郭曉聰，徐曉婭，劉偉平

［作者單位］643000四川自貢，自貢市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科（郭曉聰，劉偉平），神經(jīng)內(nèi)科（徐曉婭）

多發(fā)性骨髓瘤是惡性漿細(xì)胞疾病中最為常見(jiàn)的一種，是骨髓內(nèi)單克隆漿細(xì)胞異常增生的一種惡性腫瘤。異常漿細(xì)胞浸潤(rùn)骨髓和軟組織并分泌出大量異常的單克隆免疫球蛋白，即M蛋白［1］。患者常出現(xiàn)腎功能損害、高鈣血癥、繼發(fā)感染、高黏滯綜合征等臨床問(wèn)題［2］。近年來(lái)，隨著人口老齡化日趨嚴(yán)重，多發(fā)性骨髓瘤的發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，嚴(yán)重危及患者健康和生命，該病的早期診斷和鑒別具有重要的臨床意義。以往多發(fā)性骨髓瘤的檢測(cè)手段多以骨髓涂片、免疫球蛋白定量和組織活檢為主，但由于這些檢測(cè)方法都存在一定的局限性，對(duì)多發(fā)性骨髓瘤的診斷極易造成漏診或誤診。目前血清蛋白電泳和免疫固定電泳已成為多發(fā)性骨髓瘤臨床診斷的重要手段［3］。該次研究選取筆者所在醫(yī)院血液科已確診的多發(fā)性骨髓瘤患者56例，分別行血清蛋白電泳和免疫固定電泳檢測(cè)M蛋白，探討兩種檢測(cè)方法在多發(fā)性骨髓瘤臨床診斷中的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年12月—2017年6月在筆者所在醫(yī)院血液科及腫瘤科住院治療的多發(fā)性骨髓瘤患者56例為研究對(duì)象，均符合國(guó)內(nèi)MM診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］。且均為新發(fā)病例。其中男31例，女25例；年齡42.6～77.3歲，平均57.6歲。

1.2 儀器與方法 采用法國(guó)Sebia公司的capillarysminicap毛細(xì)管電泳儀，試劑為Sebia公司配套試劑。血清蛋白電泳試劑包括：緩沖液（pH9.9），沖洗液（70 ml原液加蒸餾水至 700 ml配制而成），稀釋器，試劑杯。免疫固定電泳試劑用的是即用型抗血清杯，包括：分析緩沖液（ELP溶液，黃色），抗人類γ重鏈哺乳動(dòng)物免疫球蛋白 （粉紅色），抗人類α重鏈哺乳動(dòng)物免疫球蛋白（深藍(lán)色），抗人類u重鏈哺乳動(dòng)物免疫球蛋白（黃綠色），抗人類κ（游離和結(jié)合）輕鏈哺乳動(dòng)物免疫球蛋白（淺綠色），抗人類λ（游離和結(jié)合）輕鏈哺乳動(dòng)物免疫球蛋白（淺藍(lán)色）和用于樣品稀釋的特定稀釋液。

1.3 試驗(yàn)方法 （1）選擇項(xiàng)目血清蛋白電泳，取血清2 ml置于sebia樣本架上，再放入血清蛋白電泳稀釋杯。待儀器進(jìn)入準(zhǔn)備完成狀態(tài)后進(jìn)樣指示燈變綠，從儀器進(jìn)樣口放入樣本架，儀器自動(dòng)吸取樣本進(jìn)行稀釋，電泳。完成后取出樣本架。（2）血清蛋白電泳完成后，切換項(xiàng)目為免疫固定電泳。將血清樣本放入樣本架，在樣本架上加載即用型抗血清杯，重新放入儀器進(jìn)樣口。儀器自動(dòng)吸樣進(jìn)行免疫固定電泳。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件。計(jì)數(shù)資料用百分?jǐn)?shù)表示，取P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清蛋白電泳結(jié)果 在56例多發(fā)性骨髓瘤患者中有49例患者血清蛋白電泳檢測(cè)出M蛋白 （即基底窄而均一的尖峰），且多出現(xiàn)在γ球蛋白區(qū)，少數(shù)出現(xiàn)在β區(qū)或兩區(qū)帶之間，有7例患者未檢出。見(jiàn)圖1。

2.2 免疫固定電泳結(jié)果 56例多發(fā)性骨髓瘤患者均檢測(cè)出M蛋白，檢出率100%；具體分型結(jié)果為：IgG κ 型 17例，λ 型 11例，IgA κ 型 13例，λ 型 9例，輕鏈型κ型2例，λ型4例。見(jiàn)表1。

