陶躍平 鐘少平

子癇前期是妊娠期高血壓疾病中的一種嚴(yán)重表現(xiàn)形式，其嚴(yán)重危及孕產(chǎn)婦及圍產(chǎn)兒的生命安全。目前較為公認(rèn)的是胎盤“淺著床”在其中發(fā)揮重要作用［1］。最近研究表明，P-p38MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路激活后，參與了腫瘤細(xì)胞侵襲過(guò)程；胎盤著床過(guò)程中具備類似腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)侵襲過(guò)程［2-3］，P-p38MAPK信號(hào)途徑是否亦參與了胎盤“淺著床”過(guò)程，并在子癇前期發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮作用，作者通過(guò)檢測(cè)P-p38MAPK在胎盤中的表達(dá)情況，同時(shí)亦對(duì)孕婦血漿中TNF-α水平的檢測(cè)，從而探討P-p38MAPK及TNF-α在子癇前期中的發(fā)病機(jī)制，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料 取2016年8月至2018年6月在本院?jiǎn)翁プ阍玛幍婪置浠颊?7例為觀察對(duì)象，其中輕度子癇前期18例，重度子癇前期19例，同期無(wú)任何并發(fā)癥的正常足月組20例作為對(duì)照組。診斷及分類標(biāo)準(zhǔn)參考全國(guó)統(tǒng)編教材第8版《婦產(chǎn)科學(xué)》［4］。三組孕婦年齡、孕齡均無(wú)顯著性差異，既往無(wú)心血管系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)及糖尿病史，近期無(wú)胎膜早破、早產(chǎn)及感染。三組孕婦分娩后立即收集胎盤組織，在胎盤組織母體面中央和四個(gè)象限中心無(wú)鈣化及梗死處各取組織塊約1cm×1cm×1cm大小，4%多聚甲醛固定，行石蠟包埋備用。相應(yīng)孕婦進(jìn)院后未進(jìn)行任何藥物治療時(shí)采血4～5ml，置于不含抗凝劑的試管常溫下靜置10min待血液凝固后，離心15min（1000～1500轉(zhuǎn)/min），收取上清液，分裝于4個(gè)EP管中，立即存入-70℃冰箱中。

1.2 主要方法和試劑 采用免疫組化SABC法測(cè)定胎盤組織中P-p38MAPK表達(dá)及血清中TNF-α表達(dá)情況蛋白表達(dá)。獲得免疫組織化學(xué)切片后，選取圖片并通過(guò)HMIAS-2000 高清晰彩色病理圖像免疫組化測(cè)量系統(tǒng)對(duì)其表達(dá)進(jìn)行半定量分析：測(cè)定玻片上的細(xì)胞內(nèi)的灰度值，灰度值大（染色強(qiáng) 度弱、 透光強(qiáng)）則蛋白表達(dá)少，反之則表達(dá)多。兔抗人P-p38MAPK抗體購(gòu)自Santa Cruze公司，SABC試劑盒及人TNF-α ELISA試劑盒均購(gòu)自于武漢博士德生物。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以（x±s）表示，組間比較采用方差分析，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組孕婦胎盤組織的病理變化 與正常孕婦組相比，輕、重度子癇前期組胎盤合體滋養(yǎng)細(xì)胞結(jié)節(jié)細(xì)胞增多，細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞增生，絨毛血管減少，管腔狹窄，纖維素樣壞死明顯增多（見(jiàn)圖1）。

圖1 各組孕婦胎盤組織的病理圖

2.2 各組孕婦胎盤組織中P-p38MAPK表達(dá)的比較 正常孕婦胎盤組織中僅見(jiàn)少量弱陽(yáng)性細(xì)胞。主要為胎盤絨毛毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞及滋養(yǎng)細(xì)胞，P-p38MAPK顆粒微細(xì)，主要表達(dá)于胞槳和胞核（見(jiàn)圖2）；在正常孕婦及輕、重度子癇前期患者胎盤組織中P-p38MAPK灰度值依次為（13.11±1.07）、（29.24±1.14） 及（43.17±6.21）（F=3.84，P＜0.05）；與正常妊娠孕婦相比，輕、重度子癇前期組胎盤組織P-p38MAPK表達(dá)水平明顯增加，與對(duì)照組相比具有顯著差異（均P＜0.05）。

