郭欣明

[摘要]目的 研究慢性化膿性中耳炎患者病原菌的種類、分布以及對藥物的耐性，指導臨床用藥。方法 選取2015年1月～2016年6月我院收治的108例慢性化膿性中耳炎患者作為研究對象，對108例患者的分泌物標本進行病原菌的分離、培養(yǎng)、菌種鑒定以及抗菌藥物的藥敏分析。結(jié)果 108例患者中檢出病原菌104例，檢出率為96.3%；引發(fā)慢性化膿性中耳炎疾病的有革蘭陽性菌62株（59.6%），革蘭陰性菌33株（31.7%）和真菌9株（8.7%）；主要的菌種為金黃色葡萄球菌31株（29.8%）、表皮葡萄球菌13株（12.5%）、頭狀葡萄球菌株數(shù)13株（12.5%）、銅綠假單孢桿菌19株（18.3%）和奇異變形菌8株（7.7%）。耐藥情況分析顯示金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和頭狀葡萄球菌對利奈唑胺、萬古霉素和呋喃妥因具有高度敏感性，均為100.0%，缺乏耐藥性；銅綠假單孢桿菌和奇異變形菌對美羅培南、阿米卡星、亞胺培南以及哌拉西林均有100.0%的敏感性，無耐藥能力；奇異變形菌對多種抗生素敏感，耐藥能力差。結(jié)論 引起慢性化膿中耳炎疾病的主要病原菌是金黃色葡萄球菌、表皮葡萄糖桿菌、頭狀葡萄球菌和銅綠假單孢桿菌，不同病原菌對抗菌類藥物的耐受情況不同，可以通過鑒定引發(fā)中耳炎病原菌的種類選擇合適的抗菌藥物進行有效治療。

[關(guān)鍵詞]慢性化膿性中耳炎；病原菌；耐藥性；特征分析

[中圖分類號] R764.21 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2019）4（b）-0122-04

[Abstract] Objective To investigate the types and distribution of pathogenic bacteria， and drug resistance in patients with chronic suppurative otitis media （CSOM）. Methods A total of 108 CSOM patients admitted to our hospital from January 2015 to June 2016 were enrolled in this study. The specimens from 108 patients′ secretions were isolated， cultured， identified， performed with sensitivity analysis for antibacterial agents. Results Among 108 patients， 104 ones were detected with pathogens. The detection rate was 96.3%. Microrganism causing CSOM included Gram-positive bacteria in 62 stains （59.6%）， Gram-negative bacteria in 33 strains （33.7%） and fungi in 9 strains （8.7%）. The main strains were 31 strains of Staphylococcus aureus （29.8%）， 13 strains of Staphylococcus epidermidis （12.5%）， 13 strains of Staphylococcus capitis （12.5%）， 19 strains of Pseudomonas aeruginosa （18.3%） and 8 strains of Proteus mirabilis （7.7%）. Analysis of drug resistance showed that Staphylococcus aureus， Staphylococcus epidermidis and Staphylococcus capitis were absolutely sensitive to Linezolid， Vancomycin and nitrofurantoin （100.0%） without drug resistance. Pseudomonas aeruginosa and Proteus mirabilis were 100.0% sensitive to Meropenem， Amikacin， Imipenem and Palacetin without drug resistance. Proteus mirabilis were sensitive to various antibiotics with a poor drug resistance. Conclusion The main pathogens causing CSOM are Staphylococcus aureus， Staphylococcus epidermidis， Staphylococcus capitis， and Pseudomonas aeruginosa. Different pathogens have different tolerance to antibacterial drugs. Physicians can select appropriate antibacterial agents by identifying the types of pathogens causing otitis media for effective treatment.

[Key words] Chronic suppurative otitis media； Pathogenic bacteria； Drug resistance； Characteristic analysis

慢性化膿性中耳炎是臨床常見疾病，發(fā)病初期具有耳部疼痛、鼓膜穿孔、耳內(nèi)流膿的癥狀。一般情況下，患者可以通過積極有效的治療痊愈。如果未及時治療或者用藥不當會發(fā)生聽力下降、出現(xiàn)面癱、腦膜炎、顱內(nèi)外并發(fā)癥甚至死亡的嚴重后果。研究表明細菌感染是引發(fā)慢性化膿性中耳炎的主要因素[1]。臨床上治療慢性化膿性中耳炎的主要藥物是抗菌類藥物，前期也取得了比較顯著的治療效果，但是由于近年來抗生素的濫用，耐藥菌株不斷出現(xiàn)，導致治療效果的下降[2-3]。本研究旨在通過研究引發(fā)慢性化膿性中耳炎菌株的種類、所占比例以及觀察其對不同抗菌藥物的敏感程度，選擇合適的藥物或制定合理的聯(lián)合用藥方案，為臨床治療慢性化膿性中耳炎提供科學依據(jù)和指導，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2015年1月～2016年6月慢性化膿性中耳炎患者的分泌物標本108例，其中男43例，女65例；年齡23～56歲，平均（37.00±11.12）歲；病程6～17個月，平均（7.68±3.21）個月。所有患者均符合慢性化膿性中耳炎診斷標準[4]，本研究經(jīng)我院醫(yī)學倫理委員會批準后實施。

