黃蓉 王桃桃 祁文瑾

摘要：目的? 探討內(nèi)脂素和網(wǎng)膜素在HDCP患者胎盤的表達(dá)情況及胎盤異質(zhì)性對其表達(dá)的影響。方法? 以昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院2015年7月～2016年7月產(chǎn)科住院分娩的53例合并妊娠期高血壓HDCP產(chǎn)婦作為研究對象，根據(jù)病情輕重分為GH組、MPE組、SPE組，統(tǒng)稱HDCP組，另選正常妊娠晚期婦女53例為對照組。采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測兩組不同部位、不同層次胎盤組織中內(nèi)脂素、網(wǎng)膜素含量并進(jìn)行比較。結(jié)果? ①HDCP組胎盤組織中表達(dá)的內(nèi)脂素（177.79±156.43）pg/ml高于對照組（116.89±99.63）pg/ml，統(tǒng)計(jì)學(xué)意義顯著（P<0.01）。②對照組和GH組胎盤網(wǎng)膜素水平分別為（393.69±223.35）ng/L、（389.55±272.14）ng/L，高于MPE組（323.58±180.33）ng/L及SPE組（242.91±202.64）ng/L， MPE組胎盤網(wǎng)膜素水平（323.58±180.33）ng/L高于SPE組（242.91±202.64）ng/L，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。③胎盤組織中內(nèi)脂素和網(wǎng)膜素的表達(dá)無相關(guān)關(guān)系。結(jié)論? HDCP患者胎盤組織中內(nèi)脂素表達(dá)水平顯著升高而網(wǎng)膜素表達(dá)水平顯著降低，其可能與HDCP發(fā)生、發(fā)展相關(guān);胎盤異質(zhì)性對內(nèi)脂素和網(wǎng)膜素的表達(dá)存在影響。

關(guān)鍵詞：妊娠期高血壓疾病;胎盤;內(nèi)脂素;網(wǎng)膜素

中圖分類號：R714.2? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2019.06.024

文章編號：1006-1959（2019）06-0075-04

Abstract：Objective? To investigate the expression of visfatin and retinal in placenta of HDCP patients and the effect of placental heterogeneity on its expression. Methods? From the first affiliated hospital of Kunming Medical University， from July 2015 to July 2016， 53 patients with gestational hypertension with HDCP were enrolled in the study. According to the severity of the disease， they were divided into GH group， MPE group and SPE group.Collectively referred to as the HDCP group， 53 women with normal late pregnancy were selected as the control group. Enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） was used to detect and compare visfatin and retinal content in placenta of different sites and different levels. Results? ①The visfatin （177.79±156.43） pg/ml expressed in the placenta of HDCP group was higher than that of the control group （116.89±99.63） pg/ml， which was statistically significant （P<0.01）. ②The levels of placental reticulum in the control group and GH group were （393.69±223.35） ng/L， （389.55±272.14） ng/L， higher than the MPE group （323.58±180.33） ng/L and the SPE group （242.91±202.64）ng/L，The level of placental reticulum in the MPE group （323.58±180.33） ng/L was higher than that in the SPE group （242.91±202.64） ng/L，the difference was statistically significant （P<0.05）.③There was no correlation between the expression of visfatin and retinal in the placental tissues. Conclusion? The expression of visfatin in placenta of patients with HDCP is significantly increased and the expression of retinal is significantly decreased， which may be related to the occurrence and development of HDCP. Placental heterogeneity has an effect on the expression of visfatin and retinoid.

