胡光耀，李濱丞，羅程印，易有金,*，夏 菠,*，曹 熙，周建中

（1.湖南農(nóng)業(yè)大學食品科學技術(shù)學院，食品科學與生物技術(shù)湖南省重點實驗室，湖南 長沙 410128；2.婁底市楚江農(nóng)業(yè)科技有限公司，湖南 婁底 417000）

辣椒貯藏過程中易遭受病原菌侵染，采后主要病害有根霉病、炭疽病等。目前化學防腐劑在控制辣椒采后病害方面應用廣泛，但其在果實上殘留可能危害人體健康，并可能使病原菌產(chǎn)生抗藥性且造成環(huán)境污染等問題[1-2]。我國植物資源豐富、種類繁多，植物提取物作為抑菌劑具有污染程度低、對人體無毒副作用且不易產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點，具有廣闊的應用前景[3]。Fallik等[4]發(fā)現(xiàn)檜木提取物在體外可抑制采后辣椒灰霉和鏈格孢菌的菌絲生長，可減少辣椒采后病害進而延長其貯藏期。閆師杰等[5]發(fā)現(xiàn)丁香、大黃提取液可有效降低辣椒采后的腐爛率，抑制呼吸作用和失水，從而有利于延緩果實衰老。余東坡等[6]從21 種植物材料中通過抑制病原菌菌絲生長和孢子萌發(fā)實驗，將篩選出的丁香、高良姜、烏梅按一定比例復配后對青椒進行保鮮，能有效降低其果實貯藏中的腐爛率，抑制其呼吸強度，減緩VC損失。由根霉菌（Rhizopus spp.）引起的腐爛是辣椒采后貯藏期間腐爛的主要原因之一。研究發(fā)現(xiàn)，植物對病原菌侵染有天然的防御反應，在遭受侵害時將誘發(fā)機體內(nèi)一系列生理生化反應來抵御病原菌侵染，通過生物或非生物因素誘導植物自身產(chǎn)生抗病性[7-9]。

本研究通過分離、純化及致病性實驗測定辣椒采后貯藏期的病原菌，采用生長速率法從丁香、肉桂、花椒等9 種傳統(tǒng)藥食同源植物中篩選出抑菌效果好的植物材料，并測定其最小抑菌濃度（minimum inhibitory concentration，MIC）和最小殺菌濃度（minimum bactericidal concentration，MBC），并研究復合涂膜劑誘導辣椒對根霉病的抗性作用，檢測防御相關(guān)酶（苯丙氨酸解氨酶（phenylalanine ammonia lyase，PAL）、過氧化物酶（peroxldase，POD）、多酚氧化酶（polyphenol oxidase，PPO））活力和總酚、類黃酮含量，旨在為探討丁香、肉桂提取液復合涂膜劑防腐保鮮機理提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

丁香、肉桂、花椒、蒲公英、魚腥草、金銀花、烏梅、陳皮、八角均購于湖南農(nóng)業(yè)大學養(yǎng)天和大藥房。辣椒采摘于湖南農(nóng)業(yè)大學實驗基地，品種為‘湘研15號’，選取大小、成熟度基本一致，無機械損傷、無病蟲害的果實。

聚乙二醇6000、聚乙烯吡咯烷酮、愈創(chuàng)木酚（化學純）、β-巰基乙醇、TritonX-100、鄰苯二酚（分析純）國藥集團化學試劑有限公司；羧甲基纖維素鈉、普魯蘭多糖、海藻酸鈉、刺槐豆膠、瓜爾豆膠 鄭州市食代添驕化工產(chǎn)品有限公司；魔芋精粉（純度95%） 成都市圣特蒙魔芋精粉有限責任公司；黃原膠 鄭州市博研生物科技有限公司。

1.2 儀器與設備

SW-CJ-DFD超凈工作臺 蘇州蘇潔凈化設備有限公司；GZ-400-GS智能人工氣候箱 韶關(guān)市廣智科技有限公司；BCD-197K冰箱 河南新飛電器有限公司；QL-866漩渦混合器 海門市其林貝爾儀器制造有限公司；HR/T16M臺式高速冷凍離 湖南赫西儀器裝備有限公司；光學顯微鏡 上海儀圓儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 辣椒采后病原菌分離純化

