陳遠(yuǎn)云，王露莎，榮向路,3,4 ，郭姣,3,4

(1.廣東省代謝病中西醫(yī)結(jié)合研究中心， 廣東 廣州510006； 2.廣東省代謝性疾病中醫(yī)藥防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州510006； 3.國(guó)家中醫(yī)藥管理局脂代謝國(guó)家中醫(yī)藥三級(jí)實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州 510006； 4.國(guó)家中醫(yī)藥管理局高脂血癥調(diào)肝降脂國(guó)家中醫(yī)藥重點(diǎn)研究室，廣東 廣州510006)

正常情況下，人體內(nèi)物質(zhì)能量代謝處于動(dòng)態(tài)平衡中。當(dāng)能量代謝發(fā)生障礙時(shí)，體內(nèi)的這種平衡就會(huì)被破壞，從而引起相關(guān)疾病的發(fā)生[1-4]。在疾病治療的過(guò)程中，一般講究對(duì)癥下藥，如治療糖尿病、高脂血癥時(shí)，一般都會(huì)根據(jù)降糖、降脂這些特點(diǎn)來(lái)選擇用藥。因此在進(jìn)行基礎(chǔ)研究中，更多的是偏于物質(zhì)代謝途徑，然而卻忽略了能量代謝異常也是疾病發(fā)生的一個(gè)主要原因。目前，許多學(xué)者的關(guān)注點(diǎn)已經(jīng)從物質(zhì)代謝途徑轉(zhuǎn)向能量代謝途徑，以此作為切入點(diǎn)對(duì)疾病進(jìn)行研究，得到了一定成果[5-8]。

復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂方(Fufang Zhenzhu Tiaozhi Formula,FTZ)由女貞子、黃連、佛手、三七等八味中藥組成，是廣東藥科大學(xué)郭姣教授調(diào)肝啟樞化濁創(chuàng)新理論的代表驗(yàn)，對(duì)高脂血癥[9-10]、糖尿病、動(dòng)脈粥樣硬化[11-12]、非酒精性脂肪肝[13-16]等糖脂代謝紊亂疾病療效顯著。FTZ以往研究中，主要集中于糖代謝、脂代謝等物質(zhì)代謝途徑，未有相關(guān)能量代謝方面的報(bào)道。本研究從能量代謝的角度出發(fā)，使用aP2-SREBP1c轉(zhuǎn)基因小鼠、正常C57小鼠及鹽酸氯丙嗪低溫模型小鼠這3種模型，來(lái)觀察不同情況下FTZ在能量代謝方面的作用，為糖脂代謝疾病的治療提供思路。

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

8周齡aP2-SREBP1c轉(zhuǎn)基因小鼠，雄性，SPF級(jí)，美國(guó)Jackson實(shí)驗(yàn)室引進(jìn)，委托南京大學(xué)模式動(dòng)物研究所凈化，然后轉(zhuǎn)至廣東藥科大學(xué)動(dòng)物中心飼養(yǎng)繁殖，動(dòng)物合格證號(hào)：J003393 SCXK(蘇)2010-0001。8周齡C57BL/6J小鼠，雄性，SPF級(jí)，由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK(粵)2013-0002。所有小鼠均適應(yīng)性飼養(yǎng)7 d后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.2 藥品與試劑

FTZ浸膏粉(FTZ，批號(hào)：20160901)為廣東藥科大學(xué)第一附屬醫(yī)院院內(nèi)制劑(批準(zhǔn)文號(hào)：粵制藥字Z20110029)，臨床應(yīng)用多年；氯丙嗪鹽酸鹽(梯希愛(ài)上?；晒I(yè)發(fā)展有限公司，貨號(hào)69-09-0，質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.0%)；生理鹽水(廣東利泰制藥股份有限公司，批號(hào)：5216040605)。XF細(xì)胞線粒體壓力測(cè)試試劑盒(安捷倫科技有限公司，貨號(hào)：103015-100)

