欒 穎， 梁晉剛,2， 周曉莉， 張正光*

1南京農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院，江蘇 南京 210095； 2農(nóng)業(yè)農(nóng)村部科技發(fā)展中心，北京 100176

1 RNAi的發(fā)現(xiàn)及技術(shù)原理

RNAi(RNA interference)即RNA干擾，是由雙鏈RNA(dsRNA)誘導(dǎo)的同源mRNA高效特異性降解，造成轉(zhuǎn)錄后水平的基因沉默(post-transcriptional gene silencing, PTGS)，影響靶標(biāo)生物的正常生理活動(dòng)或死亡的現(xiàn)象。Guo & Kemphues(1995)發(fā)現(xiàn)正義RNA與反義RNA都能抑制線蟲Caenorhabditiselegans的基因表達(dá)，這個(gè)結(jié)果與反義RNA技術(shù)理論不符。后來，F(xiàn)ireetal.(1998)發(fā)現(xiàn)Guo和Kemphues的實(shí)驗(yàn)中正義RNA抑制基因表達(dá)是由于污染了微量的dsRNA，即為RNAi現(xiàn)象。隨后，科學(xué)家又在多種真核生物中發(fā)現(xiàn)了由dsRNA介導(dǎo)的RNAi現(xiàn)象。

RNAi起始階段會(huì)產(chǎn)生RNAi的標(biāo)志性組分——小干擾RNA(small interfering RNA, siRNA)和另一種調(diào)控基因表達(dá)的非編碼小RNA microRNA(miRNA)?；镜腞NAi過程可以分為3個(gè)主要步驟(Tomari & Zamore,2005)。首先，Dicer(一種RNaseⅢ核酶)將在細(xì)胞中表達(dá)或引入細(xì)胞的內(nèi)源或外源dsRNA分子，加工成小RNA雙鏈體。根據(jù)生物體的不同，可能有一個(gè)或多個(gè)Dicer酶，每個(gè)酶負(fù)責(zé)不同類型的dsRNA產(chǎn)物(Meister & Tuschl,2004)。例如，在黑腹果蠅DrosophilamelanogasterMeigen中，Dicer-1主要用于產(chǎn)生miRNA，而Dicer-2則負(fù)責(zé)將長dsRNAs加工成siRNA (Leeetal.,2004)。其次，這些雙鏈體被解鏈，其中一條被稱為引導(dǎo)鏈的單鏈RNA(ssRNA)被優(yōu)先加載到RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合物(RNA-induced silencing complex，RISC)的蛋白質(zhì)復(fù)合物中。再次，RISC復(fù)合體識別與dsRNA完全或部分序列同源的潛在靶信使RNA(mRNA)，引導(dǎo)鏈促使RISC的內(nèi)切核酸酶將mRNA裂解，最終導(dǎo)致目的基因沉默。

RNAi作為一種新的基因阻斷技術(shù)，具有高度特異性、高效性、持久性和信號的可傳導(dǎo)性等特點(diǎn)(李麗文等,2007)，能夠簡單并高效地抑制特定基因的表達(dá)。目前主要應(yīng)用于以下幾個(gè)方面：(1)基因敲除，傳統(tǒng)的基因敲除是反向遺傳學(xué)的研究手段，技術(shù)難度高、周期長、操作困難，而RNAi技術(shù)可利用siRNA或siRNA表達(dá)載體快速、簡便地抑制目的基因的表達(dá)，并能使在體外培養(yǎng)的細(xì)胞中達(dá)到基因敲除的效果；(2)基因功能分析，RNAi技術(shù)克服了傳統(tǒng)轉(zhuǎn)基因技術(shù)苛刻繁瑣的缺點(diǎn)，不僅可以用于結(jié)構(gòu)基因的功能研究，還可用于細(xì)胞周期調(diào)控、代謝、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、膜轉(zhuǎn)運(yùn)以及DNA損傷反應(yīng)、轉(zhuǎn)錄或甲基化等多方面的基因功能研究；(3)基因治療，用于抑制癌細(xì)胞的基因表達(dá)；(4)調(diào)控信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，RNAi已經(jīng)被證實(shí)能誘導(dǎo)植物干細(xì)胞的分化；(5)病毒感染治療。RNAi技術(shù)可以干擾病毒的復(fù)制及相應(yīng)蛋白質(zhì)的翻譯，有效地控制病毒的繁殖和傳播(周紅建等,2010)。