采集具有典型癥狀的辣椒果實，采用2 種方法進行分離：1）直接挑取病原菌菌絲接種至馬鈴薯葡萄糖瓊脂（potato dextrose agar，PDA）培養(yǎng)基，28 ℃恒溫培養(yǎng)；2）切取具典型癥狀的果肉，75%（體積分數(shù)，下同）乙醇中浸泡30 s后，用無菌水沖洗2 次，置于PDA培養(yǎng)基中28 ℃、相對濕度75%培養(yǎng)4 d后，挑取組織旁菌絲反復純化，直至分離出單一菌落。

1.3.2 辣椒采后病原菌致病性觀察

待病原菌在PDA培養(yǎng)基中生長8 d后洗脫孢子，用紗布過濾，制成孢子懸浮液（在10h40 倍光學顯微鏡下每個視野30～40 個孢子）備用。

選取無損傷、無病害的辣椒果實，立即帶回實驗室，用75%乙醇表面消毒后用無菌水沖洗3 次，以10 mL滅菌針頭刺傷果實，吸取20 μL孢子懸浮液注入傷口，并以20 μL無菌水作為對照，每個處理組10 個果實，做3 組平行，每隔2 d查看刺傷處的致病情況和癥狀表現(xiàn)，在發(fā)病處再次分離病原菌，與原接種菌進行對比。

1.3.3 辣椒采后病原菌形態(tài)學鑒定

挑取分離純化的病原菌菌絲于PDA中，28 ℃下培養(yǎng)，觀察菌落形態(tài)特征，然后挑取病原菌菌絲或吸取孢子懸浮液于顯微鏡下，觀察菌絲及孢子形態(tài)并拍照記錄。根據(jù)對孢子、孢子囊、假根等形態(tài)的觀察，參照《真菌鑒定手冊》[10]進行鑒定。

1.3.4 植物提取液制備

稱量50 g過40 目篩的植物材料，加入250 mL無水乙醇，60 ℃恒溫1.0 h，減壓抽濾，收集濾液，10 000 r/min離心10 min，收集上清液，40 ℃蒸發(fā)濃縮至稀膏狀，清水潤洗定容至25 mL，制成2 g/mL植物提取液，4 ℃保藏備用。

1.3.5 植物提取液抑菌率測定

取0.50 mL植物提取液與經(jīng)滅菌的24.50 mL PDA（冷卻至50 ℃左右）充分混合，配制成40 mg/mL培養(yǎng)基，以清水為對照，3 次重復。用10 mm打孔器打取菌餅后移至培養(yǎng)基中心，置于28 ℃培養(yǎng)，每隔24 h觀察生長情況。當對照組菌絲基本長滿培養(yǎng)皿時，用十字交叉法測量并記錄菌落直徑。按式（1）計算抑菌率。

1.3.6 MIC和MBC的測定

采用平板梯度稀釋法將篩選出的植物提取液分別配制成40.00、20.00、10.00、5.00、2.50、1.25、0.625 mg/mL的培養(yǎng)基，倒平板。取10 mm打孔菌餅至培養(yǎng)基中央，以清水為對照，置于28 ℃培養(yǎng)，每個處理設3 次重復，以無病原菌長出的最低植物提取液質(zhì)量濃度為MIC[11]。繼續(xù)培養(yǎng)1 周，以無病原菌生長的最低植物提取液質(zhì)量濃度為MBC[12]。

1.3.7 植物提取液復合涂膜劑制備

稱取1.88 g瓜爾豆膠和0.62 g普魯蘭多糖，使其溶于450 mL蒸餾水中，80 ℃恒溫加熱1 h，利用攪拌器300 r/min不斷攪拌，待其溶解完全后，分別加入4.16 mL丁香提取液和8.34 mL肉桂提取液，攪拌均勻后定容至500 mL備用，即得質(zhì)量分數(shù)0.5%復合涂膜劑（瓜爾豆膠-普魯蘭多糖（質(zhì)量比3∶1）＋丁香-肉桂提取液（體積比1∶2））。

1.3.8 誘抗辣椒處理

辣椒果實用體積分數(shù)75%乙醇擦洗后，無菌水沖洗3 次，各組均浸泡30 s，待果實表面水分自然風干后，用10 mL無菌注射器針頭刺傷果實，以加入20 μL無菌水為CK1組；以接種20 μL根霉菌孢子懸浮液為CK2組；將果實于丁香、肉桂提取液復合涂膜劑中浸泡30 s，待表面水分風干后，刺傷并接種20 μL根霉菌孢子懸浮液為復合涂膜劑組。接種后用聚乙烯保鮮袋密封，在20 ℃、相對濕度90%下貯藏，每隔2 d測定發(fā)病率和病斑直徑，取病斑周圍1.5 mm處果肉進行各項指標的測定，每組20 個果實，3 組平行。