圖2 各組孕婦胎盤組織中P-p38MAPK表達(dá)情況

2.3 各組孕婦血漿中TNF-α水平的比較 在正常孕婦及輕、重度子癇前期患者血漿TNF-α依次為（39.27±1.16）pg/ml、（325.81±11.58）pg/ml及（635.24±32.82）pg/ml（F=4.02，P＜0.05）；與正常妊娠孕婦相比，輕、重度子癇前期患者血漿水平依次升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。

3 討論

子癇前期是妊娠期特有的一種并發(fā)癥，嚴(yán)重危及孕產(chǎn)婦及圍產(chǎn)兒的安全，因其病因和病理機(jī)制復(fù)雜，一直是產(chǎn)科的研究重點(diǎn)和熱點(diǎn)。P-p38MAPK是絲裂原活化蛋白激酶（MAPKs）中重要組成成分之一，P-p38MAPK信號(hào)通路受到三級(jí)激酶鏈作用，當(dāng)其被激活后，介導(dǎo)細(xì)胞應(yīng)激及炎癥反應(yīng)，最近發(fā)現(xiàn)其在細(xì)胞增殖、分化及凋亡方面起到重要作用［5］。進(jìn)一步研究證實(shí)，P-p38MAPK活化后，可激活c-jun和c-fos，從而介導(dǎo)caspases途徑來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡［6］。

作為一種促炎癥細(xì)胞因子，TNF-α能夠在亞細(xì)胞水平上激發(fā)一些列級(jí)聯(lián)反應(yīng)，并可再誘導(dǎo)TNF-α等多種炎癥因子表達(dá)上調(diào)；此外，TNF-α可作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，從而增加毛細(xì)血管的通透性，誘導(dǎo)血栓形成，導(dǎo)致局部組織缺血缺氧。在本資料中，輕度子癇前期患者胎盤中P-p38MAPK顯著高于正常妊娠中，且重度子癇前期患者胎盤組織中P-p38MAPK水平進(jìn)一步增高，同時(shí)檢測(cè)到母體血漿TNF-α具有類似改變。推測(cè)在妊娠過(guò)程中，滋養(yǎng)細(xì)胞處于相對(duì)缺氧狀態(tài)，細(xì)胞組織處于相對(duì)缺氧條件時(shí)，促炎癥細(xì)胞因子TNF-α表達(dá)水平升高，TNF-α作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞及滋養(yǎng)細(xì)胞；當(dāng)胎盤部位的血管內(nèi)皮細(xì)胞受到TNF-α作用后，內(nèi)皮細(xì)胞受到損害，毛細(xì)血管的通透性增加，激發(fā)血栓形成，胎盤局部的栓子進(jìn)一步惡化胎盤供血供氧，從而導(dǎo)致局部組織缺血缺氧。胎盤淺著床，子癇前期等疾病發(fā)生，同時(shí)并根據(jù)淺著床嚴(yán)重程度出現(xiàn)不同程度的臨床癥狀，因此相應(yīng)表現(xiàn)為輕、重度子癇前期等疾病發(fā)生。對(duì)母胎健康造成不同程度的威脅。

綜上所述，妊娠過(guò)程中血漿TNF-α水平異?？烧T導(dǎo)胎盤P-p38MAPK表達(dá)異常，參與子癇前期的發(fā)病，因此，TNF-α水平異常可作為子癇前期預(yù)測(cè)的發(fā)病指標(biāo)之一，但其精準(zhǔn)機(jī)制如何，仍有待進(jìn)一步研究。