2 RNAi技術(shù)與傳統(tǒng)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的區(qū)別

傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)基因技術(shù)是利用分子生物學(xué)和基因工程技術(shù)將外源基因插入、整合到受體植物的基因組中，并使其在后代植株中得以遺傳和表達(dá)，從而使受體植物獲得新的性狀。無論過程還是最終產(chǎn)品，都涉及外源重組DNA的導(dǎo)入及整合，且外源DNA在親本作物中的插入位點(diǎn)是隨機(jī)的。由于大部分產(chǎn)品轉(zhuǎn)入的都是外源基因，需要進(jìn)行蛋白表達(dá)，因此，插入位點(diǎn)的不同會(huì)對外源蛋白表達(dá)效率以及受體作物本身的蛋白表達(dá)產(chǎn)生潛在影響。對于RNAi轉(zhuǎn)基因作物來說，插入位點(diǎn)的不同并不會(huì)導(dǎo)致RNA轉(zhuǎn)錄的差異，且該過程不涉及外源蛋白的表達(dá)(焦悅等,2018)。傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)基因抗蟲作物是靠Bt蛋白來控制靶標(biāo)害蟲。Bt蛋白是革蘭氏陽性土壤細(xì)菌蘇云金桿菌產(chǎn)生的一種具有高度特異性的殺蟲蛋白，這種蛋白被靶標(biāo)昆蟲取食后在中腸溶解為前毒素，再被蛋白酶水解為毒素分子，毒素分子與中腸細(xì)胞結(jié)合使細(xì)胞膜穿孔，最終導(dǎo)致昆蟲死亡(林珠鳳等,2015)。Bt蛋白生物制劑迄今仍是世界上生產(chǎn)與應(yīng)用規(guī)模最大的微生物殺蟲劑。與其他生物殺蟲劑一樣，Bt生物制劑也有藥效慢、持效期短、易受環(huán)境影響、成本高等缺陷與不足，這是制約其大面積推廣應(yīng)用的主要因素(陸宴輝和梁革梅,2016)。

研究表明,RNAi技術(shù)相比傳統(tǒng)轉(zhuǎn)基因技術(shù)有很大的優(yōu)勢，主要包括：(1)高度特異性，dsRNA介導(dǎo)的RNAi只能特異性地降解同源mRNA，并不影響其他mRNA的表達(dá)，因此，RNAi技術(shù)應(yīng)用于抗蟲作物上時(shí)只會(huì)針對特定的一種或幾種靶標(biāo)生物，而傳統(tǒng)轉(zhuǎn)基因技術(shù)突變的隨機(jī)性很大；(2)高效性，尤其是對一些鞘翅目昆蟲(Zottietal.,2018)，少量的dsRNA就可以抑制大量同源mRNA的表達(dá)，比傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)基因技術(shù)節(jié)約了大量人力并縮短了時(shí)間；(3)RNAi轉(zhuǎn)基因植物表達(dá)的不是蛋白而是dsRNA和siRNA，這種表達(dá)形式易于在農(nóng)作物中推廣，因?yàn)椴迦氲街参锘蚪M上的外源基因干擾序列部分的mRNA轉(zhuǎn)錄后形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)，并被植物體內(nèi)的Dicer識別降解，不會(huì)再被翻譯成蛋白質(zhì)，從而避免了外源蛋白質(zhì)在植株體內(nèi)的積累，具有較高的生物安全性。作為調(diào)節(jié)植物生長發(fā)育和保持遺傳穩(wěn)定性的重要機(jī)制，植物存在大量的內(nèi)源dsRNA和siRNA，因此，表達(dá)與植物自身無同源序列的 dsRNA，不會(huì)對寄主植物產(chǎn)生不良的影響，也更易被寄主植物接受(郭強(qiáng)等,2012)。綜上所述，RNAi技術(shù)具有重要的生物學(xué)意義，在農(nóng)作物害蟲防治領(lǐng)域有廣闊的前景。