1.3.9 誘抗辣椒對根霉病抗性相關(guān)指標的測定

病斑直徑采用十字交叉法測定，3 次重復取平均值，以不小于0.4 mm為發(fā)病。發(fā)病率按式（2）計算。

總酚、類黃酮含量和PAL活力采用紫外吸收法[13]測定，總酚、類黃酮含量與吸光度呈正相關(guān)；POD活力采用愈創(chuàng)木酚法[14]測定；PPO活力采用鄰苯二酚比色法[15]測定。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

數(shù)據(jù)采用SPSS 18.0軟件進行單因素方差分析，差異顯著性采用Duncan法，P＜0.05為差異顯著；采用Origin 8.0軟件作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 辣椒采后病原菌分離篩選及致病性分析

圖1 分離辣椒病原菌致病性觀察結(jié)果Fig.1 Pathogenic observation of isolated strains

選取具有典型發(fā)病癥狀的辣椒果實為供試材料，經(jīng)過分離純化，得到4 株引起辣椒腐爛的病原菌，分別編號為P1、P2、P3、P4。由圖1可知，辣椒果實損傷接種P1、P2、P3、P4菌株孢子均可引起辣椒果實發(fā)病，并表現(xiàn)出相應致病菌癥狀。辣椒果實損傷接種P1菌株孢子后第8天，損傷部位組織開始變褐，并呈水浸狀凹陷，后期凹陷處伴有白色絨毛狀菌絲長出。辣椒果實損傷接種P2菌株孢子后第10天開始產(chǎn)生病斑，并呈水浸狀圓形凹陷，后期病斑周圍呈同心環(huán)狀并有黑色小點長出。辣椒果實損傷接種P3菌株孢子后第8天開始產(chǎn)生病斑，并呈水浸狀圓斑凹陷，后期病斑周圍呈同心環(huán)狀，并伴有紅色小點長出。辣椒果實損傷接種P4菌株孢子后第4天開始產(chǎn)生病斑，并呈水浸狀凹陷，接著病斑繼續(xù)擴大，辣椒果實腐爛嚴重并伴有汁液流出，后期接種部位有菌絲及黑色小球狀孢子囊出現(xiàn)。

2.2 辣椒采后病原菌形態(tài)學鑒定結(jié)果

圖2 辣椒病原菌菌落形態(tài)Fig.2 Colonial morphology of pathogenic strains

如圖2所示，P1菌株菌絲呈白色蓬松狀，生長速度較快，5 d左右即可長滿培養(yǎng)皿；菌落反面在生長開始階段為白色，4 d左右呈現(xiàn)粉色或粉紅色。P2菌株菌絲生長開始階段為白色，菌落較密，生長速度較慢，8 d左右才可長滿培養(yǎng)皿；反面菌絲生長開始階段為白色，培養(yǎng)6 d后漸漸變黑。P3菌株菌落呈圓形，菌絲生長開始階段為白色，生長后期階段轉(zhuǎn)變?yōu)榛疑蚝谏L速度較慢，10 d左右才可長滿培養(yǎng)皿；菌落反面生長開始階段為白色，6 d后則漸漸變黑。P4菌株菌絲生長開始階段為白色，呈蓬松狀，生長速度極快，2 d左右便可長滿培養(yǎng)皿；后期階段會有黑色小球狀孢子囊產(chǎn)生。

圖3 病原菌顯微形態(tài)Fig.3 Microscopic morphology of pathogenic strains

由圖3可知，P1菌株小型分生孢子多呈橢圓狀，大型分生孢子呈鐮刀狀，有2～4 個隔膜；P2菌株分生孢子呈短圓柱形；P3菌株分生孢子呈長橢圓形或橢圓形；P4菌株具有假根和黑色孢子囊，分生孢子近似球形，為黑色。

根據(jù)菌株在PDA上的菌落形態(tài)、果實上的致病癥狀及分生孢子、孢子囊、假根等顯微形態(tài)觀察結(jié)果，將P1菌株鑒定為尖孢鐮刀菌（Fusarium oxysporum），P2菌株鑒定為黑色炭疽菌（Colletotrichum nigrum），P3菌株鑒定為紅色炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides），P4菌株鑒定為根霉菌（Rhizopus spp.）。