Key words：Hypertensive disorder of pregnancy;Placenta;Visfatin;Retinoid

妊娠期高血壓疾?。╤ypertensive disorder of pregnancy，HDCP）是妊娠與高血壓并存的一組疾病，與母體圍生期發(fā)病率及圍產(chǎn)兒死亡率密切相關(guān)，但其發(fā)病機(jī)制尚不明確。據(jù)有關(guān)資料報(bào)道近幾年新發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞因子：內(nèi)脂素[1]（visfatin）和網(wǎng)膜素[2]（omentin）可能作用于HDCP的發(fā)生和發(fā)展，但具體機(jī)制及結(jié)論尚存爭議。本研究擬對HDCP患者胎盤組織內(nèi)脂素、網(wǎng)膜素的含量變化進(jìn)行測定，探討內(nèi)脂素、網(wǎng)膜素是否參與HDCP發(fā)病及進(jìn)展，明確二者是否可作為HDCP預(yù)測因子。

1對象與方法

1.1研究對象? 以昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院2015年7月～2016 年7月住院分娩的53例合并妊娠期高血壓HDCP產(chǎn)婦作為研究對象，本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審核批準(zhǔn)，研究對象均知情同意。其中的根據(jù)病情輕重分為妊娠期高血壓（gestational hypertension，GH）組、輕度子癇前期（mild preeclampsia，MPE）組、重度子癇前期（severe preeclampsia，SPE）組，統(tǒng)稱HDCP組，因MPE組例數(shù)較少，結(jié)果分析時(shí)將MPE及SPE合為PE組進(jìn)行分析。另選同期正常妊娠晚期婦女53例為對照組。

1.2納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1納入標(biāo)準(zhǔn)? 所有對象均不吸煙、飲酒，飲食和生活習(xí)慣無特殊，HDCP診斷及分組嚴(yán)格參照《婦產(chǎn)科學(xué)》第八版[3]及中華醫(yī)學(xué)會婦產(chǎn)科學(xué)分會《妊娠期高血壓疾病診治指南（2015）》[4]。

1.2.2排除標(biāo)準(zhǔn)? 所有對象均排除妊娠期其它合并癥和并發(fā)癥，且隨訪至產(chǎn)后12周，排外慢性高血壓合并妊娠。

1.3方法

1.3.1標(biāo)本采集? 在胎盤娩出30 min內(nèi)，避開肉眼可見的纖維化、梗死及鈣化區(qū)，以臍帶附著部胎盤即為中心部（center，C），胎盤邊緣處即為邊緣部（boarder，B），兩者連線中點(diǎn)即為中間部（middle，M），取1 cm×1 cm×3 cm大小胎盤組織各 1 塊，并將這 3 塊胎盤組織按照母體面層（maternal，M）、絨毛層（villus，V）和胎兒面層（fetal，F(xiàn)）分為上、中、下三層，即：近臍帶胎兒面（CF）、近臍帶絨毛層（CV）、近臍帶母體面（CM）、臍帶與邊緣中間胎兒面（MF）、臍帶與邊緣中間絨毛層（MV）、臍帶與邊緣中間母體面（MM）、邊緣胎兒面（FF）、邊緣絨毛層（FV）、邊緣母體面（FM）。無菌鹽水反復(fù)沖洗，濾紙吸干。分別放入滅菌無酶凍存管中，放置于液氮中速凍24 h，去除并轉(zhuǎn)入-80 ℃冰箱中保存待測。實(shí)驗(yàn)前解凍剪碎胎盤組織，用微量電動組織勻漿儀勻漿，按500 μl PBS（pH=7.4）/g比例稀釋，低溫高速離心機(jī)離心20 min（3000 r/min），離心后收集上清液待檢測。

1.3.2指標(biāo)測定? ELISA檢測妊娠婦女胎盤組織內(nèi)脂素和網(wǎng)膜素含量，ELISA試劑盒均購自美國R&D公司，操作均嚴(yán)格按說明書進(jìn)行。

1.3.3臨床資料收集? 收集研究對象的年齡、孕次、產(chǎn)次、孕前身高及體質(zhì)量、入院時(shí)身高及體質(zhì)量，分別計(jì)算孕前BMI和產(chǎn)前BMI。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法? 采用SPSS 21.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，所有測定計(jì)量資料數(shù)據(jù)以（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析法。統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)均為雙側(cè)概率檢驗(yàn)（α=0.05），P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.01表示統(tǒng)計(jì)學(xué)意義顯著。