近幾年來，人們將RNAi技術(shù)大量地應(yīng)用到了農(nóng)業(yè)領(lǐng)域。在作物改良方面，高夢燭等(2016)通過構(gòu)建RNAi膜蛋白載體并導(dǎo)入到轉(zhuǎn)基因擬南芥ArabidopsisthalianaHeynh中，從而提高了擬南芥的抗寒性，Wangetal.(2017)通過RNAi篩選出與剛毛檉柳TamarixhispidWilld的耐鹽性相關(guān)的基因；在害蟲防治方面，李嬌(2016)通過注射dsRNA沉默幾丁質(zhì)合成酶A基因從而來控制稻縱卷葉螟CnaphalocrocismedinalisGuenee，Yangetal.(2017)利用RNAi技術(shù)敲除褐飛虱NilaparvatalugensStal體內(nèi)的基因TPS1和TPS2，導(dǎo)致30%的昆蟲死亡；在病害防治方面，黃靜等(2017)通過RNAi提高了番木瓜對環(huán)斑病毒的抗性；在昆蟲抗藥性方面，Guoetal. (2015)利用RNAi技術(shù)沉默了小菜蛾P(guān)lutellaxyllostellaL.的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因，降低了其對CryiAc毒素的敏感性，從而影響小菜蛾的抗藥性。目前已通過RNAi技術(shù)有效防控的主要昆蟲見表1。

表1 目前已通過RNAi技術(shù)有效防控的主要昆蟲Table 1 Major insect pests that have been effectively controlled by RNA interference technology

3 RNAi技術(shù)可能存在的風(fēng)險(xiǎn)

近年來，雖然RNAi已經(jīng)成為作物保護(hù)的有效和成功的技術(shù)，但在全面采用該技術(shù)控制有害生物之前還有一些問題要解決。使用基于RNAi的線蟲處理策略的一個(gè)主要問題是潛在的脫靶效應(yīng)，即siRNA與非靶標(biāo)基因RNA發(fā)生互補(bǔ)配對并非特異性地抑制了該基因的表達(dá)(尚仁福和吳立剛,2016)。由于RNAi機(jī)制以高度序列特異性的方式發(fā)生，與導(dǎo)入的dsRNA分子具有部分同源性的內(nèi)源轉(zhuǎn)錄物的交叉雜交可能導(dǎo)致非靶基因的沉默，這可能對非靶向生物體產(chǎn)生影響，具有潛在的風(fēng)險(xiǎn)(Duttaetal., 2014)。

3.1 對改良植物本身的風(fēng)險(xiǎn)

3.1.1 dsRNA與作物的轉(zhuǎn)基因蛋白相互作用 轉(zhuǎn)基因抗蟲作物Bt蛋白的作用模式是結(jié)合昆蟲的中腸受體細(xì)胞，隨后將細(xì)胞穿孔導(dǎo)致細(xì)胞裂解(Vachonetal.,2012)，而dsRNA的作用模式是消耗靶mRNA(Kennerdell & Carthew,1998)，這2種作用模式是不相關(guān)的，但Bt蛋白很有可能與dsRNA結(jié)合并在轉(zhuǎn)基因作物中表達(dá)。因此，針對Bt蛋白與dsRNA潛在的結(jié)合要進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評估。Bachmanetal. (2016)評估了Cry蛋白和dsRNA(Cry3Bb1和玉米根蟲DiabroticavirgiferaLeConte的DvSnf7 dsRNA)之間的潛在相互作用，抗蟲玉米雜交種MON 87411既可以產(chǎn)生抵抗玉米根蟲的Cry3Bb1 Bt蛋白，又可以針對玉米根蟲產(chǎn)生DvSnf7 dsRNA，使玉米根蟲發(fā)生RNA干擾。李翠萍等(2012)、Belden & Lydy (2006)采用了2種方法對這兩者的潛在互作進(jìn)行了評估，第一種方法是單獨(dú)評估Cry蛋白和dsRNA在玉米根蟲內(nèi)的反應(yīng)水平，再將兩者結(jié)合評估，結(jié)果證明兩者組合的反應(yīng)水平是單獨(dú)反應(yīng)水平累加的結(jié)果，并且與獨(dú)立反應(yīng)下的預(yù)測反應(yīng)水平?jīng)]有顯著差異。第二種方法采用固定的半致死濃度測定法，即將一方的固定亞致死濃度加入到另一方的有效濃度中，測定12 d內(nèi)兩者的半數(shù)致死濃度(LC50)是否有變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Cry3Bb1和DvSnf7的LC50均不受對方影響。另外，Levineetal. (2015)用對Cry3Bb1敏感、對DvSnf7不敏感的科羅拉多馬鈴薯甲蟲Leptinotarsadecemlineata(Say)測試了Cry3Bb1和DvSnf7之間相互作用的潛力，結(jié)果證明DvSnf7不改變Cry3Bb1的活性。

