沈姍姍 胡睿 周斌 蔡文倩 胡晞江

華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬武漢兒童醫(yī)院（武漢市婦幼保健院）（武漢430016）

葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（glucose-6-phosphata dehydrogenase deficiency，G6PD）缺乏癥是紅細(xì)胞酶缺乏引起溶血性貧血中最常見(jiàn)的一組X 連鎖不完全顯性的遺傳病。G6PD 缺乏癥地理分布廣泛，呈全球性多民族分布，全球罹患人數(shù)超過(guò)4 億［1］，我國(guó)是本病的高發(fā)區(qū)之一，尤其以我國(guó)的長(zhǎng)江以南地區(qū)高發(fā)。G6PD 缺乏是引起新生兒高膽紅素血癥的重要原因，嚴(yán)重時(shí)損傷大腦，造成永久性的神經(jīng)損害致使智力低下甚至死亡［2-3］。G6PD 缺乏癥為遺傳性疾病，暫無(wú)根治方法，發(fā)病后只能對(duì)癥處理，因此防重于治，開(kāi)展新生兒G6PD 缺乏癥的篩查工作，能夠早期診斷和預(yù)防該病的發(fā)生，控制出生缺陷、提高人口素質(zhì)。

武漢市處于華中長(zhǎng)江流域，因?yàn)椴皇切Q豆病的傳統(tǒng)高發(fā)區(qū)，因此缺乏相關(guān)流行病學(xué)的研究，無(wú)相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)。武漢兒童醫(yī)院（武漢婦幼保健院）新生兒疾病篩查室自1998年建立了武漢市的新生兒疾病篩查網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)，于2016年11月中旬開(kāi)始進(jìn)行武漢地區(qū)（涵蓋武漢十三個(gè)區(qū)）的新生兒G6PD缺乏癥篩查工作（武衛(wèi)生計(jì)生通［2016］123 號(hào)）。本文統(tǒng)計(jì)自篩查工作開(kāi)展以來(lái)至2018年11月武漢市新生兒的G6PD 篩查數(shù)據(jù)，分析武漢市G6PD 缺乏癥的發(fā)生情況。本研究可以為武漢地區(qū)G6PD缺乏癥的疾病防控提供參考依據(jù)，為優(yōu)生優(yōu)育提供指導(dǎo)作用，并且對(duì)G6PD 缺乏癥在中部地區(qū)的發(fā)病等流行病學(xué)數(shù)據(jù)做一個(gè)填充?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象本研究選取2016年11月至2018年11月在武漢市新生兒疾病篩查中心進(jìn)行新生兒疾病篩查的全市健康新生兒共計(jì)202 994例，男108 529例，女94 433例，性別不詳32例，包括我院出生和武漢市其他公立與私立醫(yī)院（其中2016年93 家醫(yī)院、2017年92 家醫(yī)院和2018年89 家）出生的活產(chǎn)新生兒，完整涵蓋武漢13個(gè)區(qū)的人群樣本，因此本文所選樣本可以代表武漢地區(qū)常住人群的G6PD 篩查情況。

1.2 研究方法

1.2.1 標(biāo)本采集和遞送新生兒的G6PD 缺乏癥篩查標(biāo)準(zhǔn)：按《新生兒疾病篩查技術(shù)規(guī)范（2010年版）》要求，武漢市各醫(yī)院在新生兒出生72 h 并充分哺乳后采集足跟血，滴于專用采血S＆S903濾紙（型號(hào)FH-A-02）上，自然滲透兩面形成直徑≥8 mm的血斑4個(gè)，室溫中自然干燥后，置密封塑料袋內(nèi)封口，放入2～8 ℃冰箱保存。于5個(gè)工作日內(nèi)送至武漢兒童醫(yī)院（武漢市婦幼保?。┬律鷥杭膊『Y查中心進(jìn)行G6PD 篩查，武漢市新生兒疾病篩查室負(fù)責(zé)對(duì)全市標(biāo)本進(jìn)行G6PD 篩查。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)采用廣州豐華時(shí)間分辨熒光免疫法以2.5 為參考值，樣本測(cè)定值＞2.5 為陰性，樣本測(cè)定值≤2.5 為可疑陽(yáng)性，對(duì)篩查陽(yáng)性患兒召回進(jìn)行G6PD 基因測(cè)序。

