胡永婷，李彥明，李穎靚

（山西農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物科技學(xué)院，山西太谷 030800）

真菌毒素是真菌在飼料原料中常見(jiàn)的有毒次生代謝產(chǎn)物，對(duì)動(dòng)物健康和生長(zhǎng)性能有嚴(yán)重影響。在已知的300～400種霉菌毒素中，黃曲霉毒素和嘔吐毒素是飼料工業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)中最常見(jiàn)且毒性最強(qiáng)兩種（黃廣明等，2010）。雖然產(chǎn)生黃曲霉毒素和嘔吐毒素的真菌生長(zhǎng)在不同的環(huán)境條件下，使它們不太可能同時(shí)污染谷物，但在飼料加工過(guò)程中，兩種受黃曲霉毒素或嘔吐毒素污染的谷物來(lái)源很可能混合在一起，豬可能會(huì)采食含有霉菌毒素的飼料，這些霉菌毒素可能產(chǎn)生協(xié)同作用，進(jìn)一步對(duì)動(dòng)物造成負(fù)面影響（黃海青等，2005）。降低霉菌毒素污染有害影響的一種方法是使用飼料添加劑，如黏土類和酵母，它們可能通過(guò)結(jié)合方式來(lái)降低霉菌毒素的影響。這些添加劑的功效取決于霉菌毒素的種類及其在飼料中的濃度。蒙脫石是黏土的一種，是一種層狀硅酸鹽，通過(guò)陽(yáng)離子交換吸附極性黃曲霉毒素化合物（葉盛群和諶剛，2012）。酵母在降低毒素有害風(fēng)險(xiǎn)也具有一定作用，干燥的啤酒酵母保存了酵母的部分發(fā)酵和吸附能力，具有霉菌毒素吸收能力，因?yàn)榻湍讣?xì)胞壁含有多糖、脂質(zhì)和具有吸附中心的蛋白質(zhì)，通過(guò)氫和離子鍵或疏水作用與霉菌毒素結(jié)合（候然然，2007）。本研究的目的是采用黃曲霉毒素B1和嘔吐毒素污染的飼料飼喂斷奶仔豬，并在飼料中添加蒙脫石和酵母培養(yǎng)物復(fù)合物，研究其對(duì)豬生長(zhǎng)性能、器官健康和免疫狀態(tài)的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)選擇體重（8.75±0.38）kg，28 d斷奶的三元雜交豬500頭，隨機(jī)分為5個(gè)組，每組5個(gè)重復(fù)（20頭/重復(fù)），試驗(yàn)共開(kāi)展42 d。對(duì)照組為未加毒素污染原料，處理1組含150 μg/kg黃曲霉B1毒素+1100 μg/kg嘔吐毒素，處理2組在處理1組中添加2 mg/kg蒙脫石，處理3組在處理1組中添加1.0 mg/kg蒙脫石和0.5 mg/kg酵母培養(yǎng)物復(fù)合物，處理4組在處理1組中添加0.5 mg/kg蒙脫石和0.5 mg/kg酵母培養(yǎng)物復(fù)合物。日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

1.2 樣品收集與測(cè)定

1.2.1 生長(zhǎng)性能 試驗(yàn)期間每周按照重復(fù)對(duì)豬只進(jìn)行稱重、記錄飼料用量，試驗(yàn)結(jié)束后計(jì)算各階段豬只日增重、采食量和飼料報(bào)酬（增重/飼料用量）。

表1 對(duì)照組和毒素污染組日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.2.2 血液指標(biāo) 在42 d，每個(gè)重復(fù)選擇5頭豬進(jìn)行頸靜脈采集血液樣本。血樣用于血液學(xué)、生化和免疫學(xué)分析。分離血清用于測(cè)定肝生化指標(biāo)、免疫球蛋白分析。

1.2.3 組織學(xué)分析 試驗(yàn)結(jié)束后收集肝臟、脾臟和腎臟，稱重后計(jì)算其相對(duì)重量。分析肝臟、脾臟和腎臟亮度（L）、紅度（a）和黃度（b）。顯微鏡鏡檢肝臟和腎臟組織損傷情況，0～5%正常，5%～15%輕微損傷，15%～40%中度損傷，大于40%嚴(yán)重?fù)p傷。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析 數(shù)據(jù)分析采用SAS軟件單因素方差模型，以初始體重作為分組依據(jù)，組間均值采用Tukey法進(jìn)行多重比較，當(dāng)P＜0.05時(shí)，判定為統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異顯著，當(dāng)0.10＜P＜0.05時(shí)，判定為具有顯著差異的趨勢(shì)。