3.1.2 轉(zhuǎn)基因作物遺傳穩(wěn)定性 轉(zhuǎn)基因作物在不同代際間目的基因的整合和表達(dá)能力不盡相同，后代可能發(fā)生可遺傳基因突變(即堿基替換、刪除、插入)，且編碼siRNA基因比編碼蛋白基因的變異率高(Obbardetal.,2009)。因此，應(yīng)分析害蟲的抗性發(fā)展，評估其發(fā)生時(shí)間、影響規(guī)模(局部的、區(qū)域的或全國性的)及嚴(yán)重程度，并建立預(yù)測模型。此外，只有建立統(tǒng)一的sRNA活性標(biāo)準(zhǔn)才能開展可比性評價(jià)，檢測至少3代目的基因表達(dá)的穩(wěn)定性和觀察目標(biāo)性狀表現(xiàn)的穩(wěn)定性(賀煒華等,2008)。

3.2 對靶標(biāo)生物的風(fēng)險(xiǎn)

轉(zhuǎn)基因作物被靶標(biāo)害蟲長期食用后，靶標(biāo)害蟲種群易發(fā)生抗性進(jìn)化，通過對殺蟲物質(zhì)的螯合或降解，使作用方式中的任何一個(gè)步驟無效或目標(biāo)部位的敏感性降低，可在靶標(biāo)生物種群中產(chǎn)生抗性導(dǎo)致作物抗蟲的持久性降低。盡管還沒有鑒定出RNAi的抗性機(jī)制，但可以假定潛在的抗性機(jī)制。如在反應(yīng)鏈中只要存在以下任何一種情況：靶標(biāo)害蟲攝取的dsRNA減少、消化系統(tǒng)中分子降解導(dǎo)致細(xì)胞吸收的dsRNA減少、Dicer酶處理得到的小RNA減少、siRNA分子的RISC復(fù)合物識別減少、RISC復(fù)合物不能降解目標(biāo)mRNA或阻斷RNAi的系統(tǒng)擴(kuò)散等，RNAi轉(zhuǎn)基因作物對靶標(biāo)生物的抗性就會(huì)降低(Fishilevichetal.,2016)。昆蟲還可通過增加目標(biāo)基因序列的轉(zhuǎn)錄速度或上調(diào)其他與目標(biāo)(沉默)基因有相同或相似功能的基因來避免基因沉默。

庇護(hù)所策略是目前害蟲抗性治理的主要方法(Fittetal.,1994)。庇護(hù)所內(nèi)種植的是不包含殺蟲物質(zhì)并允許對殺蟲物質(zhì)敏感的昆蟲存活的作物，對特定性狀沒有選擇壓力，因此，可以保存不具有抗性等位基因的昆蟲。將庇護(hù)所和轉(zhuǎn)基因作物混合種植，使敏感個(gè)體與轉(zhuǎn)基因植株上的抗性個(gè)體隨機(jī)交配，從而使它們的后代抗性等位基因是雜合的。如果雜合子產(chǎn)生的后代在轉(zhuǎn)基因抗蟲植株上也不能存活，即達(dá)到了治理害蟲的目的(Gould,1998)。

3.3 對生態(tài)環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)

3.3.1 dsRNA在環(huán)境中殘留 RNAi生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評估的一個(gè)重要組成部分是確定殺蟲物質(zhì)殘留在環(huán)境中的潛在可能性以及潛在的非目標(biāo)物種的種群數(shù)量。通過檢測活性殺蟲分子的環(huán)境穩(wěn)定性，可以確定對易感染的非靶標(biāo)生物是否存在長期風(fēng)險(xiǎn)(Kough & Edelstein,2012)。Dubelmanetal. (2014)針對不同理化性質(zhì)的土壤進(jìn)行了檢測，并將非靶標(biāo)生物暴露于dsRNA培養(yǎng)土壤以評估生物活性(即昆蟲死亡率)。結(jié)果表明，在粉砂壤土、壤砂土和黏壤土這3種土壤類型中，玉米根蟲Snf7 dsRNA在48 h后是不可檢測的，Snf7 dsRNA的半衰期小于30 h。很多報(bào)道也證實(shí)Bt蛋白半衰期在一到幾天范圍內(nèi)(Bryan,2005)，Snf7 dsRNA和其他dsRNA不可能在土壤中持續(xù)存在。如果要證明dsRNA在土壤中的持久性，有必要了解被暴露的黏附生物體是否對dsRNA敏感，同時(shí)是否具備必要的加工RNA的分子和與之配對的靶序列。