2結(jié)果

2.1產(chǎn)婦一般資料比較? 經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示HDCP組及對照組年齡、孕產(chǎn)次、孕前BMI比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;HDCP組產(chǎn)前BMI顯著高于對照組，孕周小于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.2各組妊娠婦女胎盤組織內(nèi)脂素、網(wǎng)膜素含量比較? HDCP組胎盤組織內(nèi)脂素含量高于對照組，統(tǒng)計(jì)學(xué)意義顯著（P<0.01）。GH組、MPE組、SPE組胎盤組織中內(nèi)脂素水平均高于對照組，統(tǒng)計(jì)學(xué)意義顯著（P<0.01），而GH組、MPE組、SPE組之間胎盤內(nèi)脂素水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;對照組胎盤組織網(wǎng)膜素含量高于HDCP組，統(tǒng)計(jì)學(xué)意義顯著（P<0.01）。對照組胎盤組織網(wǎng)膜素水平高于GH組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;對照組和GH組胎盤網(wǎng)膜素水平高于MPE組及SPE組，MPE組胎盤網(wǎng)膜素水平高于SPE組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。各組患者胎盤組織中內(nèi)脂素、網(wǎng)膜素含量見表2。HDCP各組及對照組胎盤組織內(nèi)脂素、網(wǎng)膜素含量見表3。

2.3內(nèi)脂素和網(wǎng)膜素在胎盤不同位置、不同層次表達(dá)的比較? 因MPE組例數(shù)較少，現(xiàn)將MPE及SPE合為PE組進(jìn)行分析。結(jié)果顯示：① HDCP組胎盤組織中CF、CM、MM、BM內(nèi)脂素含量高于對照組;進(jìn)一步分析顯示：PE組胎盤組織中CF、CV、CM、MV、MM、

BF、BV、BM內(nèi)脂素含量高于對照組（P<0.05）;但GH與PE組之間內(nèi)脂素含量比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。②HDCP組胎盤組織中CV、BF、BV網(wǎng)膜素含量低于對照組;PE組胎盤組織中CF、CV、CM、MM、BF、BV、BM網(wǎng)膜素含量低于對照組（P<0.05）;其中CV、CM、BF、BV、BM網(wǎng)膜素含量低于GH組（P<0.05）;GH和對照組間網(wǎng)膜素含量比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。③同一患者胎盤不同位置，不同層次內(nèi)脂素、網(wǎng)膜素的含量不同，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）見表4。

2.4胎盤組織中表達(dá)的內(nèi)脂素和網(wǎng)膜素相關(guān)關(guān)系? 對照組及HDCP組胎盤組織中內(nèi)脂素和網(wǎng)膜素含量相關(guān)關(guān)系如圖1，統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果表明胎盤組織中表達(dá)的內(nèi)脂素和網(wǎng)膜素?zé)o相關(guān)關(guān)系（P>0.05）。

3討論

妊娠期高血壓疾病是一種病因不明的病理妊娠，常發(fā)生于妊娠20周以后，以全身小血管痙攣、內(nèi)皮細(xì)胞受損及局部缺血為特征，臨床表現(xiàn)為高血壓、蛋白尿，伴或不伴水腫，肝腎功能異常，嚴(yán)重者可出現(xiàn)抽搐、昏迷，甚至死亡，嚴(yán)重影響母嬰健康，是孕產(chǎn)婦和圍產(chǎn)兒病死率升高的主要原因[3，4]。本研究發(fā)現(xiàn)HDCP組和對照組孕產(chǎn)婦年齡、孕產(chǎn)次、孕前BMI之間無顯著差異，而HDCP組婦女孕期體重增長高于對照組，分娩孕周小于對照組，提示孕期體重增長過多可能增加罹患HDCP的風(fēng)險(xiǎn)，導(dǎo)致分娩孕周提前，說明孕期良好體重控制對預(yù)防HDCP發(fā)生，改善胎兒結(jié)局具有積極意義，與國內(nèi)外研究結(jié)果一致[5，6]。

