王璞 劉知遠(yuǎn) 吳金華 陳清華 江樹華郭偉 劉躍清 張斐斐 方貽文 倪德江

(1.江西省贛州市贛南科學(xué)院 341000；2.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝林學(xué)學(xué)院園藝植物生物學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 430070；3.江西省贛州市上猶縣茶果局341200；4.江西省贛州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所341000)

贛州市是著名的革命老區(qū)，位于江西省南部，氣候條件適宜茶樹生長(zhǎng)，野生茶樹資源非常豐富[1]。上猶、崇義、定南、安遠(yuǎn)、尋烏、信豐都曾發(fā)現(xiàn)野生大茶樹，樹形從灌木型到小喬木型，樹冠從披張到直立，類型多樣[2]。野生茶樹資源的收集和早期評(píng)價(jià)對(duì)于資源多樣性、資源分類和資源利用都有十分重要的意義，鮮葉茶多酚和游離氨基酸含量在資源早期評(píng)價(jià)中尤為關(guān)鍵。酚氨比決定鮮葉的適制性，比值低于8的單株適制綠茶，比值在8到16之間的單株紅綠兼制，比值高于16的單株適制紅茶[3]。此外，兒茶素作為茶多酚中關(guān)鍵的功能成分和滋味物質(zhì)，其總量和各組分含量也是資源評(píng)價(jià)的重要組成部分。茶氨酸是茶樹中含量最高的氨基酸組分，占茶樹氨基酸總量的80%左右。茶氨酸具有鎮(zhèn)靜安神功能，也是茶湯中重要的滋味物質(zhì)，茶氨酸和其它氨基酸組分在鮮葉中的含量同樣是資源評(píng)價(jià)的重要部分[4]。本研究選取贛州市4個(gè)資源點(diǎn)的8份野生茶樹資源，對(duì)其茶多酚和游離氨基酸總量進(jìn)行測(cè)定，了解其適制性；選取每個(gè)資源點(diǎn)各一份資源，對(duì)其兒茶素和氨基酸組分含量進(jìn)行分析，全面了解其品質(zhì)特點(diǎn)。本研究擴(kuò)大了贛州市茶樹種質(zhì)資源庫，也有助于對(duì)贛州市野生茶樹資源的進(jìn)一步開發(fā)和利用。

1 材料與方法

1.1 材料來源

本研究以贛州市4個(gè)資源點(diǎn)采集的8份野生茶樹資源的葉片為材料，采摘標(biāo)準(zhǔn)為駐芽第一葉，采摘時(shí)間為2017年12月，每份資源的基本情況見表1。

1.2 測(cè)定方法

茶多酚總量測(cè)定采用酒石酸亞鐵法，游離氨基酸總量測(cè)定采用茚三酮比色法。茶多酚總量測(cè)定具體方法如下：取若干茶鮮葉放置于研缽，加入液氮進(jìn)行研磨至粉末，稱取0.1g茶粉，加入400μL70%乙醇，渦旋1min，12000rpm離心5min，吸取50μL上清液加入3mL緩沖溶液，1mL酒石酸亞鐵溶液，加水定容至5mL，用分光光度儀在540nm條件下測(cè)定吸光值。游離氨基酸總量測(cè)定具體方法如下：取若干茶鮮葉放置于研缽，加入液氮進(jìn)行研磨至粉末，稱取0.5g茶粉，加入2mL水，在90℃下水浴加熱30min，冷卻，吸取0.4mL上清液，加入4mL水，500μL緩沖溶液，500μL茚三酮，100℃下水浴加熱15min，冷卻后加水定容至25mL，用分光光度儀在570nm條件下測(cè)定吸光值。LC-MS參照阮建云等人的方法[5]，浸提液中甲醇：水=3:1，內(nèi)標(biāo)為乙羥茶堿。標(biāo)樣購自Sigma公司，色譜純級(jí)甲醇購自Thermo公司，水為超純水。

