馮云霞，王 路，惠永華

（1.濟(jì)源市畜產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)中心，河南濟(jì)源 459000；2.濟(jì)源市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，河南濟(jì)源 459000；3.濟(jì)源市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，河南濟(jì)源 459000）

脂肪酸β-氧化是家禽胚胎發(fā)育的主要能量來源，是孵化所必需的條件。有研究表明，肉堿能促進(jìn)脂肪?；鶑牡包S通過卵黃囊膜轉(zhuǎn)移到胚胎小雞的組織中（喻小瓊等，2013）。然而，雞胚在孵育過程中合成左旋肉堿的能力有限，此外，用植物性原料飼養(yǎng)的蛋雞新產(chǎn)的雞蛋含有低濃度的左旋肉堿（馬友彪等，2015）。Kidd等（2009）發(fā)現(xiàn)，日糧添加40 mg/kg的左旋肉堿可以改變商品肉雞的代謝，提高大腿組織的產(chǎn)量，隨后在20%粗蛋白質(zhì)的日糧組肉雞小腿肌肉產(chǎn)量更高。添加25 mg/kg肉堿可以提高青年母雞所產(chǎn)雞蛋在孵化18 d后卵黃和肝臟肉堿的濃度，影響雞胚脂肪酸β-氧化（Peebles等，2007）。在相同肉雞品種的日糧中添加肉堿可以降低腹脂含量，此外，日糧添加肉堿降低了飼喂高營(yíng)養(yǎng)濃度日糧肉雞胴體脂肪，增加胸肌產(chǎn)量（Kidd等，2009）。Zhai等（2008）研究發(fā)現(xiàn)，17～18 d雞胚注射0.05～10 μmol肉堿對(duì)肉雞體重?zé)o顯著影響，但有改善雞胚孵化率的趨勢(shì)。Keralapurath等（2010）發(fā)現(xiàn)，受精蛋孵化0～3d注射0.5～8 mg/100 μL肉堿顯著降低了肝臟葡萄糖濃度，提高肌肉水分含量。上述研究結(jié)果表明，肉堿對(duì)肉雞受精蛋的影響可能與孵化率和后期生長(zhǎng)性能有關(guān)。因此，本試驗(yàn)利用孵化18 d后的雞胚通過羊膜注射肉堿，研究其對(duì)雞胚孵化率及出殼后49 d生長(zhǎng)和屠宰性能的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)處理 試驗(yàn)選擇28周齡蛋雞所產(chǎn)的受精蛋672枚，稱重后隨機(jī)放在4個(gè)孵化盤中，每盤168枚。參考李廣新等（2012）的方法控制孵化溫度、時(shí)間、翻單頻率和濕度。受精蛋在孵化18 d后進(jìn)行稱重，之后隨機(jī)分為6組（每組112枚，4個(gè)重復(fù)）。對(duì)照組不進(jìn)行任何處理，穿孔組僅用注射器進(jìn)行假注射，稀釋組注射100 μL疫苗稀釋液，其他3組分別注射0.6，2.4和9.6 mg肉堿/100 μL稀釋液。處理組的每盤蛋水平隨機(jī)排列，不受其在培養(yǎng)箱內(nèi)位置的影響。注射方法、稀釋液配制等參考Keralapurath等（2010）的研究結(jié)果。雞胚注射肉堿后，每組隨機(jī)選擇16枚雞蛋單獨(dú)放置在一個(gè)盤子上，放在同一孵化箱中，同樣，隨機(jī)選擇未注射的對(duì)照組雞蛋，并將其轉(zhuǎn)移到同一孵化器中各自的孵化盤中。在每4個(gè)托盤上，每個(gè)孵化箱包含6個(gè)處理組中1個(gè)處理組的16枚雞蛋，所有6個(gè)處理組在每一個(gè)托盤再次有代表性樣品。在出殼第0天（孵化21.5 d）隨機(jī)選擇出殼仔雞（每個(gè)處理組12只），用記號(hào)筆標(biāo)記，并轉(zhuǎn)移到安有保溫?zé)舻膰鷻谥?。每個(gè)處理組的雛雞分配在一個(gè)平行，因此，在所有4個(gè)托盤層上，6個(gè)處理組的雛雞各有24個(gè)平行。