內(nèi)脂素是內(nèi)臟脂肪組織分泌的一種特異性脂肪因子，本研究中HDCP患者中各組胎盤組織中內(nèi)脂素含量均顯著高于對照組（P<0.01），此結(jié)果與Alberico S等、Montico M等的研究結(jié)果一致[7，8]，表明胎盤組織高水平的內(nèi)脂素可能與HDCP的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)，究其原因可能為：①內(nèi)脂素能增加hs-CRP、TNF-α及IL-6等表達(dá)，導(dǎo)致血管調(diào)節(jié)因子失衡，引起血管內(nèi)皮細(xì)胞受損;②內(nèi)脂素可激活胰島素受體并具有胰島素模擬作用，引起血脂代謝異常及胰島素抵抗（insulin resistance，IR）加重，導(dǎo)致HDCP的發(fā)病;③內(nèi)脂素可作為血管平滑肌細(xì)胞的生長因子，促進(jìn)主動脈平滑肌細(xì)胞增殖，從而導(dǎo)致高血壓的形成[9]。研究還發(fā)現(xiàn)GH組、MPE組、SPE組胎盤組織中內(nèi)脂素的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明內(nèi)脂素在胎盤組織中的表達(dá)情況與HDCP的病情嚴(yán)重程度無相關(guān)關(guān)系。

網(wǎng)膜素是一種表達(dá)于網(wǎng)膜脂肪組織的一種特異性因子，本研究發(fā)現(xiàn)，HDCP組網(wǎng)膜素在胎盤組織的表達(dá)顯著低于對照組，且網(wǎng)膜素在胎盤中的表達(dá)在GH組、MPE組、SPE組逐漸遞減，表明網(wǎng)膜素在胎盤中的表達(dá)與HDCP患者的病情呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。究其原因可能是：①網(wǎng)膜素可用于檢測血管內(nèi)皮功能是否存在異常，具有抗炎和舒張血管的作用[10];②網(wǎng)膜素可抑制 TNF-α誘發(fā)的 VCAM表達(dá)，主要機(jī)制為減少血管平滑肌細(xì)胞合成過氧化物及降低血管壁上淋巴細(xì)胞的粘附聚集[11];③網(wǎng)膜素能改善其胰島素抵抗，增加肝糖攝取，刺激肌肉脂肪酸氧化[12]?？傊W(wǎng)膜素可能通過抑制血管炎癥、舒張血管及改善胰島素抵抗作用于HDCP的疾病進(jìn)展。本研究還發(fā)現(xiàn)HDCP組胎盤組織中網(wǎng)膜素低于對照組（P<0.01），但胎盤組織中網(wǎng)膜素的表達(dá)在對照組和GH組中無顯著差異，表明HDCP組胎盤網(wǎng)膜素含量明顯低于正常組主要是由PE組的降低造成的，提示HDCP病情只有發(fā)展到某一程度，胎盤網(wǎng)膜素含量才會出現(xiàn)顯著降低。網(wǎng)膜素含量的測定可作為預(yù)測HDCP發(fā)生及病情發(fā)展程度的指標(biāo)。