納入標準：①臨床診斷結(jié)合細菌學檢查，確診為慢性化膿性中耳炎；②臨床診治資料保存完成，能滿足本次研究需求；③對研究內(nèi)容知情同意。排除標準：①合并有可能影響本次研究結(jié)果的其他局部或者全身感染性疾??；②伴有嚴重肝腎功能不全、心腦血管疾病及惡性腫瘤性疾病患者；③近1個月內(nèi)接受過有創(chuàng)手術(shù)患者及耳道內(nèi)無膿性分泌物患者。

1.2儀器設備與主要試劑

儀器設備：37℃二氧化碳細胞培養(yǎng)箱（Thermo公司）、微生物鑒定儀器（VITEK-2 Compact公司）、生物安全柜（鑫貝西公司）。

試劑：微生物培養(yǎng)平板有血瓊脂平板（上海遠慕生物科技有限公司）、中國藍瓊脂平板和沙氏瓊脂平板（上海遠慕生物科技有限公司）以及革蘭染色液（上海遠慕生物科技有限公司）、藥敏檢測卡（購自法國生物梅里埃公司）。質(zhì)控菌株有金黃色葡萄球菌ATCC25923（北京萬佳首化生物科技有限公司）、銅綠假單胞菌ATCC27853（北京萬佳首化生物科技有限公司）、大腸埃希菌ATCC25922（北京萬佳首化生物科技有限公司）、表皮葡萄球菌ATCC1228（北京萬佳首化生物科技有限公司）和奇異變形菌屬ATCC12453（北京萬佳首化生物科技有限公司）。

1.3病原菌的檢測與耐藥情況分析

將標本劃線接種于培養(yǎng)基瓊脂面上，放置在37℃二氧化碳培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)18～24 h（其中沙氏平板放置在28℃的低溫孵育箱中過夜培養(yǎng)）；革蘭氏染液染色，統(tǒng)計革蘭陽性菌和革蘭陰性菌的數(shù)量及比例，同時觀察菌落形態(tài)并通過微生物鑒定儀進行菌種的鑒定。操作過程嚴格遵守無菌操作標準，避免外界微生物的污染。

通過藥敏檢測卡以及藥敏檢測系統(tǒng)對分離出的菌株進行耐藥檢測，統(tǒng)計觀察藥敏結(jié)果，同時質(zhì)控菌作為參考。

1.4統(tǒng)計學方法

所有數(shù)據(jù)均采用Excel進行搜集，隨后導入SPSS 19.0進行統(tǒng)計學分析，進行歸類分析，計數(shù)數(shù)據(jù)采用n（%）表示。

2結(jié)果

2.1病原菌種類和分布

從108例慢性化膿性中耳炎患者分泌物的標本中共檢出104株病原菌，檢出率為96.3%。 其中革蘭陽性菌有62株、革蘭陰性菌33株和真菌9株，所占比例分別為59.6%、31.7%和8.7%。檢出的革蘭陽性菌以金黃色葡萄球菌為主，共31株（29.8%），表皮葡萄球菌和頭狀葡萄球菌其次，各13株（12.5%）；革蘭陰性桿菌以銅綠假單孢桿菌為主，共19株（18.3%）；真菌以黑曲霉菌為主，共4株（3.8%）（表1）。

2.2引發(fā)慢性化膿性中耳炎的主要革蘭氏陽性菌的耐藥分析

利奈唑胺、萬古霉素和呋喃妥因?qū)瘘S色葡萄球菌、表皮葡萄球菌以及頭狀葡萄球菌均具有100.0%的抑制效果；苯唑西林能夠100.0%的抑制金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌；頭孢唑啉能夠100.0%的抑制表皮葡萄球菌。此外，這3種葡萄球菌對其他的抗菌類藥物分別表現(xiàn)出不同的敏感效果和耐藥能力（表2）。

2.3引發(fā)慢性化膿性中耳炎的主要革蘭陰性菌的耐藥分析

銅綠假單胞桿菌對美羅培南、阿米卡星、亞胺培南以及哌拉西林高度敏感，均為100.0%，無耐藥能力。奇異變形桿菌對多種抗生素均表現(xiàn)出較高的敏感性，對測試的抗菌類藥物的敏感性均不低于75.0%，耐藥能力差（表3）。

