蟲對近400種不同種類的殺蟲劑、殺螨劑產(chǎn)生了抗藥性，昆蟲種類主要集中在雙翅目蚊蠅類、蜱螨目葉螨類、鱗翅目蛾類、鞘翅目甲蟲類和半翅目蚜蟲、葉蟬、飛虱、粉虱和蚧蟲類等[8]。植物源農(nóng)藥因其具有殺蟲活性且對環(huán)境安全而成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。瑞香狼毒（Stellera chamaejasmL.）俗稱斷腸草，是瑞香科狼毒屬植物，主要分布在我國東北、華北及西北等地高山向陽的退化草場，它再生能力強(qiáng)、產(chǎn)種量多、生物量大、耐干旱、耐寒冷，對牛羊毒性大，為草原重點(diǎn)防治對象[10-11]。張國洲等[12]研究表明，瑞香狼毒提取物對菜粉蝶（Pieris rapae）幼蟲、亞洲玉米螟（Ostrinia furnacalis）幼蟲以及桃蚜（Myzus persicae）具有很強(qiáng)的生物活性。但是，目前關(guān)于狼毒提取物對豌豆蚜室內(nèi)毒力的研究鮮有報(bào)道。因此，本文研究了1.6%狼毒素水乳劑對豌豆蚜的生物活性，以期為狼毒植物有效成分的提取和開發(fā)利用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試藥劑和蟲源

40%樂果乳油（湖南海利常德農(nóng)藥化工有限公司），70%吡蟲啉水分散粒劑（華北制藥集團(tuán)愛諾有限公司），1.8%阿維菌素乳油（浙江世佳科技有限公司），1.6%狼毒素水乳劑（甘肅國力生物科技開發(fā)有限公司）。

豌豆蚜采自甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)苜蓿試驗(yàn)田（未使用農(nóng)藥），飼養(yǎng)在蠶豆（Vicia fabae）上，人工氣候室溫度為22℃、光周期為14 L∶10 D條件下繁殖多代后，挑取大小一致、健康活潑的無翅成蚜作為供測試蟲。

1.2 試驗(yàn)方法

用點(diǎn)滴法[13]測定1.6%狼毒水乳劑及其復(fù)配劑在不同濃度配比時(shí)對豌豆蚜的致死情況。將供試藥劑40%樂果乳油、1.8%阿維菌素乳油、70%吡蟲啉水分散粒劑分別稀釋500倍、1 000倍、2 000倍、4 000倍、8000倍5個(gè)濃度，將1.6%狼毒素水乳劑稀釋成2mg/L、4 mg/L、8 mg/L、16 mg/L和32 mg/L5個(gè)濃度梯度，進(jìn)行各單劑的毒力測定。并將1.6%狼毒素水乳劑與70%吡蟲啉水分散粒劑按照質(zhì)量濃度比14∶1、7∶1、7∶2、7∶1、7∶8復(fù)配；將1.6%狼毒素水乳劑與40%樂果乳油按照質(zhì)量濃度比16∶1、8∶1、4∶1、2∶1、1∶1進(jìn)行復(fù)配；將1.6%狼毒素水乳劑與1.8%阿維菌素乳油按照質(zhì)量濃度比320∶1、160∶1、80∶1、40∶1、20∶1進(jìn)行復(fù)配，設(shè)清水為對照進(jìn)行毒力測定。采用手動微量點(diǎn)滴器滴定，取藥量為0.5 μL。將各處理藥液點(diǎn)滴于供試蚜的胸部背面，然后將蚜蟲置于直徑為10 cm的培養(yǎng)皿中進(jìn)行飼養(yǎng)，培養(yǎng)皿底部鋪濾紙，內(nèi)部放新鮮蠶豆葉片。每種藥劑每個(gè)濃度點(diǎn)滴60頭蚜蟲，置于溫度為22℃、光周期14 L∶10 D的人工氣候箱內(nèi)繼續(xù)飼養(yǎng)，12 h后檢查蚜蟲死亡數(shù)，記錄數(shù)據(jù)并計(jì)算死亡率。死亡判斷標(biāo)準(zhǔn)為用0號毛筆輕觸蟲體，完全不動者視為死亡。

1.3 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)，利用SPSS 16.0計(jì)算毒力回歸方程、致死中濃度（LC50）及其95%置信限。

2 結(jié)果與分析

2.1 4種藥劑的單一毒力

4種單一藥劑對豌豆蚜的觸殺作用效果見表1。從表1可以看出，70%吡蟲啉水分散粒劑、40%樂果乳油、1.8%阿維菌素乳油對豌豆蚜成蚜都有較強(qiáng)的觸殺活性，但4種藥劑對豌豆蚜的半致死濃度（LC50）不同。