胎盤是胎兒和母體間進(jìn)行物質(zhì)交換的場所。有學(xué)者將妊娠期高血壓疾病稱之為“胎盤病”，因其在胎盤娩出后常很快緩解或可自愈。胎盤主要由囊胚外圍的滋養(yǎng)外胚層細(xì)胞發(fā)育而成，由間質(zhì)滋養(yǎng)層細(xì)胞（i EVTs）侵入子宮蛻膜直至子宮肌層的上1/3，保證母胎界面血流灌注，為宮內(nèi)胎兒生長發(fā)育提供必需營養(yǎng)物質(zhì)[13]。本研究結(jié)果顯示對照組、GH組、PE組患者胎盤不同位置，不同層次內(nèi)脂素、網(wǎng)膜素的表達(dá)存在差異，母體面胎盤組織中內(nèi)脂素含量顯著高于對照組，而PE組患者除CF外，近臍帶組及胎盤邊緣組各點(diǎn)網(wǎng)膜素含量顯著低于GH組和對照組。提示胎盤異質(zhì)性對內(nèi)脂素和網(wǎng)膜素的表達(dá)存在影響，可能與子宮螺旋動脈重鑄不全、胎盤淺著床及胎盤不同部位脂代謝存在差異相關(guān)[14]。對照組和HDCP組胎盤組織中表達(dá)的內(nèi)脂素和網(wǎng)膜素?zé)o相關(guān)關(guān)系，分析二者可能經(jīng)過不同機(jī)制作用于脂代謝影響HDCP的發(fā)生與發(fā)展，但其確切機(jī)制需進(jìn)一步大樣本數(shù)據(jù)研究證實(shí)。且因本次研究MPE組實(shí)驗(yàn)例數(shù)較少，若分析兩者于胎盤表達(dá)水平差異是否與疾病嚴(yán)重程度相關(guān)，還需大量分組實(shí)驗(yàn)研究。

參考文獻(xiàn)：

[1]Chandrasekaran S，Hunt H，Melhorn S，et al.Adipokine profiles in preeclampsia[J].J Matern Fetal Neonatal Med，2018：1-121.

[2]Liu H，Wu J，Wang H，et al.Association of serum omentin-1 concentrations with the presence and severity of preeclampsia[J].Ann Clin Biochem，2015，52（Pt 2）：245-250.

[3]謝幸，茍文麗.婦產(chǎn)科學(xué)[M].第八版，北京：人民衛(wèi)生出版社，2013.

[4]楊孜，張為遠(yuǎn).妊娠期高血壓疾病診治指南（2015）[J].中華產(chǎn)科急救電子雜志，2015，4（4）：206-213.

[5]Moroz LA，Simpson LL，Rochelson B.Management of severe hypertension in pregnancy[J].Semin Perinatol，2016，40（2）：112-118.

[6]孫卓，徐友娣.孕前體質(zhì)指數(shù)及孕期體重增長對妊娠結(jié)局影響的研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代醫(yī)學(xué)，2018，46（12）：1423-1427.

[7]Alberico S，Montico M，Barresi V，et al.The role of gestational diabetes，pre-pregnancy body mass index and gestational weight gain on the risk of newborn macrosomia：results from a prospective multicentre study[J].BMC Pregnancy Childbirth，2014（14）：23.

[8]Zorba E，Vavilis D，Venetis CA，et al.Visfatin serum levels are increased in women with preeclampsia：a case-control study[J].Matern Fetal Neonatal Med，2012，25（9）：1668-1673.

[9]季明，楊鈞，杜新.青年高血壓病診治進(jìn)展[J].臨床與病理雜志，2018，38（2）：418-423.

[10]Moreno-Navarrete JM，Ortega F，Castro A，et al.Circulating omentin as a novel biomarker of endothelial dysfunction[J].Obesity （Silver Spring），2011，19（8）：1552-1559.

[11]Kazama K，Usui T，Okada M，et al.Omentin plays an anti-inflammatory role through inhibition of TNF-α-induced superoxide production in vascular smooth muscle cells[J].Eur J Pharmacol，2012，686（1-3）：116-123.

[12]王楠楠，趙曉娟，陳薇，等.大鼠血清網(wǎng)膜素-1水平與胰島素抵抗的相關(guān)性[J].中國病理生理雜志，2014，30（12）：2276-2279.

[13]王雁玲.胎盤發(fā)育與母胎健康[J].生命科學(xué)，2017，29（1）：21-30.

[14]Huppertz B.Maternal and fetal factors and placentation：implications for pre-eclampsia[J].Pregnancy Hypertens，2014，4（3）：244-250.

收稿日期：2019-1-17;修回日期：2019-1-28

編輯/肖婷婷