2 結(jié)果與分析

2.1 毒素污染日糧添加酵母培養(yǎng)物對(duì)豬生長(zhǎng)性能的影響 由表2可知，在試驗(yàn)第3周飼喂毒素污染日糧的豬日增重降低，但在后兩周未持續(xù)降低。整個(gè)試驗(yàn)1～42 d毒素污染日糧較對(duì)照組有降低日增重的趨勢(shì)（P=0.08），但毒素污染日糧與對(duì)照組對(duì)1～42 d斷奶仔豬平均日采食量和飼料報(bào)酬均無(wú)顯著影響（P＞0.05）。毒素污染日糧添加2 mg/kg蒙脫石和1.0 mg/kg蒙脫石+0.5 mg/kg酵母培養(yǎng)物較毒素污染日糧組顯著改善了仔豬的生長(zhǎng)性能（P＜0.05）。

表2 添加酵母培養(yǎng)物對(duì)豬生長(zhǎng)性能的影響

2.2 毒素污染日糧添加酵母培養(yǎng)物對(duì)豬血液學(xué)指標(biāo)的影響 由表3可知，仔豬飼喂毒素污染日糧較對(duì)照組顯著提高了血球容積、平均血紅蛋白含量和平均血紅蛋白濃度（P＜0.05）。毒素污染日糧添加2 mg/kg蒙脫石顯著降低了紅細(xì)胞體積（P ＜ 0.05）。

2.3 毒素污染日糧添加酵母培養(yǎng)物對(duì)豬免疫學(xué)參數(shù)的影響 由表4可知，與對(duì)照組和處理2組相比，處理1組顯著提高了IgG和IgM的含量（P＜0.05）。各組日糧對(duì)腫瘤壞死因子-α含量無(wú)顯著影響（P＞0.05）。

2.4 毒素污染日糧添加酵母培養(yǎng)物對(duì)豬血清生化指標(biāo)的影響 由表5可知，處理1組和處理2組較對(duì)照組顯著提高了血清白蛋白含量（P＜0.05），對(duì)照組較處理2組和處理4組顯著降低了尿素氮含量和尿素氮與肌酸苷的比值（P＜0.05），處理1組和處理2組較對(duì)照組和處理3組顯著提高了血清鈣含量（P＜0.05）。

2.5 毒素污染日糧添加酵母培養(yǎng)物對(duì)豬組織器官重量及色度的影響 由表6可知，各組日糧對(duì)腎臟和脾臟重量無(wú)顯著影響（P＞0.05），但處理1組和處理2組較對(duì)照組和處理3組顯著提高了肝臟重量（P＜0.05）。毒素污染日糧添加蒙脫石和蒙脫石酵母培養(yǎng)物復(fù)合物有提高肝臟黃度的趨勢(shì)（P=0.08）。

表3 添加酵母培養(yǎng)物對(duì)豬血液學(xué)指標(biāo)的影響

表 4 添加酵母培養(yǎng)物對(duì)豬免疫學(xué)參數(shù)的影響 mg/mL

表5 添加酵母培養(yǎng)物對(duì)豬血清生化指標(biāo)的影響

表6 添加酵母培養(yǎng)物對(duì)豬組織器官重量及 色度的影響

2.6 毒素污染日糧添加酵母培養(yǎng)物對(duì)豬組織損傷的影響 由表7可知，處理1組提高了肝臟膽管增生、肥大和水腫變性損傷（P＜0.05），但處理3組顯著降低了毒素對(duì)肝臟的損傷（P＜0.05）。對(duì)照組和處理4組較處理1組顯著降低了腎臟的空泡損傷（P＜0.05）。