3.3.2 對非靶標(biāo)生物的影響 靶標(biāo)生物攝入的dsRNA對其有高度的特異性(Baumetal.,2007)，然而多個(gè)研究表明，序列特異性反應(yīng)會(huì)隨著物種之間進(jìn)化距離和序列間分歧的增加而降低(Whyardetal.,2009)。目前，用于轉(zhuǎn)基因抗蟲作物的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評估為評估RNAi介導(dǎo)的昆蟲保護(hù)作物的潛在危害提供了基礎(chǔ)。如針對DvSnf7的dsRNA的致死和亞致死能力在4個(gè)目和10個(gè)科的昆蟲中進(jìn)行的評估，結(jié)果表明，DvSnf7的dsRNA殺蟲活性范圍很窄，只有在甲蟲亞科的甲蟲評估中觀察到這種影響，在敏感物種中須滿足一定的序列要求才能與DvSnf7匹配，且在昆蟲中實(shí)現(xiàn)RNAi介導(dǎo)的反應(yīng)存在額外的障礙，因此不是所有的物種都對攝入的dsRNA敏感，或在環(huán)境暴露的低濃度下不敏感(Allen & Rd,2012; Bachmanetal.,2013; Huvenne & Smagghe,2010; Tereniusetal.,2011)。因此，評估dsRNA對非靶標(biāo)生物的影響，可以同時(shí)喂食靶標(biāo)和非靶標(biāo)生物，重點(diǎn)監(jiān)測與靶標(biāo)生物序列同源性高而易受感染的生物，并測試RNAi中使用的每種dsRNA對非靶標(biāo)生物的影響。

4 RNAi技術(shù)的安全評價(jià)

目前的科技水平不能預(yù)測RNAi轉(zhuǎn)基因作物對環(huán)境和被人們食用后造成的影響，因此，必須采取一系列嚴(yán)格的措施對轉(zhuǎn)基因作物進(jìn)行全程安全性評價(jià)和監(jiān)控管理，維護(hù)生態(tài)多樣性，保障人們的人身安全。雖然國際上已有一些經(jīng)驗(yàn)和數(shù)據(jù)可以借鑒，但仍需對RNAi這項(xiàng)新技術(shù)作出具體分析，以便盡快建立起符合實(shí)際需求的安全性評價(jià)方法，這樣才能優(yōu)化當(dāng)前的轉(zhuǎn)基因技術(shù)，將RNAi轉(zhuǎn)基因作物進(jìn)行商業(yè)化種植。

4.1 環(huán)境安全評價(jià)

RNAi轉(zhuǎn)基因作物在環(huán)境釋放期間可能會(huì)對周邊生態(tài)造成影響，危害當(dāng)?shù)氐纳鷳B(tài)多樣性。為了貫徹環(huán)境可持續(xù)發(fā)展的理念，要對轉(zhuǎn)基因作物進(jìn)行嚴(yán)格的環(huán)境安全評價(jià)。主要包括：(1)土壤微生物安全評價(jià)，RNAi轉(zhuǎn)基因作物在大田種植時(shí)，作物本身及其基因產(chǎn)物進(jìn)入土壤后可能與土壤微生物相互作用，影響土壤中微生物的活動(dòng)，從而影響土壤肥力；(2)生存競爭力安全評價(jià)，RNAi轉(zhuǎn)基因作物中外源基因表達(dá)可能具有更強(qiáng)的環(huán)境適應(yīng)能力，將其釋放到生態(tài)環(huán)境中后，與非轉(zhuǎn)基因的作物競爭過程中具有更強(qiáng)的競爭力，可能影響到生物的多樣性，甚至變成新型的雜草(劉華清等,2010)；(3)基因漂移安全評價(jià)，RNAi轉(zhuǎn)基因作物的新基因可能會(huì)在生態(tài)中發(fā)生基因漂移和與近緣野生種雜交，要針對這2種情況對當(dāng)?shù)刂参锏纳L情況進(jìn)行檢測；(4)對非靶標(biāo)生物的安全評價(jià)，RNAi轉(zhuǎn)基因作物可能會(huì)對非靶標(biāo)生物的生存造成影響，因此要監(jiān)測作物周圍的非靶標(biāo)生物的活性及評價(jià)其潛在的影響；(5)靶標(biāo)生物抗性安全評價(jià)，靶標(biāo)生物可能會(huì)不斷進(jìn)化，淘汰對作物敏感的個(gè)體，最終對作物產(chǎn)生抗性，因此要監(jiān)測評估靶標(biāo)生物不同代的抗性。