1.2.3 質(zhì)量控制本中心實(shí)驗(yàn)室G6PD 篩查每塊反應(yīng)板均采用雙標(biāo)雙控制，每次試驗(yàn)每板均做標(biāo)準(zhǔn)品和低值、高值質(zhì)控，G6PD 檢測(cè)項(xiàng)目每年參加國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)臨床檢驗(yàn)中心新生兒疾病篩查實(shí)驗(yàn)室室間質(zhì)量評(píng)價(jià)，成績(jī)均為合格。

1.2.4 確診試驗(yàn)將篩查陽(yáng)性者進(jìn)行電話召回，總共召回219例嬰兒統(tǒng)一采集靜脈血，進(jìn)行G6PD基因13個(gè)外顯子全長(zhǎng)測(cè)序進(jìn)行突變類型鑒定。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 17.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，發(fā)生率采用百分比（%）表示，組間比較采用了χ2檢驗(yàn)；酶活力結(jié)果情況采用表示，組間采用t檢驗(yàn)，P＜0.05 表示差異顯著，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 武漢市2016年11月至2018年11月新生兒G6PD 篩查情況202 994例新生兒足跟血G6PD缺乏癥采用時(shí)間免疫熒光法的陽(yáng)性檢出率為0.18%（369/202 994），其中男嬰缺乏率為0.33%（353/108 529），女?huà)肴狈β蕿?.02%（16/94 433），兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=264.499，P=0.000），男嬰的G6PD缺乏率顯著高于女?huà)?。在G6PD 時(shí)間免疫熒光法檢出為陽(yáng)性的新生兒中，男嬰G6PD 活性（1.41±0.55）U/gHb，女?huà)隚6PD 活性（1.77±0.58）U/gHb（t=2.522，P=0.012），男嬰酶活性顯著低于女?huà)?。通過(guò)電話召回篩查陽(yáng)性患兒219例，抽取靜脈血進(jìn)行基因檢測(cè)來(lái)驗(yàn)證篩查效率。

2.2 可疑陽(yáng)性的基因檢出情況通過(guò)對(duì)219例G6PD 活性篩查陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行G6PD 基因全長(zhǎng)測(cè)序分析，共檢出182例標(biāo)本攜帶G6PD 基因致病突變位點(diǎn)，陽(yáng)性確診率為83.1%（182/219）。

2.3 武漢地區(qū)與其他地區(qū)G6PD 缺乏癥發(fā)生情況比較本次武漢市檢出的G6PD 發(fā)生率明顯低于我國(guó)南方如兩廣、云貴，四川、福建等高發(fā)地區(qū)，與上海持平，但略高于河北、山東地區(qū)等北方地區(qū)，略低于江浙和湖北省臨近的江西、湖南等省市。見(jiàn)表1。

表1 武漢市新生兒G6PD 缺乏癥篩查發(fā)生率和其他城市、地區(qū)比較Tab.1 Comparisons of the prevalence of the G6PD deficiency in wuhan and other cities of China

3 討論

G6PD 缺乏癥為一種遺傳性溶血性疾病，發(fā)病的臨床表現(xiàn)與一般溶血性貧血大致相同，分為新生兒黃疸、蠶豆病、藥物性溶血、感染性溶血、非球形細(xì)胞溶血性貧血等臨床類型［17］。G6PD 活性低下的新生兒更容易發(fā)生新生兒黃疸，這是由于G6PD 缺乏的新生兒在失去母源性抗氧化保護(hù)后，處理H2O2的酶不成熟，而新生兒器官還未發(fā)育完善，在感染或者藥物等誘因存在的情況下，體內(nèi)發(fā)生溶血，肝臟不能及時(shí)將間接膽紅素轉(zhuǎn)變?yōu)橹苯幽懠t素排出體外，造成血中間接膽紅素濃度急劇升高透過(guò)血腦屏障，嚴(yán)重?fù)p傷腦細(xì)胞，導(dǎo)致核黃疸，造成智力低下［18-19］。此病目前尚無(wú)有效的治療措施，預(yù)防為最重要的干預(yù)手段，患兒如果避免患病因素，可能終生不發(fā)病。因此，對(duì)新生兒進(jìn)行G6PD 活性的早期篩查和診斷，能夠有效的避免G6PD 缺陷所引起的一系列疾病的產(chǎn)生，更高效的保護(hù)患兒的健康。