1.3 主要儀器

XFe24細(xì)胞能量代謝分析儀(安捷倫科技有限公司)；MP150小鼠生理活動(dòng)儀電子體溫計(jì)系統(tǒng)(普升科技有限公司)；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物綜合監(jiān)測(cè)系統(tǒng)(Columbus Instruments， USA)；SHP-150生化培養(yǎng)箱(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)；5180R型低溫高速離心機(jī)(Eppendorf，美國(guó))；ELGA超純水機(jī)(威立雅水處理技術(shù)有限公司)。

2 方法

2.1 使用模型

aP2-SREBP1c脂肪代謝障礙模型小鼠: aP2-SREBP1c轉(zhuǎn)基因小鼠，是由于脂肪組織內(nèi)特異性aP2的啟動(dòng)子的控制下固醇元件結(jié)合蛋白-1c(SREBP-1c)的過(guò)表達(dá)小鼠模型，具有明顯的脂質(zhì)代謝紊亂和脂肪生成分化障礙的特點(diǎn)，曾用于糖尿病的研究[17]。

正常小鼠：C57BL/6j小鼠，SPF級(jí)，8周齡。用于探究FTZ對(duì)正常小鼠的能量代謝作用。

鹽酸氯丙嗪低溫小鼠模型的制備：以水為溶劑，配制0.08%鹽酸氯丙嗪溶液，造模時(shí)給小鼠腹腔注射0.08%鹽酸氯丙嗪溶液，注射容積為0.1 mL/10 g體質(zhì)量，腹腔注射后小鼠體溫顯著下降[18]。

2.2 分組與給藥

aP2-SREBP1c脂肪代謝障礙模型小鼠實(shí)驗(yàn)組:小鼠根據(jù)基因型分為同窩野生型小鼠、aP2-SREBP1c轉(zhuǎn)基因小鼠。同窩野生型小鼠為野生對(duì)照組(WT)，aP2-SREBP1c脂肪代謝障礙小鼠分為模型組(MO)、陽(yáng)性藥二甲雙胍組(R)、FTZ高劑量組(FH)、FTZ中劑量組(FM)和FTZ低劑量組(FL)，每組12只。野生對(duì)照組、模型組給予蒸餾水，陽(yáng)性藥二甲雙胍組給予250 mg/kg二甲雙胍， FTZ高劑量組給予2.4 g/kg FTZ浸膏粉，F(xiàn)TZ中劑量組給予1.2 g/kg FTZ浸膏粉，F(xiàn)TZ低劑量組給予0.6 g/kg FTZ浸膏粉，共給藥12周。給藥結(jié)束后，提取其棕色脂肪組織SVF細(xì)胞進(jìn)行棕色脂肪細(xì)胞線粒體耗氧量實(shí)驗(yàn) 。

C57正常小鼠實(shí)驗(yàn)組:將小鼠分為對(duì)照組和給藥組，每組10只?？瞻讓?duì)照組給予蒸餾水；給藥組給予1.2 g/kg FTZ，共給藥14 d。各組小鼠分為兩部分，一部分用于肛溫測(cè)定；另一部分于給藥的最后1天放入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物監(jiān)測(cè)系統(tǒng)中監(jiān)測(cè)小鼠給藥后的能量代謝情況。

氯丙嗪低溫小鼠實(shí)驗(yàn)組:將小鼠分為3組，分別為對(duì)照組、模型組與給藥組，每組10只?？瞻讓?duì)照組與模型組給予蒸餾水；給藥組給予1.2 g/kg FTZ浸膏粉，共給藥14 d。給藥最后1天，模型組小鼠與給藥組小鼠按照 0.1 mL/10 g體質(zhì)量腹腔注射0.08%鹽酸氯丙嗪溶液，空白組小鼠按照0.1 mL/10 g體質(zhì)量腹腔注射生理鹽水。各組小鼠分為兩部分，一部分用于肛溫測(cè)定，分別測(cè)小鼠腹腔注射0.08%鹽酸氯丙嗪溶液后0 min、15 min、30 min、45 min、60 min、1.5 h、3.0 h、4.0 h、6.0 h、8.0 h、30.0 h的肛溫；另一部分小鼠置于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物監(jiān)測(cè)系統(tǒng)，用于能量代謝的測(cè)定。