4.2 食用安全評價(jià)

RNAi轉(zhuǎn)基因作物的食用安全與人類生命安全息息相關(guān)，也是人們最關(guān)注的問題。因此，RNAi轉(zhuǎn)基因作物從實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)向大規(guī)模生產(chǎn)之前要實(shí)施一系列的食用安全評價(jià)。(1)營養(yǎng)學(xué)安全評價(jià)。檢測RNAi轉(zhuǎn)基因作物中的蛋白質(zhì)、淀粉、纖維、礦物質(zhì)以及其他與人類健康有關(guān)的營養(yǎng)物質(zhì)，還有凝集素、植酸酶、蛋白酶等抗?fàn)I養(yǎng)因素與生物堿、毒草等天然毒素，評估這些物質(zhì)的含量與非轉(zhuǎn)基因品種之間是否有顯著性差異。(2)毒理學(xué)安全評價(jià)。應(yīng)考慮RNAi轉(zhuǎn)基因作物是否會(huì)帶來新的毒素或存在產(chǎn)生新毒素的情況。(3)致敏性學(xué)安全評價(jià)。判斷新基因的來源，根據(jù)基因是否來源于已知的對人體致敏的物種而采取不同的分析步驟。比較氨基酸序列的相似度，再進(jìn)行特異性血清篩選實(shí)驗(yàn)，然后進(jìn)行模擬胃腸液消化實(shí)驗(yàn)。建立動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)，根據(jù)各階段的測試結(jié)果，對RNAi轉(zhuǎn)基因作物致敏性進(jìn)行評價(jià)。(4)非期望效應(yīng)安全評價(jià)。RNAi轉(zhuǎn)基因作物可能會(huì)出現(xiàn)與預(yù)期效果不符的現(xiàn)象，包括RNAi轉(zhuǎn)基因作物自身可能出現(xiàn)的非期望效應(yīng)，以及食用了轉(zhuǎn)基因食物后，動(dòng)物在生理上可能存在的非期望變化。目前RNAi轉(zhuǎn)基因作物非預(yù)期效應(yīng)的測定方法包括靶方法和非靶方法2種。(5)腸道健康安全評價(jià)。RNAi轉(zhuǎn)基因食物可能會(huì)影響腸道微生物菌群從而影響人體健康，目前主要采用亞型分析法非定向檢測腸道微生物，包括微陣列分析基因表達(dá)、蛋白雙向電泳和質(zhì)譜、分析蛋白質(zhì)、液譜結(jié)合核磁共振分析化合物等(李媛媛,2017)。

5 RNAi技術(shù)的前景與展望

本文在前人研究RNAi技術(shù)的基礎(chǔ)上進(jìn)行了一定的補(bǔ)充和完善，介紹了現(xiàn)階段的主要潛在風(fēng)險(xiǎn)以及可行的評估方案，RNAi技術(shù)具有廣闊的農(nóng)業(yè)應(yīng)用前景，不但可以有效減少害蟲數(shù)量、提高水稻產(chǎn)量、降低種植成本，還可以減少化學(xué)農(nóng)藥造成的環(huán)境污染，有利于實(shí)現(xiàn)農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。同時(shí)，RNAi技術(shù)也存在一定的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)，雖然RNAi技術(shù)影響生態(tài)安全性的研究已取得了一些進(jìn)展，但仍存在許多未知領(lǐng)域有待澄清和證明。針對目前RNAi的研究現(xiàn)狀，應(yīng)對其轉(zhuǎn)基因作物大規(guī)模商品化種植后可能出現(xiàn)的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行長期的系統(tǒng)監(jiān)測, 同時(shí)加強(qiáng)對作物生物安全的試驗(yàn)技能研究，發(fā)展快速、準(zhǔn)確檢測RNAi作物生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)的新技術(shù)和新方法, 建立完善的生態(tài)安全評價(jià)體系，從而充分發(fā)揮RNAi技術(shù)在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上的作用。