1.2 數(shù)據(jù)收集 每6 h監(jiān)測(cè)孵化19.5～21.5 d每只雛雞孵化的時(shí)間，平均孵化時(shí)間為20.5 d后的時(shí)間。孵化率為出殼仔雞數(shù)占受精蛋數(shù)的百分比。每天記錄每個(gè)組別的死亡率，每周記錄肉雞飼料用量、體重、雞只數(shù)量，計(jì)算整個(gè)生長(zhǎng)期內(nèi)的飼料用量，料重比，總增重。試驗(yàn)第49天后，每組隨機(jī)選擇6只雞禁食12 h后稱重然后屠宰，收集腹脂、小腿肌、大腿肌、胸肌和翅膀，計(jì)算屠宰率及組織與活體重比值。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析 本研究的孵育試驗(yàn)部分采用隨機(jī)完全設(shè)計(jì)，4個(gè)托盤水平上的6個(gè)處理均相同。當(dāng)仔雞出殼后，來自相同處理組的雛雞被分配到一個(gè)平行，而這些平行被隨機(jī)分配到每個(gè)處理中。仔雞出殼后也采用完全隨機(jī)的試驗(yàn)設(shè)計(jì)，在每個(gè)平行中，每只雞被視為單獨(dú)一個(gè)重復(fù)。采用單因素方差分析注射肉堿后對(duì)各組指標(biāo)的影響，用SAS軟件One-way分析肉堿注射濃度對(duì)孵化時(shí)間、受精率、生長(zhǎng)性能和屠宰性能均值的影響，各組均值差異采用Tukey法進(jìn)行多重比較，P＜0.05表示組間差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 雞胚注射肉堿后對(duì)雞蛋孵化20.5 d后仔雞出殼時(shí)間和孵化率的影響 由表1可知，雞胚注射不同濃度的肉堿對(duì)仔雞出殼時(shí)間和受精蛋孵化率無顯著影響（P＞0.05），但隨著雞胚肉堿注射濃度的升高，仔雞出殼時(shí)間和受精蛋孵化率表現(xiàn)為二次曲線效應(yīng)趨勢(shì)（P=0.07）。仔雞出殼時(shí)間和肉堿的注射濃度具有顯著相關(guān)性（P＜0.05，R2=0.97），雞胚受精率也和肉堿的注射濃度具有顯著相關(guān)性（P＜ 0.05，R2=0.93）。

表1 雞胚注射肉堿后對(duì)雞蛋孵化20.5 d后仔雞出殼時(shí)間和孵化率的影響

2.2 雞胚注射肉堿后對(duì)仔雞生長(zhǎng)和屠宰性能的影響 由表2可知，雞胚注射不同濃度的肉堿對(duì)出殼后仔雞的總增重、采食量、料肉比和死亡率均無顯著影響（P＞0.05）。

表2 雞胚注射肉堿后對(duì)仔雞生長(zhǎng)性能的影響

雞胚注射肉堿后對(duì)仔雞屠宰性能的影響見表3，結(jié)果顯示，18 d雞胚注射不同濃度肉堿對(duì)出殼仔雞屠宰性能指標(biāo)如屠宰率、大腿肌率、小腿肌率、胸肌率和翅膀重均無顯著影響（P＞0.05）。