表1 贛州市野生資源樣品的基本情況

2 結(jié)果與分析

2.1 茶多酚和游離氨基酸總量的測(cè)定

如表2所示，齊云山野生資源的茶多酚總量在30%左右，2個(gè)單株的差異很?。簧缍兆右吧Y源2個(gè)單株的茶多酚總量差異很大，1號(hào)茶多酚總量為41.24%，2號(hào)茶多酚總量在24.84%；賊古坑野生資源的茶多酚總量為22.11%～27.89%，3個(gè)單株的差異不大；陽嶺野生資源茶多酚總量為29.18%。茶樹鮮葉的茶多酚總量一般為15%～40%，社墩子1號(hào)的多酚含量達(dá)到41.24%，可以作為特色資源和品種選育的候選單株。齊云山野生資源2個(gè)單株的游離氨基酸總量差異較大，1號(hào)游離氨基酸總量為1.55%，2號(hào)游離氨基酸總量為2.54%；社墩子野生資源2個(gè)單株的游離氨基酸總量差異非常大，1號(hào)游離氨基酸總量為2.18%，2號(hào)游離氨基酸總量為6.67%；賊古坑野生資源的游離氨基酸總量為3.05%～3.53%，3個(gè)單株差異較小；陽嶺野生資源的游離氨基酸總量為0.89%。茶樹鮮葉的游離氨基酸總量一般為2%～4%，社墩子2號(hào)的游離氨基酸含量達(dá)到6.67%，陽嶺1號(hào)游離氨基酸含量不到1%，可以作為特色資源和品種選育的候選單株。從酚氨比來看，齊云山1號(hào)、社墩子1號(hào)、陽嶺1號(hào)適制紅茶，社墩子2號(hào)、賊古坑2號(hào)、賊古坑3號(hào)適制綠茶，齊云山2號(hào)、賊古坑1號(hào)紅綠兼制。

表2 茶多酚和游離氨基酸總量測(cè)定

2.2 兒茶素組分分析

每個(gè)資源點(diǎn)挑選1份資源進(jìn)行兒茶素組分分析，結(jié)果見表3。在齊云山1號(hào)的兒茶素組分中，EGCG>EGC>CG>EC>GC>C>GCG;在社墩子1號(hào)和賊古坑1號(hào)的兒茶素組分中，EGCG>EGC>CG>EC>GC>GCG>C;在陽嶺1號(hào)的兒茶素組分中，EGCG>CG>EGC>EC>GCG>GC>C。齊云山1號(hào)、社墩子1號(hào)、賊古坑1號(hào)的兒茶素組成較為相似，陽嶺1號(hào)的兒茶素組成稍有不同。在4份茶樹野生資源中，EGCG、EGC、CG含量均明顯高于其它兒茶素組分。LC-MS的兒茶素總量結(jié)果與酒石酸亞鐵法的多酚結(jié)果基本一致，因?yàn)閮翰杷厥遣铇淙~片中含量最高的多酚類物質(zhì)。

2.3 氨基酸組分分析

每個(gè)資源點(diǎn)挑選1份資源進(jìn)行氨基酸組分分析，結(jié)果見表4。在4份茶樹野生資源中，檢出的氨基酸有纈氨酸、異亮氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、茶氨酸，其中茶氨酸含量均占氨基酸總量的70%以上。齊云山1號(hào)和陽嶺1號(hào)的氨基酸組成較為相似，社墩子1號(hào)和賊古坑1號(hào)的氨基酸組成較為相似。LC-MS的氨基酸總量結(jié)果與茚三酮法的檢測(cè)結(jié)果基本一致。

表3 野生資源的兒茶素組分分析

注：數(shù)值表示該物質(zhì)與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積比值(相對(duì)峰面積)。

表4 野生資源的氨基酸組分分析

注：數(shù)值表示該物質(zhì)與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積比值(相對(duì)峰面積)。

3 小結(jié)

利用酒石酸亞鐵比色法和茚三酮比色法分析江西省贛州市4個(gè)資源點(diǎn)的8份野生茶樹資源鮮葉茶多酚和游離氨基酸總量，結(jié)果表明：社墩子1號(hào)的茶多酚總量很高，社墩子2號(hào)的游離氨基酸總量很高，陽嶺1號(hào)游離氨基酸總量很低，可作為特色資源和品種選育的候選單株。利用LC-MS法分析其中4份野生茶樹資源鮮葉兒茶素和氨基酸組分，結(jié)果表明：齊云山1號(hào)、社墩子1號(hào)、賊古坑1號(hào)的兒茶素組成較為相似，陽嶺1號(hào)的兒茶素組成稍有不同；齊云山1號(hào)和陽嶺1號(hào)的氨基酸組成較為相似，社墩子1號(hào)和賊古坑1號(hào)的氨基酸組成較為相似。