世界上G6PD 缺乏癥患兒主要分布在非洲、中東、亞洲的熱帶和亞熱帶地區(qū)，我國(guó)是G6PD 缺乏癥的高發(fā)地區(qū)，并呈現(xiàn)“南高北低”的分布特點(diǎn)，長(zhǎng)江流域以南多常見(jiàn)，其中以海南、廣西、廣東、云南、貴州、四川、香港和臺(tái)灣等地區(qū)較高發(fā)，且有諸多研究報(bào)道，隨著緯度北移，發(fā)生率呈現(xiàn)逐漸下降趨勢(shì)，長(zhǎng)江以北省市較少報(bào)道。湖北省地處華中長(zhǎng)江流域，但目前卻沒(méi)有G6PD 缺乏癥發(fā)生情況的相關(guān)報(bào)道。2016年湖北省內(nèi)武漢市（包括下轄13個(gè)區(qū)）率先開(kāi)展G6PD 缺乏癥篩查工作，該工作由武漢市新生兒疾病篩查中心承擔(dān)并運(yùn)營(yíng)武漢市新生兒遺傳代謝疾病監(jiān)督管理網(wǎng)絡(luò)平臺(tái)，本文就武漢市的檢出情況做了統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果顯示武漢市的G6PD 缺乏癥發(fā)生率為0.18%（369/202994），與地處同一緯度的上海市檢出率相同（0.18%），遠(yuǎn)低于我國(guó)華南、西南等G6PD 缺乏癥的高發(fā)地區(qū)，明顯高于長(zhǎng)江以北的城市如：河北廊坊檢出率0.05%，陜西省寶雞市的檢出率0.02%及山東省檢出率0.00%～0.02%。而與湖北交界的湖南和江西，G6PD 缺乏癥的檢出率分別為0.39%和1.20%，這與G6PD 缺乏癥的“南高北低”分布特點(diǎn)相一致。在本次研究中，武漢地區(qū)男性檢出率為0.33%（353/108 529），女性檢出率為0.02%（16/94 433），男性發(fā)病率顯著高于女性（χ2=264.499，P=0.000），并且G6PD缺乏癥的男性患兒的酶活力顯著低于女性患兒［男（1.41±0.55）U/gHb，女（1.71±0.58）U/gHb；t=2.522，P=0.012］。這些結(jié)果也符合X 染色體連鎖不完全顯性遺傳方式，因?yàn)槟行灾挥幸粭lX染色體，男性表現(xiàn)型多為酶活性顯著缺乏，女性有兩條X 染色體，表型以輕度缺陷（雜合子）多見(jiàn)，因此導(dǎo)致男女表型差異較大［20-21］。通過(guò)對(duì)召回的219例初篩陽(yáng)性患兒進(jìn)行G6PD 基因測(cè)序，共檢出182例攜帶G6PD 致病突變位點(diǎn)，即初篩的檢測(cè)效率達(dá)83.1%，這些結(jié)果也表明時(shí)間分辨免疫熒光法是一種準(zhǔn)確性高、適合大規(guī)模的G6PD 標(biāo)本篩查的方法，可以應(yīng)用這種方法推廣至湖北省的G6PD篩查。

G6PD 缺乏癥篩查是先天性G6PD 缺乏癥三級(jí)預(yù)防的重要且有效的方法，我國(guó)新生兒遺傳代謝性疾病篩查起步較晚，2008年國(guó)家首次將G6PD 缺乏癥納入常規(guī)篩查范圍，南方高發(fā)地區(qū)篩查起步較早、模式完善［22］；發(fā)病率較低的北方篩查尚未完全建立，大規(guī)模的篩查數(shù)據(jù)較少。然而隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，南北人口的流動(dòng)與通婚及定居的變遷，以及人民生活水平的提高，在全國(guó)范圍內(nèi)開(kāi)展新生兒篩查具有重要意義。隨著全國(guó)各地的外來(lái)人口不斷流入，南北人群交流日益頻繁，只有新生兒篩查工作的全面覆蓋，才能了解本省G6PD 缺乏癥的發(fā)病情況，為提高本省出生人口健康而努力。