3討論

慢性化膿性中耳炎是發(fā)病率較高的疾病之一，根據(jù)臨床表現(xiàn)和嚴重程度可以分為3類：單純型、壞死和膽脂瘤型，其中單純型是最為常見的一種[5-6]。在臨床的診治中，化膿性中耳炎以抗菌抗炎治療為主，其目的主要是針對性地殺滅致病菌[7]。在實際的診療過程中，由于抗生素用藥劑量、用藥周期及適應癥等方面均存在著諸多不合理之處，往往造成患者發(fā)生抗生素耐藥現(xiàn)象，不僅會延長患者的治療周期，也會對患者的診療經(jīng)濟負擔造成嚴重影響。為提高中耳炎的臨床治療效果，明確該類患者致病菌的分布特征及耐藥特性[8]，對于精確制定患者的用藥方案和提高治療效果均具有顯著的臨床意義。

關(guān)于化膿性中耳炎發(fā)生感染的致病菌的相關(guān)研究表明，引發(fā)慢性化膿性中耳炎的病因主要是病原菌感染，主要的病原菌有金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、頭狀葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌以及銅綠假單桿菌[4-13]，另外也有真菌感染的情況[9-10]。大部分情況下引發(fā)該疾病的病原菌是單一的，但是也有混合感染的情況發(fā)生[11]，該類中耳炎的治療難度也隨著病原菌種類的增多變大。本研究顯示引發(fā)慢性化膿性中耳炎疾病的主要病原菌與報道基本一致，最主要的是金黃色葡萄球菌，所占比例為29.8%，其次是表皮葡萄球菌、頭狀葡萄球菌，均屬于革蘭陽性菌，另外主要的革蘭陰性菌是銅綠假單孢桿菌和奇異變形菌。本研究顯示真菌也會引發(fā)慢性化膿性中耳炎，所占的比例比較小，與之前的研究報道一致[12-14]。針對化膿性中耳炎的病原菌研究結(jié)果，在臨床治療過程中采用不同的抗生素組合進行治療比較重要，這樣不僅能夠降低單一抗生素所產(chǎn)生的耐藥性，同時也可以提高臨床的治療效果。通過查閱近年來化膿性中耳炎相關(guān)的研究文獻，發(fā)現(xiàn)該類疾病的主要致病菌種類為革蘭陽性菌、革蘭陰性菌以及真菌，因這些細菌的感染機制和產(chǎn)生的代謝酶類存著諸多不同[15]，在耐藥情況方面也會存著巨大差異，導致在臨床的治療過程中很難采用單一抗生素實現(xiàn)化膿性中耳炎的抗感染治療。本研究的耐藥性研究結(jié)果顯示，金黃色葡萄球菌對利奈唑胺、萬古霉素、呋喃妥因和苯唑西林完全敏感，均為100.0%，全無耐性；表皮葡萄球菌和頭狀葡萄球菌對利奈唑胺、萬古霉素、呋喃妥因、苯唑西林和頭孢唑啉具有高度敏感性，均不低于92.0%，幾乎無耐藥性；銅綠假單胞桿菌和奇異變形菌對美羅培南、阿米卡星、亞胺培南以及哌拉西林均有100.0%的敏感性，無耐藥能力；奇異變形菌對多種抗生素具有敏感性，耐藥能力差，研究所得的耐藥性結(jié)果與既往的臨床報道基本類似[16]?；诨撔灾卸椎哪退幮苑植记闆r，在臨床實踐過程中，針對性的制定相應的抗菌方案尤為必要，是臨床診治過程中的重要參考。由于耳道的特殊環(huán)境和結(jié)構(gòu)，常規(guī)口服抗生素后到達病灶的藥物濃度并不特別理想，明確病原菌的耐藥特點和藥敏特點，對于合理使用抗生素和提高治療效果非常重要。此外，在藥敏結(jié)果方面，結(jié)果顯示慶大霉素以及左氧氟沙星是廣譜的抗菌類藥物，對革蘭陽性菌和革蘭陰性菌都具有較高的殺菌能力，可以選擇其作為慢性化膿性中耳炎治療的早期藥物。由于本次研究的樣本數(shù)和臨床條件所限，對于是否還有更多的抗生素可以作為化膿性中耳炎診療過程中首選的藥物未進行深入研究。但本研究從病原生物學角度和抗生素合理用藥的角度出發(fā)，對化膿性中耳炎的病原菌分布特征和耐藥情況等進行了比較全面的研究，這對于該類疾病的臨床方案制定具有極為重要的參考價值。

綜上所述，葡萄球菌以及銅綠假單孢桿菌是引發(fā)慢性化膿性中耳炎的主要病原菌，其對不同抗菌類藥物的耐藥情況不同，可以通過判斷致病菌的種類選擇合適的抗菌藥物進行有效治療慢性化膿性中耳炎，減少抗生素類藥物的濫用，同時能夠提高治療效果，此外要加強對混合感染的關(guān)注。

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（收稿日期：2018-07-04 本文編輯：閆 佩）