2.3 抑制病原菌植物提取液篩選結(jié)果

表1 植物提取液對辣椒病原菌的抑制作用Table1 Inhibitory effects of plant extracts on pathogens

以生長速率法測定了9 種植物提取液對辣椒尖孢鐮刀菌、黑色炭疽菌、紅色炭疽菌和根霉菌菌絲的抑制作用。由表1可知，添加40 mg/mL植物提取液時，丁香、肉桂提取液對4 種病原菌的抑菌率均為100%。而蒲公英、魚腥草、金銀花提取液對4 種病原菌均無抑制作用，八角提取液對尖孢鐮刀菌、黑色炭疽菌、紅色炭疽菌的抑菌率分別為60.53%、30.05%、51.36%，但對黑根霉菌無抑制作用。表明丁香、肉桂提取液抑菌作用最強，抑菌譜最廣。

2.4 丁香、肉桂提取液MIC和MBC測定結(jié)果

丁香和肉桂提取液對尖孢鐮刀菌、黑色炭疽菌、紅色炭疽菌和根霉菌的MIC均分別為1.25、2.50、2.50、5.00 mg/mL，表明低質(zhì)量濃度丁香與肉桂提取液對尖孢鐮刀菌、黑色炭疽菌、紅色炭疽菌和根霉菌的生長有抑制作用；對4 種病原菌的MBC均分別2.50、5.00、5.00、10.00 mg/mL，表明較低質(zhì)量濃度的丁香、肉桂提取液只能抑制尖孢鐮刀菌、黑色炭疽菌、紅色炭疽菌和根霉菌的生長，但要完全殺滅病原菌還需進一步提高其質(zhì)量濃度。

2.5 誘抗辣椒對根霉菌發(fā)病率與病斑直徑的影響

圖4 丁香、肉桂提取液復合涂膜劑對辣椒病斑直徑（A）與發(fā)病率（B）的影響Fig.4 Effects of composite coating on lesion diameter (A) and disease incidence (B) in hot peppers

由圖4可知，丁香、肉桂提取液復合涂膜劑能降低接種根霉菌孢子的辣椒發(fā)病率，在第2天辣椒果實出現(xiàn)感病癥狀，復合涂膜劑組和CK2組的病斑直徑均在0.5 mm以內(nèi)，且差異不顯著（P＞0.05）。接種后第4天，復合涂膜劑組和CK2組的辣椒果實發(fā)病率呈顯著性差異（P＜0.05），之后發(fā)病率急劇上升。接種第6天時，CK2組發(fā)病率上升至80.00%，而復合涂膜劑組的發(fā)病率為63.33%，較CK2組降低了20.84%，并呈顯著性差異（P＜0.05）；復合涂膜劑組病斑直徑擴大至3.21 mm，與CK2組相比降低了47.46%，并呈顯著性差異（P＜0.05）。接種第8天時，CK2組的辣椒果實發(fā)病率達100%，與復合涂膜劑組的發(fā)病率差異不顯著（P＞0.0 5）；復合涂膜劑組的病斑直徑上升至7.23 mm，與CK2組（10.38 mm）相比降低了30.35%，并呈顯著性差異（P＜0.05）。在接種后的8 d內(nèi)CK1組均未發(fā)病，即發(fā)病率為0。表明丁香、肉桂提取液復合涂膜劑能增強辣椒果實的抗病性，并顯著抑制辣椒果實的病斑擴展，但接種后期其抗病性逐漸下降。

2.6 涂膜劑誘導辣椒對根霉菌的抗性作用

2.6.1 誘抗對辣椒總酚含量的影響

圖5 丁香、肉桂提取液復合涂膜劑對辣椒總酚含量的影響Fig.5 Effect of composite coating on total phenolic content in hot peppers

酚類物質(zhì)作為重要的植物次級代謝產(chǎn)物之一，與果蔬采后的品質(zhì)（外觀、風味等）密切相關(guān)[13]。由圖5可知，各組辣椒中總酚含量總體呈上升趨勢。在整個貯藏期間復合涂膜劑組的總酚含量均高于CK1組和CK2組。貯藏至第2天時，各組總酚含量上升緩慢，復合涂膜劑組的總酚含量和CK1組、CK2組相差不顯著（P＞0.05）。貯藏第4天時，復合涂膜劑組的總酚含量顯著高于CK2組（P＜0.05），而CK2組顯著高于CK1組（P＜0.05）。貯藏第6天時，復合涂膜劑組、CK1組和CK2組的總酚含量分別比開始時高3.5、1.7 倍和2.7 倍。貯藏第8天時，復合涂膜劑組的總酚含量分別比CK1組和CK2組高60.00%和43.74%，并呈顯著性差異（P＜0.05），但CK1組和CK2組差異不顯著（P＞0.05）。表明接種根霉菌孢子能誘導辣椒果實中總酚含量提高，但在辣椒果實發(fā)病后期，這種誘導作用趨于消失；在接種病原菌的基礎上，丁香、肉桂提取液復合涂膜劑在整個貯藏期內(nèi)能進一步誘導辣椒果實中總酚含量的升高，從而增強其抗病性。