2.3 肛溫測(cè)定方法

連接好MP150小鼠生理活動(dòng)儀中的電子溫度計(jì)系統(tǒng)模塊，將小鼠放入小鼠固定器中，待其稍安靜，用甘油潤(rùn)滑溫度探頭，將溫度探頭插入小鼠肛門(mén)，固定插入一定位置不動(dòng)，待體溫讀數(shù)穩(wěn)定后，記錄數(shù)據(jù)。正式實(shí)驗(yàn)前3天每天測(cè)1次肛溫，讓小鼠適應(yīng)溫度探頭的刺激。

C57正常小鼠實(shí)驗(yàn)組:從給藥第1天開(kāi)始，分別于給藥后0 min、1.5 h和3 h測(cè)小鼠肛溫，每隔3天測(cè)1次，對(duì)比給藥后3 h小鼠體內(nèi)肛溫變化的情況。

氯丙嗪低溫小鼠實(shí)驗(yàn)組:分別測(cè)小鼠腹腔注射0.08%鹽酸氯丙嗪溶液后0 min、15 min、30 min、45 min、60 min、1.5 h、3.0 h、4.0 h、6.0 h、8.0 h、30.0 h的肛溫。對(duì)比各組小鼠肛溫變化的情況。

2.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物監(jiān)測(cè)系統(tǒng)監(jiān)測(cè)小鼠能量代謝情況

C57正常小鼠實(shí)驗(yàn)組：安裝好儀器，加入水和飼料，將小鼠放入代謝籠中馬上進(jìn)行氣體校正，開(kāi)始對(duì)小鼠的能量代謝情況進(jìn)行為期3 d的監(jiān)測(cè)。取中間一個(gè)晝夜的結(jié)果進(jìn)行分析。

氯丙嗪低溫小鼠實(shí)驗(yàn)組：安裝好儀器，進(jìn)行儀器氣體校正后，提前將小鼠放入代謝籠中適應(yīng)1 d，第2天腹腔注射0.08%氯丙嗪后，馬上開(kāi)始對(duì)小鼠進(jìn)行24 h的能量代謝情況的監(jiān)測(cè)。

2.5 棕色脂肪細(xì)胞線粒體耗氧量實(shí)驗(yàn)

aP2-SREBP1c脂肪代謝障礙模型小鼠棕色脂肪組織SVF細(xì)胞的提?。航o藥結(jié)束后，取適量棕色脂肪組織，加入組織體積10倍左右的2%BSA的2 mg/mLⅠ型膠原酶。剪碎，放于37 ℃中孵育30 min左右，取出，過(guò)100 μm細(xì)胞濾器，用PBS清洗1～2次，混合濾液，過(guò)濾，1 000 g離心5 min；取出，吸去上次脂滴，然后倒去上清；加入3～5 mL 含有10%FBS 1%雙抗的完全培養(yǎng)基，吹散，過(guò)40 μm細(xì)胞濾器；1 000g離心5 min，倒去上清，加入10%FBS 1%雙抗的完全培養(yǎng)基，種板；于37 ℃，5%(φ) CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

線粒體耗氧量實(shí)驗(yàn)前1天，將細(xì)胞接種到細(xì)胞培養(yǎng)板中，在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中過(guò)夜培養(yǎng)；并打開(kāi)儀器，過(guò)夜預(yù)熱；在固定板中加入校準(zhǔn)液，將測(cè)試板放回固定板上，置于37 ℃ 無(wú)CO2培養(yǎng)箱中過(guò)夜水化探針。