表7 添加酵母培養(yǎng)物對(duì)豬組織損傷的影響

3 討論

黃曲霉毒素和嘔吐毒素屬于真菌毒素，通常會(huì)污染谷物原料，如玉米、小麥和大麥。當(dāng)豬攝入受毒素污染的飼料后，這些霉菌毒素會(huì)降低期生長(zhǎng)速度和采食量，影響免疫系統(tǒng)，并造成器官損傷，給養(yǎng)殖戶帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失。黃曲霉毒素和嘔吐毒素在日糧中同時(shí)存在可能比單獨(dú)存在對(duì)豬造成更嚴(yán)重的負(fù)面影響，因?yàn)樗鼈兙哂袇f(xié)同作用（Miazzo等，2005）。本研究未評(píng)估未受霉菌毒素污染的飼料中添加蒙脫石或酵母培養(yǎng)物對(duì)豬的影響，因?yàn)槊擅撌跊](méi)有霉菌毒素的情況下不會(huì)對(duì)動(dòng)物產(chǎn)生積極或消極的影響。Xia等（2005）研究表明，給斷奶仔豬飼喂蒙脫石并不會(huì)改變其生長(zhǎng)性能。在未受霉菌毒素污染的豬飼料中添加酵母細(xì)胞物質(zhì)可產(chǎn)生不同效果，如增加日增重和日采食量，改善料肉比，增強(qiáng)免疫系統(tǒng)，防止細(xì)菌感染（Kogan和Kocher，2007）。然而也有研究表明，添加活酵母或酵母β-葡聚糖并不改變生長(zhǎng)性能或具有免疫調(diào)節(jié)功能（Eicher等，2006）。在本研究中，毒素污染日糧添加2 mg/kg蒙脫石和1.0 mg/kg蒙脫石+0.5 mg/kg酵母培養(yǎng)物較毒素污染日糧組顯著改善了仔豬生長(zhǎng)性能。

血液學(xué)分析顯示，蒙脫石和酵母培養(yǎng)物對(duì)各組指標(biāo)存在一些差異，仔豬飼喂毒素污染日糧較對(duì)照組顯著提高了血球容積、平均血紅蛋白含量和平均血紅蛋白濃度，毒素污染日糧添加2 mg/kg蒙脫石顯著降低了紅細(xì)胞體積。紅細(xì)胞壓積在飼喂霉菌毒素的豬體內(nèi)也較高，紅細(xì)胞壓積是指在一定體積的血液中紅細(xì)胞的濃度，與機(jī)體脫水有關(guān)（Perkins，2009）。因此，本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼喂含黃曲霉毒素和嘔吐毒素的豬可能已經(jīng)出現(xiàn)脫水。免疫系統(tǒng)的正常功能對(duì)生長(zhǎng)中的豬很重要，適應(yīng)性免疫系統(tǒng)可提供一種特定的免疫反應(yīng)，包括B淋巴細(xì)胞對(duì)特定病原體或外來(lái)物質(zhì)產(chǎn)生抗體，如IgG和IgM（Murphy等，2008）。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，與對(duì)照組和1.0 mg/kg蒙脫石+0.5 mg/kg酵母培養(yǎng)物復(fù)合物組相比，2 mg/kg蒙脫石顯著提高了IgG和IgM的含量。

與血液學(xué)分析結(jié)果相似，生化指標(biāo)結(jié)果顯示，霉菌毒素污染日糧添加蒙脫石和酵母培養(yǎng)物的影響最小，顯著影響主要是血清中的白蛋白、鈣和氮水平。白蛋白是肝臟合成的一種主要蛋白，隨著霉菌毒素的降低而增加。然而，如前所述，飼喂霉菌毒素的豬也顯示出血細(xì)胞濃度升高，這是白蛋白升高的最常見(jiàn)結(jié)果，主要是由于脫水后血液中的濃縮作用（Limdi，和 Hyde，2003）。霉菌毒素污染日糧組提高了肝臟膽管增生、肥大和水腫變性損傷，但1 mg/kg蒙脫石+0.5 mg/kg酵母培養(yǎng)物組顯著降低了毒素對(duì)肝臟的損傷。高黃曲霉毒素日糧（3000 μg /kg）會(huì)導(dǎo)致肝臟病變，出現(xiàn)空泡、纖維化和膽管增生（Harvey等，1991）。而Chaytor等（2011）研究結(jié)果表明，飼喂低濃度黃曲霉毒素和嘔吐毒污染日糧的豬，肝臟纖維化是唯一觀察到的組織損傷。

4 結(jié)論

綜上所述，長(zhǎng)期飼喂中等濃度黃曲霉B1和嘔吐毒素污染的日糧會(huì)對(duì)豬的健康造成危害。日糧添加2 mg/kg蒙脫石或1.0 mg/kg蒙脫石+0.5 mg/kg酵母培養(yǎng)物復(fù)合物對(duì)飼喂毒素污染日糧豬的健康和生長(zhǎng)性能具有改善作用。