李佳琦， 孫麗俠， 肖雙雙， 任文靜， 胡 洪， 白 晰， 戴四發(fā)

(安徽科技學院 動物科學學院，安徽 鳳陽 233100)

肉雞是熱敏感畜禽，適宜的溫熱環(huán)境使其發(fā)揮最大生產(chǎn)潛能，反之，溫度過高或過低都不利于其生長發(fā)育，當環(huán)境溫度過低會增加動物的采食量來保持動物體溫恒定，當環(huán)境溫度過高則會降低動物的采食量從而來降低動物體溫[1-2]。集約化、規(guī)?；B(yǎng)殖使肉雞在夏季易出現(xiàn)整體或局部熱應激，導致生長異常，免疫機能損害，生產(chǎn)性能降低，體重均勻度差，造成較大經(jīng)濟損失[3-5]。

谷氨酰胺(Gln)是動物在應激條件下需外源補充的抗應激氨基酸，具有增強機體抗氧化能力、減緩應激、防止感染、緩解疲勞、降低氧化作用、增強免疫力等多種功能。文獻資料表明日糧添加Gln可提高熱應激肉雞生產(chǎn)性能，增強血清抗氧化能力[6]。已有不少研究表明Gln可緩解熱應激對肉雞的負面效應[2,6]，但Gln如何影響熱應激肉雞血液細胞狀況的報告較少。本試驗以血液細胞指標為出發(fā)點，研究日糧中添加Gln對熱應激肉雞血液中紅細胞、白細胞、血小板的影響，為進一步探討相關機理奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 添加劑、試劑盒與主要儀器設備

L-Gln(純度大于99.0%，美國AMRESCO公司)；血液細胞分析試劑盒(批號2018012101，深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司)；BC-2800Vet獸用全自動細胞分析儀器(深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司)等。

1.2 試驗動物、分組設計與試驗日糧

常規(guī)飼養(yǎng)艾拔益加白羽肉雞(AA肉雞)至39日齡，選擇體重、大小接近的肉雞300只，平均分成5組(每組6個重復，每個重復組10只),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組分別在日糧中添加0%、0%、0.5%、1.0%、2.0%的Gln。至42日齡時開始急性熱應激試驗，其中Ⅰ組為適溫對照組(23±1 ℃；相對濕度：45%～50%)，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組為熱應激組(34±1 ℃；相對濕度：60%～65%)，處理時間為12 h和24 h。日糧按照本課題組文獻進行配制[2]，試驗全程肉雞均自由采食和飲水。

1.3 取樣和指標分析

急性熱應激12、24 h時從各重復組中各取1只試驗肉雞，翅下靜脈收集血液(抗凝處理)，進行白細胞(WBC)、紅細胞(RBC)、血小板(PLT)數(shù)量的測定。急性熱應激處理24 h后，再稱量肉雞體重和采食量，根據(jù)增重和采食量計算料重比。

1.4 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計

應用SPSS 18.0軟件，通過單因素方差分析法進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析，鄧肯法進行組間差異性比較，P<0.05表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 日糧添加Gln對熱應激肉雞生長性能的影響

由表1可知，熱應激顯著降低(P<0.05)肉雞增重和采食量，降低幅度分別為11.9%和18.7；與熱應激Ⅱ組相比，日糧添加Gln(Ⅳ、Ⅴ組)顯著提高(P<0.05)熱應激肉雞采食量，增加幅度分別為12.5%和13.2%。

表1 日糧中添加不同濃度的Gln對急性熱應激肉雞生長性能的影響

注：各行肩標字母不同為差異顯著(P<0.05)，相同字母或無字母為差異不顯著(P>0.05)。下同。

2.2 日糧添加Gln對熱應激肉雞血液白細胞數(shù)的影響

由表2可知，12 h時，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組白細胞數(shù)量無顯著差異。24 h時，熱應激顯著提高(P<0.05)肉雞血液白細胞數(shù)量，提高幅度為10.7%；與熱應激Ⅱ組相比，日糧添加Gln(Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組)顯著降低(P<0.05)熱應激肉雞血液白細胞數(shù)量，降低幅度分別為4.2%、5.3%和5.1%。

表2 日糧中添加不同濃度的Gln對急性熱應激肉雞血液白細胞的影響

2.3 日糧添加Gln對熱應激肉雞血液血小板數(shù)的影響

根據(jù)表3可知，12 h時，熱應激顯著降低(P<0.05)肉雞血液血小板數(shù)目，降低幅度為52.9%，熱應激各組之間無顯著差異。24 h時，熱應激顯著降低(P<0.05)肉雞血液血小板數(shù)目，降低幅度為39.1%；熱應激各組之間無顯著差異。