線粒體耗氧量實(shí)驗(yàn)當(dāng)天，用專(zhuān)業(yè)的基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)液配制檢測(cè)液，加入所需要的底物，將溶液加熱至37 ℃ ，調(diào)pH值至7.4，過(guò)濾，置37 ℃ 水浴中備用；在顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)良好，將生長(zhǎng)培養(yǎng)基換為檢測(cè)液，然后將細(xì)胞放置在37 ℃ 無(wú)CO2培養(yǎng)箱中1 h；將稀釋好的藥物分別加入測(cè)試板上的A、B、C、D 4個(gè)加藥孔中，放入細(xì)胞能量代謝分析儀中進(jìn)行檢測(cè)。

2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

3 結(jié)果

3.1 FTZ對(duì)aP2-SREBP1c脂肪代謝障礙模型小鼠耗氧量的影響

結(jié)果見(jiàn)圖1。線粒體是機(jī)體重要的產(chǎn)能器官，主要通過(guò)呼吸作用來(lái)產(chǎn)生能量。通過(guò)線粒體耗氧情況可以反映出機(jī)體能量代謝情況。線粒體耗氧量曲線中的第一階段(第1時(shí)間點(diǎn)至第3時(shí)間點(diǎn))代表細(xì)胞的基礎(chǔ)耗氧量，反映質(zhì)子通過(guò)呼吸鏈形成電勢(shì)后，轉(zhuǎn)化為ATP合成所需能量和熱量的情況。從圖1A可以得知，模型組小鼠棕色脂肪細(xì)胞線粒體基礎(chǔ)耗氧量與同窩野生型小鼠相似，給予高、低劑量的FTZ治療后，模型組小鼠的細(xì)胞基礎(chǔ)耗氧量未出現(xiàn)變化，而在給予二甲雙胍與中劑量FTZ時(shí)，模型組小鼠基礎(chǔ)耗氧量升高，說(shuō)明中劑量FTZ可促進(jìn)線粒體中ATP的合成和產(chǎn)熱的發(fā)生。線粒體耗氧量曲線中第3階段(第7個(gè)至第9個(gè)時(shí)間點(diǎn))是加入線粒體氧化磷酸化解偶聯(lián)劑(FCCP)之后檢測(cè)的數(shù)值，在FCCP的作用下，大量質(zhì)子回流，導(dǎo)致耗氧增加，此階段的數(shù)值代表線粒體的最大耗氧能力，可間接顯示細(xì)胞的最大的呼吸能力。各組小鼠在此階段均表現(xiàn)不同的差異，其中升高最明顯的是二甲雙胍組和中劑量FTZ組。故對(duì)第3階段的最大耗氧量結(jié)果進(jìn)行定量分析(圖B)，結(jié)果顯示模型小鼠的最大耗氧能力與正常組小鼠相比顯著降低，而在給予高、中、低劑量的FTZ治療后，小鼠皮下脂肪組織SVF細(xì)胞的耗氧量均有不同程度增加，且中劑量組和低劑量組與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。提示FTZ能夠增強(qiáng)棕色脂肪SVF細(xì)胞線粒體的呼吸率，增加機(jī)體能量代謝。

aP2-SREBP1c脂肪萎縮小鼠具有高血糖、高血脂、胰島素抵抗等特點(diǎn)[17-20]，其體內(nèi)的物質(zhì)代謝水平，包括糖代謝、脂代謝均出現(xiàn)異常。而本實(shí)驗(yàn)通過(guò)棕色脂肪組織線粒體耗氧量實(shí)驗(yàn)證明了該模型小鼠也具有能量代謝異常的特點(diǎn)，而經(jīng)過(guò)FTZ治療后，其能量代謝水平升高了，說(shuō)明FTZ不僅能改善糖脂代謝疾病中的物質(zhì)代謝紊亂，還能提高其能量代謝。

