張芷銘 吳文華（通訊作者）

（黃石市第二醫(yī)院兒科 湖北 黃石 435000）

兒童由于自身營養(yǎng)、發(fā)育、免疫等相關(guān)因素，以及周圍環(huán)境、病原微生物如病毒、細(xì)菌、支原體衣原體感染等因素作用，是容易發(fā)生呼吸道感染的高危人群，而肺炎支原體（mycoplasma pneumoniae，MP）是兒童下呼吸道感染的常見病原體，通過飛沫傳播，易發(fā)生于人群密集處，也容易發(fā)生交叉感染，在兒童呼吸道感染中呈上升趨勢[1]。其檢測方法主要有病原體培養(yǎng)、血清學(xué)檢測、核糖核酸檢測等，各有優(yōu)缺點(diǎn)[2-3]，近年來，新型實(shí)時熒光核酸恒溫?cái)U(kuò)增檢測技術(shù)（MP-SAT）因其診斷率高、誤差率低的優(yōu)勢被廣泛應(yīng)用，本臨床研究旨在探討MP-SAT在兒童肺炎支原體診斷與療效監(jiān)測中的應(yīng)用，現(xiàn)總結(jié)如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2017年3月—2018年3月收治并確診的72例肺炎兒童，所有患兒均符合診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]，年齡2～12歲，平均（4.11±1.04）歲，男性39例，女性33例。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他肺部疾?。虎谠和馐褂眠^抗生素，或其他治療；③嚴(yán)重免疫缺陷、嚴(yán)重內(nèi)科合并癥。所有患兒及家屬交待治療方案，簽署知情同意書，經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 檢測指標(biāo)[5-6]

入院24小時內(nèi)采集患兒痰液，進(jìn)行①M(fèi)P培養(yǎng)：采集痰液，立即接種培養(yǎng)，10%～20%小牛血清，pH 7.8～8.0之間，37℃，5%～10% CO2，培養(yǎng)24～48小時。②MP-DNA檢測方法：于ABI7500實(shí)時熒光定量基因擴(kuò)增儀，MP-DNA檢測試劑盒。③MPSAT（simultaneous amplificationand testing，SAT）檢測方法：于ABI7500實(shí)時熒光定量基因擴(kuò)增儀，MP核酸檢測試劑盒。④觀察比較MP-SAT檢測方法的診斷陽性率指標(biāo)，診斷陽性率=真陽性人數(shù)/（真陽性人數(shù)+假陰性人數(shù)）×100%。⑤對于MP-SAT檢測陽性患兒，進(jìn)行阿奇霉素治療靜滴，每日一次，連續(xù)七天為一療程，觀察比較治療前、治療第7天、14天肺炎支原體檢測的陽性率。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS21.0軟件處理，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料用±s表示，樣本均數(shù)比較采用方差分析，P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 三種檢測方法比較

肺炎支原體培養(yǎng)是診斷肺炎支原體感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”，與金標(biāo)準(zhǔn)比較，MP-DNA檢測陽性率較低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；MP-SAT檢測陽性率較高，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。MP-DNA檢測診斷陽性率低于MP-SAT檢測方法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 三種檢測方法比較

2.2 療效評估比較

隨著阿奇霉素治療，肺炎支原體病原體的檢測陽性率逐漸下降，MP-DNA檢測的陽性率下降緩慢，但是兩種檢測方法比較，其檢測陽性率在治療后7、14天無顯著差異（P＞0.05），見表2。

表2 兩種檢測方法陽性率動態(tài)比較[n（%）]

3.討論

兒童下呼吸道感染的主要病原體有肺炎鏈球菌，其次是肺炎支原體，其臨床癥狀呈反復(fù)性，癥狀不典型，病程長，治療效果不穩(wěn)定。該病原體沒有細(xì)胞壁，治療上主要選用大環(huán)內(nèi)酯類如阿奇霉素抗生素[7]，病原體的蛋白質(zhì)合成，起到滅菌作用，由于該疾病導(dǎo)致的兒童呼吸道感染癥狀不典型，影像學(xué)表現(xiàn)沒有明顯特異性，加大了早期診斷的難度。

目前主要的檢測方法[8]有病原體培養(yǎng)、血清學(xué)檢測、核糖核酸檢測等，各有優(yōu)缺點(diǎn)，肺炎支原體培養(yǎng)是診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但是需要培養(yǎng)周期較長、培養(yǎng)條件嚴(yán)格；血清學(xué)檢測容易受到發(fā)病時間、病程等多因素干擾，很容易出現(xiàn)假陽性、假陰性結(jié)果，準(zhǔn)確性低；核酸檢測中的MP-DNA檢測，無法辨別支原體是否存活，“死菌和活菌”在檢測時容易出現(xiàn)假陽性結(jié)果，從而導(dǎo)致患兒治療周期延長。近年來新型檢測方法實(shí)時熒光核酸恒溫?cái)U(kuò)增檢測技術(shù)[9]（SAT），可以實(shí)現(xiàn)特異性擴(kuò)增及檢測，僅僅存在于活菌中的功能性基因片段，有效區(qū)分“死菌和活菌”，提高檢測的準(zhǔn)確性。本臨床研究顯示，與金標(biāo)準(zhǔn)比較，MP-DNA檢測陽性率較低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；MP-SAT檢測陽性率較高，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。MP-DNA檢測診斷陽性率低于MPSAT檢測方法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。隨著阿奇霉素治療的推進(jìn)，肺炎支原體病原體的檢測陽性率逐漸下降，MP-DNA檢測的陽性率下降緩慢，但是兩種檢測方法比較，其檢測陽性率在治療后7、14天無明顯差異（P＞0.05）。因此利用該檢測手段可以達(dá)到肺炎支原體的早期診斷、早期治療以及療效評價。

綜上所述，可以合理有效運(yùn)用MP-SAT檢測技術(shù)可以進(jìn)行兒童肺炎支原體的早期診斷、早期治療以及療效評價，具有臨床應(yīng)用價值。