表3 雞胚注射肉堿后對(duì)仔雞屠宰性能的影響

3 討論

3.1 雞胚注射肉堿后對(duì)雞蛋孵化20.5 d后仔雞出殼時(shí)間和孵化率的影響 水是脂肪代謝過程所產(chǎn)生的副產(chǎn)物。眾所周知，雞胚在孵化前必須有足夠數(shù)量的水從雞胚中流失，以適應(yīng)代謝水的產(chǎn)生，而不足的水分流失將延長(zhǎng)孵化時(shí)間。Zhai等（2008）研究發(fā)現(xiàn)，雞蛋孵化過程卵黃中高水平肉堿會(huì)降低卵黃脂肪含量，說明肉堿對(duì)發(fā)育中雞胚的脂肪利用具有刺激效應(yīng)。在本研究中，肉堿濃度與孵化時(shí)間和孵化率呈正相關(guān)關(guān)系，表明肉堿劑量的增加可能刺激了胚胎代謝，增加了卵黃脂肪的利用，進(jìn)而增加卵內(nèi)含水量。作者推測(cè)，在后續(xù)試驗(yàn)中如果增加試驗(yàn)雞胚的數(shù)量及肉堿注射濃度可能顯著影響仔雞出殼時(shí)間和孵化率。Keralapurath等（2010）發(fā)現(xiàn)，孵化過程給雞胚注射肉堿發(fā)現(xiàn)，孵化后3 d肝臟葡萄糖水平與未注射組無顯著差異。由于其結(jié)果顯示對(duì)肝臟和肌肉脂質(zhì)濃度沒有顯著影響，這些組織中脂肪酸的氧化率似乎沒有受到肉堿注射濃度的影響。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，雞胚注射9.6 mg肉堿/100 μL稀釋液（每個(gè)雞胚49.6 μmol）對(duì)雞胚無毒副作用，這與Zhai等（2008）的研究結(jié)果一致。此外，Sato等（2006）結(jié)果顯示，雞胚體外注射8 mg肉堿/100 μL稀釋液有延長(zhǎng)仔雞出殼時(shí)間和孵化率的趨勢(shì)，這可能與產(chǎn)蛋與產(chǎn)肉型雞的脂肪代謝不同有關(guān)，從而使其雞胚對(duì)肉堿的反應(yīng)不同。

3.2 雞胚注射肉堿后對(duì)仔雞生長(zhǎng)和屠宰性能的影響 脂肪酸氧化效率的提高可能會(huì)降低孵化前胚胎葡萄糖異生途徑和提高肌肉組織蛋白核查，從而導(dǎo)致生長(zhǎng)過程中肌肉產(chǎn)量的增加。由于骨骼肌是脂肪酸氧化的主要場(chǎng)所，外源性添加肉堿對(duì)脂質(zhì)利用的影響可能在不同的肌肉組織中表現(xiàn)不同（Klasing，1998）。Kidd等（2009）發(fā)現(xiàn)，日糧添加40 mg/kg肉堿可以提高肉雞肌肉產(chǎn)量，特別是腿肌，但對(duì)體重、日增重、采食量、料比和死亡率無顯著影響，同時(shí)對(duì)胸肌產(chǎn)量也無顯著影響。Xu等（2003）的研究發(fā)現(xiàn)，日糧添加25 mg/kg肉堿可以提高公雞胸肌脂肪含量。但Peebles等（2007）報(bào)道，種雞日糧中添加25 mg/kg肉堿對(duì)雞胚的發(fā)育和代謝無顯著影響，同時(shí)Kidd等（2005）使用同一品種的種雞也發(fā)現(xiàn)，肉雞對(duì)出殼后仔雞的生長(zhǎng)性能無顯著影響。盡管雞胚注射肉堿，對(duì)胚胎期和出殼后仔雞的生長(zhǎng)和屠宰性能無顯著影響，但顯著降低了屠宰后胴體脂肪的沉積量（Kidd等，2005），其研究結(jié)果表明，雞胚注射肉堿出殼后仔雞飼喂高營(yíng)養(yǎng)濃度日糧可以降低腹脂含量，提高胸肌產(chǎn)量。Rabie等（1997）發(fā)現(xiàn)，日糧添加50 mg/kg肉堿可以顯著改善肉雞體重，主要原因是肉堿提高脂肪酸氧化效率的結(jié)果，從而提高日糧氮的利用率。但與上述所說的肉堿對(duì)氮利用率的改善作用相比較，Rodehutscord等（2002）的結(jié)果發(fā)現(xiàn)，日糧添加肉堿對(duì)組織蛋白質(zhì)利用和氮平衡無顯著影響。

4 結(jié)論

雞胚注射0.6和9.6 mg肉堿/100 μL稀釋液對(duì)隨后仔雞生長(zhǎng)和屠宰性能無顯著影響，但雞胚注射9.6 mg肉堿/100 μL稀釋液具有延長(zhǎng)出殼和孵化率的趨勢(shì)。