A.棕色脂肪組織SVF細(xì)胞線粒體耗氧量曲線； B.棕色脂肪組織SVF細(xì)胞線粒體耗氧量。與野生對(duì)照組比較：#P<0.05；與模型組比較：*P<0.05，**P<0.01。

圖1FTZ對(duì)aP2-SREBP1c脂肪代謝障礙模型小鼠棕色脂肪細(xì)胞呼吸率的影響

Figure1Effect of FTZ on mitochondrial respiratory rate of brown adipose tissue in aP2-SREBP1c lipodystrophy mice

3.2 FTZ對(duì)C57正常小鼠中心體溫的影響

給藥前后3.0 h 內(nèi)肛溫變化的結(jié)果顯示見(jiàn)圖2，給藥前5天，對(duì)照組小鼠給藥后的波動(dòng)幅度逐漸升高，給藥5 d后相對(duì)穩(wěn)定不變。而給藥組小鼠下降給藥14 d后，肛溫的波動(dòng)幅度降低。與對(duì)照組相比，剛開(kāi)始給藥時(shí)FM組小鼠體溫下降幅度更大，而在給藥14 d后，F(xiàn)M 組小鼠肛溫下降幅度降低，幾乎無(wú)明顯改變。小鼠肛溫的變化可以反映小鼠體內(nèi)中心體溫的情況。說(shuō)明FTZ可以抵抗短時(shí)間的外界刺激，減少中心體溫的波動(dòng)。

給藥14 d后，正常組小鼠與給藥組小鼠的肛溫?zé)o明顯變化(見(jiàn)圖3)。以上結(jié)果說(shuō)明，給藥FTZ 2周不影響正常小鼠的中心體溫。

3.3 FTZ對(duì)C57正常小鼠能量代謝的影響

結(jié)果見(jiàn)圖4。小鼠耗氧量代表小鼠利用氧氣進(jìn)行有氧呼吸的能力，間接反映機(jī)體的能量代謝的強(qiáng)弱。給藥14 d后，F(xiàn)TZ組小鼠夜間呼吸商相對(duì)于對(duì)照組顯著升高，白天呼吸商無(wú)明顯變化(圖4B)，提示FTZ可以增加正常小鼠的夜間的代謝活性。然而對(duì)照組小鼠與FTZ組小鼠的耗氧量、熱量值結(jié)果均未顯示出差異(圖4A、C)，說(shuō)明FTZ并不能增加C57正常小鼠的能量支出。綜上可知，短期給藥FTZ并不能增強(qiáng)正常小鼠的能量代謝。

3.4 FTZ對(duì)氯丙嗪誘導(dǎo)的低溫小鼠中心體溫的影響

如圖5A結(jié)果所示，鹽酸氯丙嗪能顯著降低小鼠的體溫，并于30 h 后恢復(fù)正常體溫。

注射氯丙嗪藥物后，F(xiàn)TZ 組整體體溫曲線均高于氯丙嗪對(duì)照組，且FTZ組能緩解注射0.08%鹽酸氯丙嗪溶液后15 min、30 min體溫降低的情況，其肛溫變化明顯比氯丙嗪對(duì)照組小(見(jiàn)圖5B)，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但其不能改善注射后45 min 后的體溫降低現(xiàn)象。說(shuō)明FTZ只能短暫緩解小鼠體內(nèi)由于氯丙嗪引起的低溫，但無(wú)法逆轉(zhuǎn)這個(gè)降溫現(xiàn)象。

3.5 FTZ對(duì)氯丙嗪誘導(dǎo)的低溫小鼠能量代謝的影響

如圖6結(jié)果所示，鹽酸氯丙嗪能顯著降低小鼠24 h內(nèi)的耗氧量，并使熱量值顯示下降的趨勢(shì)。提示鹽酸氯丙嗪能降低小鼠24 h內(nèi)的能量代謝。與模型組相比，F(xiàn)TZ組小鼠耗氧量有升高的趨勢(shì)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說(shuō)明，F(xiàn)TZ并不能長(zhǎng)時(shí)間維持對(duì)氯丙嗪低溫小鼠能量代謝的促進(jìn)作用。