表3 日糧中添加不同濃度的Gln對急性熱應激肉雞血液血小板的影響

2.4 日糧添加Gln對熱應激肉雞血液紅細胞數(shù)的影響

由表4可知，12 h時，熱應激顯著提高(P<0.05)肉雞血液紅細胞數(shù)目，提高幅度為20.6%；與熱應激Ⅱ組相比，日糧添加Gln(Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組)顯著降低(P<0.05)熱應激肉雞血液紅細胞數(shù)量，降低幅度分別為10.9%、17.5%和16.7%。24 h時，熱應激顯著提高(P<0.05)肉雞血液紅細胞數(shù)目，提高幅度為9.2%，熱應激各組之間無顯著差異。

表4 日糧中添加不同濃度的Gln對急性熱應激肉雞血液紅細胞的影響

3 結論與討論

高溫高濕環(huán)境是制約集約化養(yǎng)殖發(fā)展的主要因素之一。家禽體表沒有汗腺并被覆羽毛，易在高溫高濕環(huán)境下發(fā)生熱應激，降低生產(chǎn)性能和免疫能力，嚴重時引起休克或死亡[7]。本研究結果表明熱應激顯著降低肉雞采食量，這與Bai[6]研究結果一致。在熱應激的狀態(tài)下，采食量降低、呼吸加快、增強體表血流量等；而采食量的降低會導致攝入的營養(yǎng)不足，造成消耗機體內(nèi)部貯備的營養(yǎng)物質來滿足機體所需要的能量和物質供應，導致血液中相關指標的變化[8]。血液是動物機體重要的組成部分，主要功能有交換、運輸和防御，是體內(nèi)各組織器官之間以及體內(nèi)組織器官與外界環(huán)境之間的橋梁；血液把營養(yǎng)物質運輸?shù)礁鹘M織器官，同時將代謝廢物運輸至排泄器官排出體外。當動物體受到外界因子影響而發(fā)生生理或病理變化時，這些變化都會通過血液指標變化反映出來。因此，血液指標被廣泛用來評價動物的代謝、營養(yǎng)狀況及對環(huán)境的適應狀況，而血液中某種血細胞的含量通常與其生理功能相關[9]。

血液白細胞是肉雞機體重要的免疫細胞，具有吞噬有害因子，產(chǎn)生病原抗體，增強應激和疾病時機體免疫力。在機體處于急性熱應激時，通過代償機制提高血液白細胞數(shù)來抵抗熱應激的負面效應。血小板主要功能是機體發(fā)生受傷時可以快速止血。作為血液的重要組成部分紅細胞，主要功能是運輸O2和CO2。高溫環(huán)境下，肉雞張口呼吸粗重，幅度與頻率速度急劇增加，機體水分喪失迅速，引起血液紅細胞數(shù)量增加[10]。本研究結果表明，急性熱應激顯著提高24 h血液白細胞和紅細胞數(shù)目，但顯著降低其血小板數(shù)目。黃淑成等[10]研究表明，不同急性熱應激可引起紅細胞和白細胞數(shù)目的提高，與本研究結果基本一致。由以上結果可知，急性熱應激會激發(fā)肉雞機體抗應激系統(tǒng)，來抵抗應激危害。

肉雞機體Gln分為外源性Gln(來源于日糧)和內(nèi)源性Gln(來源于機體組織器官合成)。在生理常態(tài)下，內(nèi)源性Gln可滿足機體需要。然而，應激或者疾病狀態(tài)下，內(nèi)源Gln合成很難滿足機體組織器官，需外源補充，提高抗應激能力[11]。已有大量研究表明，Gln可改善熱應激肉雞生長速度、采食量、血清和腸道抗氧化功能等[12]。然而，Gln對熱應激肉雞血液細胞的影響鮮見報告。Bai等[6]研究Gln對長期熱應激血清生化指標的影響時發(fā)現(xiàn)，Gln可緩解熱應激對肉雞血液生化指標的負面效應。在本研究中，Gln可降低熱應激肉雞血液白細胞和紅細胞數(shù)目，說明Gln能調整熱應激肉雞的血液細胞狀況，有效改善血液功能，實現(xiàn)抗熱應激的效果，進而改善肉雞的生產(chǎn)性能?？梢赃M一步假設，Gln對熱應激肉雞的緩解機制可能通過血細胞來發(fā)揮其抗氧化和增強免疫力功能[6]，這方面值得今后深入探討。

綜上所述，急性熱應激可降低肉雞生長性能和血液血小板數(shù)目，提高血液白細胞和紅細胞數(shù)目，飼料中添加Gln可有效緩解急性熱應激的負面作用，具有一定的抗熱應激功能。