2.6.2 誘抗對辣椒類黃酮含量的影響

圖6 丁香、肉桂提取液復合涂膜劑對辣椒類黃酮含量的影響Fig.6 Effect of composite coating on total fl avonoid content in hot peppers

由圖6可知，各組辣椒果實中類黃酮含量呈上升趨勢，但開始階段升高緩慢。在整個貯藏期間，復合涂膜劑組的類黃酮含量均高于CK1組和CK2組；貯藏2 d后，各組辣椒果實中類黃酮含量急劇上升；貯藏第6天時，復合涂膜劑組類黃酮含量顯著高于CK2組，且CK2組顯著高于CK1組（P＜0.05）；貯藏第8天時，復合涂膜劑組類黃酮含量分別比CK1組和CK2組高82.05%和61.36%，并呈顯著性差異（P＜0.05），但CK1組和CK2組差異不顯著（P＞0.05）。表明接種根霉菌孢子能誘導辣椒果實中類黃酮含量的升高，但后期這種誘導作用逐漸消失；在接種根霉菌孢子的基礎上，復合涂膜劑在整個貯藏期內(nèi)能進一步誘導辣椒果實中類黃酮含量的升高，從而增強其抗病性。

2.6.3 誘抗對辣椒PAL活力的影響

圖7 丁香、肉桂提取液復合涂膜劑對PAL活力的影響Fig.7 Effect of composite coating on PAL activity in hot peppers

PAL是催化苯丙烷類代謝途徑的第1步反應，是苯丙烷類代謝途徑的限速酶，與植物的抗病性密切相關(guān)[16]。由圖7可知，各組PAL活力總體呈先上升后下降的變化趨勢，在整個貯藏期間，復合涂膜劑組的PAL活力上升幅度均高于CK1組和CK2組。貯藏第2天時各組的PAL活力差異不顯著（P＞0.05）。貯藏第6天時各組的PAL活力均達到峰值，復合涂膜劑組顯著高于CK2組，且CK2組顯著高于CK1組（P＜0.05），3 組分別比開始時升高1.65、1.23 倍和0.60 倍。貯藏6 d后，各組辣椒果實中PAL活力逐漸下降。貯藏第8天時，復合涂膜劑組的PAL活力為35.53 U/（hgg），分別比CK1組和CK2組高45.91%和24.54%，并呈顯著性差異（P＜0.05）；但CK1組和CK2組無顯著性差異（P＞0.05）。表明在貯藏期間，刺傷后接種根霉菌孢子能誘導辣椒果實中PAL活力的升高，但后期誘導作用基本消失；在刺傷后接種根霉菌孢子的基礎上，丁香、肉桂提取液復合涂膜劑能進一步誘導PAL活力的提高，并一直持續(xù)至第8天，從而增強其抗病性。

2.6.4 誘抗對辣椒POD活力的影響

POD是果蔬組織內(nèi)重要的氧化還原酶，參與果蔬組織木質(zhì)素合成，木質(zhì)化可抑制病原菌的侵染[17]。由圖8可知，各組辣椒果實中POD活力總體呈先升高后降低的變化趨勢，均在貯藏第6天時達到峰值；在整個貯藏期間，丁香、肉桂提取液復合涂膜劑處理辣椒果實的POD活力上升幅度均高于CK1組和CK2組。貯藏6 d期間，復合涂膜劑組的POD活力顯著高于CK2組（P＜0.05），且CK2組高于CK1組。貯藏第6天時，復合涂膜劑組的POD活力分別比CK1組和CK2組高60.80%和32.69%，并呈顯著性差異（P＜0.05）。貯藏6 d后，各組辣椒果實的POD活力呈下降趨勢，CK1組和CK2組差異不顯著（P＞0.05），但復合涂膜劑組與CK1組呈顯著性差異（P＜0.05）。表明刺傷接種根霉菌孢子能誘導辣椒果實中POD活力的升高，在此基礎上添加丁香、肉桂復合涂膜劑能進一步誘導辣椒果實中POD活力的提高，從而增強其抗病性。