圖2各時(shí)間段小鼠體溫波動(dòng)曲線圖

Figure2Curve of body temperature fluctuation of mice in each time period

圖3FTZ給藥2周后小鼠的肛溫變化曲線

Figure3Anal temperature curve of mice after two weeks of FTZ administration

A.耗氧量; B.呼吸商; C.熱量值。與對(duì)照組比較:*P<0.05。

圖4FTZ給藥2周后小鼠的能量代謝情況

Figure4Energy metabolism of mice after two weeks of FTZ administration

A.注射鹽酸氯丙嗪后小鼠8 h肛溫曲線圖； B.注射鹽酸氯丙嗪后8 h 的小鼠肛溫變化； 與模型組比較：*P<0.05,**P<0.01。

圖5FTZ對(duì)鹽酸氯丙嗪低溫模型小鼠中心體溫的影響
Figure5Effect of FTZ on central body temperature of mice with chlorpromazine hypothermia

與對(duì)照組比較:*P<0.05。

圖6注射鹽酸氯丙嗪后小鼠 24 h 內(nèi)的能量代謝情況
Figure6Energy metabolism of mice within 24 hours after injection of chlorpromazine hydrochloride

如圖7所示，對(duì)鹽酸氯丙嗪實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步分析，發(fā)現(xiàn)模型組小鼠在腹腔注射鹽酸氯丙嗪后的24 h內(nèi)，模型組與給藥組小鼠的呼吸商差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而其耗氧量、熱量值均顯著下降。說(shuō)明鹽酸氯丙嗪可使小鼠的能量代謝下降。造模5 h后，給藥組與模型組的耗氧量(圖7A)、熱量值(圖7B)開(kāi)始顯示出統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，且差異在變大。造模12～16 h時(shí)，給藥組與模型組的能量代謝指標(biāo)顯示出最大差異。以上結(jié)果說(shuō)明，F(xiàn)TZ并不能長(zhǎng)時(shí)間維持對(duì)氯丙嗪低溫小鼠能量代謝的促進(jìn)作用，其藥效在鹽酸氯丙嗪造模的第12～16小時(shí)之間達(dá)到最佳。提示FTZ能改善這種由于鹽酸氯丙嗪導(dǎo)致的低耗氧量、低熱量值的情況，具有促進(jìn)小鼠能量代謝的作用。

上述結(jié)果表明，鹽酸氯丙嗪能顯著降低小鼠的體溫、降低小鼠的能量代謝，并于30 h后恢復(fù)正常體溫； FTZ 短期給藥，不能提高正常小鼠的體溫，但有減少給藥后的體溫波動(dòng)的趨勢(shì)。FTZ能升高由鹽酸氯丙嗪誘導(dǎo)的低溫小鼠的1 h內(nèi)體溫，促進(jìn)其24 h內(nèi)的能量代謝。

A. FTZ對(duì)鹽酸氯丙嗪模型小鼠各時(shí)間點(diǎn)耗氧量的影響；

B. FTZ對(duì)鹽酸氯丙嗪模型小鼠各時(shí)間點(diǎn)熱量值的影響；

C. FTZ對(duì)鹽酸氯丙嗪模型小鼠各時(shí)間點(diǎn)呼吸商的影響。

與對(duì)照組比較：*P<0.05,**P<0.01；與模型組比較：#P<0.05,##P<0.01。

圖7注射鹽酸氯丙嗪24 h內(nèi)小鼠各時(shí)間點(diǎn)的能量代謝情況

Figure7Energy metabolism of mice injected with chlorpromazine hydrochloride at various time points within 24 hours