70%吡蟲啉水分散粒劑、40%樂果乳油、1.8%阿維菌素乳油和1.6%狼毒素水乳劑對豌豆蚜的LC50值分別為1.996 mg/L、8.35 mg/L、7.725 mg/L和23.56 mg/L，由此可知，70%吡蟲啉水分散粒劑對豌豆蚜蟲的觸殺效果最好，1.6%狼毒素水乳劑對豌豆蚜蟲的觸殺效果最差。

2.2 1.6%狼毒素水乳劑復(fù)配制劑的毒力

1.6%狼毒素水乳劑分別與3種藥劑復(fù)配后對豌豆蚜成蚜的觸殺作用效果見表2。試驗(yàn)結(jié)果表明，將1.6%狼毒素水乳劑5個(gè)濃度中分別加入一定量的其他3種化學(xué)農(nóng)藥后，聯(lián)合毒力都比各單劑的殺蟲效果好。1.6%狼毒素水乳劑與70%吡蟲啉水分散粒劑質(zhì)量濃度比為14∶1復(fù)配處理的豌豆蚜成蚜聯(lián)合死亡率達(dá)到最大值97.5%；1.6%狼毒素水乳劑與40%樂果乳油質(zhì)量濃度比為16∶1進(jìn)行復(fù)配處理的豌豆蚜成蚜聯(lián)合死亡率達(dá)到最大值97.5%；1.6%狼毒素水乳劑與1.8%阿維菌素乳油質(zhì)量濃度320∶1復(fù)配處理的豌豆蚜成蚜聯(lián)合死亡率達(dá)到最大值90%。

表2 1.6%狼毒素水乳劑與3種藥劑復(fù)配后對豌豆蚜作用結(jié)果

3 結(jié)論與討論

害蟲的抗藥性涉及農(nóng)藥范圍廣，除對有機(jī)磷、擬除蟲菊酯、氨基甲酸酯類常規(guī)藥劑產(chǎn)生抗藥性外，對一些新型藥劑，如對?；孱悮⑾x劑、蘇云金桿菌、病毒制劑、蛻皮激素類殺蟲劑以及新煙堿類殺蟲劑等也產(chǎn)生了抗藥性，抗藥性問題日益突出，成為無公害生產(chǎn)的主要制約因素，因此，開發(fā)環(huán)境友好型農(nóng)藥勢在必行[14]。

本研究結(jié)果表明，在溫度為22℃條件下，70%吡蟲啉水分散粒劑、40%樂果乳油、1.8%阿維菌素乳油、1.6%狼毒素水乳劑對豌豆蚜成蚜都有較強(qiáng)的觸殺活性。70%吡蟲啉水分散粒劑對豌豆蚜成蚜的觸殺效果最好，1.6%狼毒素水乳劑的觸殺效果最差。吡蟲啉作用效果好，與其作為新型煙堿類殺蟲劑獨(dú)特的作用位點(diǎn)有關(guān)，狼毒素作為植物源農(nóng)藥使用后見效慢，不利于迅速撲滅暴發(fā)性、突發(fā)性病蟲害，可能與植物源殺蟲劑在高溫、紫外線、強(qiáng)光照條件下分解加快，在低溫、干旱條件下藥效降低有關(guān)[15]。

1.6%狼毒素水乳劑與3種藥劑復(fù)配試驗(yàn)表明，復(fù)配劑對豌豆蚜的觸殺效果明顯比單一藥劑的觸殺效果好。隨著復(fù)配藥劑濃度的增加，3種復(fù)配劑的聯(lián)合毒力對豌豆蚜的觸殺效果逐漸增強(qiáng)，隨著濃度的增加，觸殺效果可達(dá)90%以上。從試驗(yàn)結(jié)果看，所選用的3種復(fù)配藥劑與1.6%狼毒素水乳劑均有增效作用，而且70%吡蟲啉水分散粒劑與1.6%狼毒素水乳劑復(fù)配效果最佳。

本試驗(yàn)均在室內(nèi)進(jìn)行，由于產(chǎn)品本身中有效成分含量太低、藥效發(fā)揮不太理想、防治效果受環(huán)境因素（溫度、濕度）影響較大、速效性不夠、制劑的貯藏穩(wěn)定性差、質(zhì)量不易控制等自身存在的缺陷，影響著該生物源農(nóng)藥的防治效果和推廣使用。梁為等[16]、楊春江等[17]研究表明瑞香狼毒不同提取溶劑及不同活性成分對殺蟲活性具有重要影響，因此，1.6%狼毒素水乳劑在生產(chǎn)上的推廣應(yīng)用需要對其有效成分及殺蟲活性物質(zhì)提取進(jìn)一步研究。