圖8 丁香、肉桂提取液復合涂膜劑對辣椒POD活力的影響Fig.8 Effect of composite coating on POD activity in hot peppers

2.6.5 誘抗對辣椒PPO活力的影響

圖9 丁香、肉桂提取液復合涂膜劑對辣椒PPO活力的影響Fig.9 Effect of composite coating on PPO activity in hot peppers

PPO在植物體內(nèi)可催化多種酚類化合物氧化形成相應的醌（如咖啡酸、綠原酸等），能強烈抑制果膠分解酶和纖維分解酶，并可在一定程度上抑制病原菌的生長[18]。由圖9可知，各組的PPO活力總體呈先升高后降低的變化趨勢，均在貯藏第6天時達到峰值。在整個貯藏期間，復合涂膜劑組PPO活力上升幅度均高于CK1組和CK2組。貯藏第6天時，復合涂膜劑組的PPO活力顯著高于CK2組（P＜0.05），且CK2組顯著高于CK1組（P＜0.05）。貯藏6 d后，各組辣椒果實中PPO活力均呈下降趨勢。貯藏第8天時，復合涂膜劑組的PPO活力為0.53 U/（ggmin），比CK1組和CK2組分別高80.00%和28.57%，且呈顯著性差異（P＜0.05）。說明刺傷接種根霉菌孢子能誘導辣椒果實中PPO活力升高，丁香、肉桂復合涂膜劑在此基礎上能進一步誘導辣椒果實PPO活力的提高，從而增強其抗病性。

3 討 論

本研究分離、純化出4 種辣椒采后主要病原菌，分別鑒定為尖孢鐮刀菌、黑色炭疽菌、紅色炭疽菌和根霉菌。羅永蘭等[19]發(fā)現(xiàn)發(fā)病辣椒果柄中均含有鐮刀菌，并證明鐮刀菌為辣椒采后主要侵染病菌之一。肖晶等[20]發(fā)現(xiàn)炭疽病菌為辣椒采后主要病原菌，辣椒貯藏第5、10、15天時，炭疽病菌的發(fā)病率分別為7.0%、15.8%和33.2%，這與本研究結(jié)果基本一致。此外，張志元等[21]的研究結(jié)果也表明鐮刀菌、炭疽病菌是辣椒采后主要病原菌之一。本研究分離鑒定出另一種辣椒主要病原菌——根霉菌，其在空氣中分布廣泛，發(fā)病率較高，極易造成果實相互侵染，與余東坡[22]的研究結(jié)果類似。

本研究結(jié)果表明，丁香、肉桂提取液對尖孢鐮刀菌、黑色炭疽菌、紅色炭疽菌和根霉菌的抑菌率均為100%，這可能是由于丁香、肉桂提取液中分別含有丁香酚、肉桂醛等成分，其具有廣譜抑菌性[23]。丁香、肉桂提取液對尖孢鐮刀菌、炭疽菌[24]和根霉菌[25]具有較強的抑制作用，這與本研究結(jié)果一致。貯藏第8天時，復合涂膜劑處理的辣椒果實發(fā)病率與CK2組差異不顯著（P＞0.05），而病斑直徑差異顯著（P＜0.05），這可能是由于丁香、肉桂提取液對根霉菌孢子具有直接抑制作用，能有效抑制病斑擴展。在整個貯藏期間，復合涂膜劑組PAL、POD、PPO活力均高于CK1組和CK2組；貯藏第6天時，復合涂膜劑組的PAL、POD、PPO活力顯著高于CK2組，且CK2組顯著高于CK1組（P＜0.05）。復合涂膜劑組辣椒果實的發(fā)病率和病斑直徑均顯著低于CK2組（P＜0.05），表明刺傷接種根霉菌孢子能誘導果實中PAL、POD、PPO活力升高，在此基礎上，丁香、肉桂提取液復合涂膜劑組能進一步誘導其活力的升高，有利于總酚、類黃酮和木質(zhì)素的積累和辣椒果實抗病性的增強，這與張美麗等[26]的研究結(jié)果基本一致。由此推測丁香、肉桂提取液復合涂膜劑能夠降低辣椒果實的發(fā)病率并抑制病斑直徑擴展[27]，這一方面是由于對辣椒果實自身抗病性的誘導，另一方面是由于其能夠直接抑制根霉菌菌絲和孢子的生長[28]。