4 討論

本實(shí)驗(yàn)中分別采取了3種小鼠模型，分別為aP2-SREBP1c脂肪代謝障礙模型小鼠、C57正常小鼠、氯丙嗪誘導(dǎo)的低溫小鼠。研究表明，aP2-SREBP1c脂肪代謝障礙小鼠具有高血糖癥、高胰島素血癥、胰島素抵抗和2型糖尿病等病理表征[19-21]，具有顯著糖脂代謝紊亂的特點(diǎn)。前期研究表明，F(xiàn)TZ可以改善aP2-SREBP1c脂肪代謝障礙模型小鼠的糖脂代謝紊亂[22-23]。本研究從能量代謝角度對(duì)其進(jìn)行研究，希望能從中找到FTZ治療糖脂代謝疾病相關(guān)機(jī)制的更多可能性。結(jié)果表明， aP2-SREBP1c脂肪代謝障礙模型小鼠的棕色脂肪組織耗氧量與對(duì)照組相比顯著下降，說(shuō)明該模型小鼠既存在糖、脂代謝紊亂，同時(shí)也存在能量代謝障礙，給予FTZ治療后，模型小鼠棕色脂肪組織耗氧量顯著升高，說(shuō)明FTZ能促進(jìn)糖脂代謝紊亂下的能量代謝。

在正常C57小鼠實(shí)驗(yàn)中，給藥FTZ 14 d，小鼠的晚間呼吸商相對(duì)于對(duì)照組顯著升高，而小鼠的中心體溫及其他能量代謝指標(biāo)并無(wú)顯著變化，說(shuō)明短期給藥FTZ只能促進(jìn)正常小鼠晚間的代謝活性，對(duì)正常小鼠的整體能量代謝無(wú)太大影響。

鹽酸氯丙嗪為中樞多巴胺受體的阻斷劑，通過(guò)阻斷中腦-邊緣葉及中腦-皮質(zhì)通路中的多巴胺受體而產(chǎn)生鎮(zhèn)靜效應(yīng)。研究表明，氯丙嗪對(duì)下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞有很強(qiáng)的抑制作用，使體溫調(diào)節(jié)中樞喪失調(diào)節(jié)體溫的作用[24-26]，臨床常用于低溫麻醉、人工冬眠。本實(shí)驗(yàn)采用氯丙嗪誘導(dǎo)的低溫小鼠模型，主要探究FTZ在非糖脂代謝紊亂情況下對(duì)能量代謝的作用。實(shí)驗(yàn)證明，腹腔注射0.08%鹽酸氯丙嗪能顯著降低小鼠的體溫與機(jī)體的能量代謝，持續(xù)時(shí)長(zhǎng)約24 h。而在給予FTZ的情況下，不僅能短暫緩解由于氯丙嗪引起的低溫，同時(shí)還能升高其能量代謝。以上結(jié)果證明，F(xiàn)TZ不能改變正常狀態(tài)下的機(jī)體的能量代謝狀態(tài)，但可以促進(jìn)非糖脂代謝紊亂情況下的能量代謝。

“調(diào)肝啟樞化濁”，是基于糖脂代謝疾病一體化綜合防控而提出的一種策略[27]，強(qiáng)調(diào)糖脂代謝紊亂性疾病的本質(zhì)就是“濁”，運(yùn)用多種有效手段，從多個(gè)環(huán)節(jié)干預(yù)，通過(guò)“調(diào)肝”使全身氣機(jī)通暢，五臟安和；“啟樞”使脾胃升降有序，運(yùn)化功能正常，從而達(dá)到防治未病的效果。就是通過(guò)多種有效手段，使機(jī)體的功能恢復(fù)正常。本研究證明了FTZ在非糖脂代謝依賴(lài)下的促能量代謝作用，符合糖脂代謝疾病一體化綜合防控的策略要求，為FTZ治療糖脂代謝紊亂的潛在機(jī)制研究提供了更多的可能。