張芷銘 吳文華(通訊作者)
(黃石市第二醫(yī)院兒科 湖北 黃石 435000)
兒童由于自身營養(yǎng)、發(fā)育、免疫等相關(guān)因素,以及周圍環(huán)境、病原微生物如病毒、細(xì)菌、支原體衣原體感染等因素作用,是容易發(fā)生呼吸道感染的高危人群,而肺炎支原體(mycoplasma pneumoniae,MP)是兒童下呼吸道感染的常見病原體,通過飛沫傳播,易發(fā)生于人群密集處,也容易發(fā)生交叉感染,在兒童呼吸道感染中呈上升趨勢[1]。其檢測方法主要有病原體培養(yǎng)、血清學(xué)檢測、核糖核酸檢測等,各有優(yōu)缺點(diǎn)[2-3],近年來,新型實(shí)時熒光核酸恒溫?cái)U(kuò)增檢測技術(shù)(MP-SAT)因其診斷率高、誤差率低的優(yōu)勢被廣泛應(yīng)用,本臨床研究旨在探討MP-SAT在兒童肺炎支原體診斷與療效監(jiān)測中的應(yīng)用,現(xiàn)總結(jié)如下。
選取本院2017年3月—2018年3月收治并確診的72例肺炎兒童,所有患兒均符合診斷標(biāo)準(zhǔn)[4],年齡2~12歲,平均(4.11±1.04)歲,男性39例,女性33例。排除標(biāo)準(zhǔn):①合并其他肺部疾?。虎谠和馐褂眠^抗生素,或其他治療;③嚴(yán)重免疫缺陷、嚴(yán)重內(nèi)科合并癥。所有患兒及家屬交待治療方案,簽署知情同意書,經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。
入院24小時內(nèi)采集患兒痰液,進(jìn)行①M(fèi)P培養(yǎng):采集痰液,立即接種培養(yǎng),10%~20%小牛血清,pH 7.8~8.0之間,37℃,5%~10% CO2,培養(yǎng)24~48小時。②MP-DNA檢測方法:于ABI7500實(shí)時熒光定量基因擴(kuò)增儀,MP-DNA檢測試劑盒。③MPSAT(simultaneous amplificationand testing,SAT)檢測方法:于ABI7500實(shí)時熒光定量基因擴(kuò)增儀,MP核酸檢測試劑盒。④觀察比較MP-SAT檢測方法的診斷陽性率指標(biāo),診斷陽性率=真陽性人數(shù)/(真陽性人數(shù)+假陰性人數(shù))×100%。⑤對于MP-SAT檢測陽性患兒,進(jìn)行阿奇霉素治療靜滴,每日一次,連續(xù)七天為一療程,觀察比較治療前、治療第7天、14天肺炎支原體檢測的陽性率。
采用SPSS21.0軟件處理,計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn),計(jì)量資料用±s表示,樣本均數(shù)比較采用方差分析,P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
肺炎支原體培養(yǎng)是診斷肺炎支原體感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”,與金標(biāo)準(zhǔn)比較,MP-DNA檢測陽性率較低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);MP-SAT檢測陽性率較高,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。MP-DNA檢測診斷陽性率低于MP-SAT檢測方法,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表1。
表1 三種檢測方法比較
隨著阿奇霉素治療,肺炎支原體病原體的檢測陽性率逐漸下降,MP-DNA檢測的陽性率下降緩慢,但是兩種檢測方法比較,其檢測陽性率在治療后7、14天無顯著差異(P>0.05),見表2。
表2 兩種檢測方法陽性率動態(tài)比較[n(%)]
兒童下呼吸道感染的主要病原體有肺炎鏈球菌,其次是肺炎支原體,其臨床癥狀呈反復(fù)性,癥狀不典型,病程長,治療效果不穩(wěn)定。該病原體沒有細(xì)胞壁,治療上主要選用大環(huán)內(nèi)酯類如阿奇霉素抗生素[7],病原體的蛋白質(zhì)合成,起到滅菌作用,由于該疾病導(dǎo)致的兒童呼吸道感染癥狀不典型,影像學(xué)表現(xiàn)沒有明顯特異性,加大了早期診斷的難度。
目前主要的檢測方法[8]有病原體培養(yǎng)、血清學(xué)檢測、核糖核酸檢測等,各有優(yōu)缺點(diǎn),肺炎支原體培養(yǎng)是診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”,但是需要培養(yǎng)周期較長、培養(yǎng)條件嚴(yán)格;血清學(xué)檢測容易受到發(fā)病時間、病程等多因素干擾,很容易出現(xiàn)假陽性、假陰性結(jié)果,準(zhǔn)確性低;核酸檢測中的MP-DNA檢測,無法辨別支原體是否存活,“死菌和活菌”在檢測時容易出現(xiàn)假陽性結(jié)果,從而導(dǎo)致患兒治療周期延長。近年來新型檢測方法實(shí)時熒光核酸恒溫?cái)U(kuò)增檢測技術(shù)[9](SAT),可以實(shí)現(xiàn)特異性擴(kuò)增及檢測,僅僅存在于活菌中的功能性基因片段,有效區(qū)分“死菌和活菌”,提高檢測的準(zhǔn)確性。本臨床研究顯示,與金標(biāo)準(zhǔn)比較,MP-DNA檢測陽性率較低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);MP-SAT檢測陽性率較高,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。MP-DNA檢測診斷陽性率低于MPSAT檢測方法,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。隨著阿奇霉素治療的推進(jìn),肺炎支原體病原體的檢測陽性率逐漸下降,MP-DNA檢測的陽性率下降緩慢,但是兩種檢測方法比較,其檢測陽性率在治療后7、14天無明顯差異(P>0.05)。因此利用該檢測手段可以達(dá)到肺炎支原體的早期診斷、早期治療以及療效評價。
綜上所述,可以合理有效運(yùn)用MP-SAT檢測技術(shù)可以進(jìn)行兒童肺炎支原體的早期診斷、早期治療以及療效評價,具有臨床應(yīng)用價值。