2.3 M蛋白檢出率比較 血清蛋白電泳的M蛋白檢出率為84%（47/56），而免疫固定電泳的M蛋白檢出率則為100%（56/56），后者檢出率明顯高于前者。

圖1 多發(fā)性骨髓瘤血清蛋白電泳圖

表1 56例多發(fā)性骨髓瘤血清免疫固定電泳分型結(jié)果

3 討論

多發(fā)性骨髓瘤（MM）是一種惡性漿細(xì)胞病，其腫瘤細(xì)胞起源于骨髓中的漿細(xì)胞。病理特征為骨髓漿細(xì)胞異常增生伴有單克隆免疫球蛋白或輕鏈過(guò)度生成，主要指標(biāo)表現(xiàn)為 IgG、IgA、IgE或 Bence Jones蛋白質(zhì)（游離的單克隆性κ或γ輕鏈）過(guò)度增生［5］；極少數(shù)患者可以是不產(chǎn)生M蛋白的未分泌型MM。發(fā)病率為 2～3/10萬(wàn)，男女比例大概為 1.6∶1，多為40歲以上中老年人患病。MM臨床表現(xiàn)復(fù)雜，如骨痛、貧血、腎功能損害、高鈣血癥等［6］。且由于其起病徐緩，早期無(wú)明顯癥狀，容易被誤診。據(jù)相關(guān)資料顯示其誤診率高達(dá)54.00%～69.11%［7］。過(guò)去診斷多發(fā)性骨髓瘤常依據(jù)臨床癥狀，免疫球蛋白定量以及骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查等。但由于該病臨床癥狀多樣化且不典型，骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查難以和漿細(xì)胞白血病區(qū)分，免疫球蛋白增高不能與巨球蛋白血癥等疾病鑒別［8］。血清蛋白電泳在臨床實(shí)驗(yàn)中已被廣泛應(yīng)用于檢測(cè)樣本中的非正常蛋白質(zhì)。血清蛋白電泳可以用來(lái)檢測(cè)M蛋白，但是血清蛋白電泳也存在自身缺陷，即難以區(qū)別α2區(qū)或β區(qū)急性時(shí)反應(yīng)蛋白或脂蛋白增高引起的峰型和M峰，比如多數(shù)腎病、腎小球腎炎患者α2區(qū)或β區(qū)多出現(xiàn)高尖的峰，而血清蛋白電泳不能直接認(rèn)定其為M蛋白，需要通過(guò)免疫固定電泳做深入的確認(rèn)。免疫固定電泳技術(shù)是一種用于分析樣品中特異性抗原的技術(shù)［9］，電泳后的蛋白質(zhì)與相應(yīng)抗體形成復(fù)合物后被固定在相應(yīng)的位置上，圖像清晰，易于解釋結(jié)果［10］。多項(xiàng)研究表明［11，12］，免疫固定電泳法在 MM 的診斷價(jià)值明顯高于血清蛋白電泳。所以，目前血清蛋白電泳和免疫固定電泳就成為了診斷多發(fā)性骨髓瘤的重要手段。

該次試驗(yàn)選取了近半年時(shí)間在該院血液科住院確診的多發(fā)性骨髓瘤患者56例，分別做血清蛋白電泳和免疫固定電泳檢測(cè)。結(jié)果顯示，56例多發(fā)性骨髓瘤患者中，血清蛋白電泳的M蛋白檢出率為84%，而免疫固定電泳的M蛋白檢出率則為100%。進(jìn)一步進(jìn)行分型提示：IgGκ型17例，λ型11例，IgA κ型13例，λ型9例，輕鏈型κ型2例，λ型4例。

綜上，血清蛋白電泳能快速、準(zhǔn)確地對(duì)血清蛋白進(jìn)行分析，并且圖譜清晰，能初步分離鑒別出血清中的M蛋白。而免疫固定電泳在快速分離鑒別M蛋白方面有顯著優(yōu)勢(shì)，且可對(duì)M蛋白進(jìn)行分型，相比于骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查和血清蛋白電泳具有更快速簡(jiǎn)單，更準(zhǔn)確的特點(diǎn)。當(dāng)血清蛋白電泳結(jié)果出現(xiàn)異常峰時(shí)須做免疫固定電泳明確診斷和分型。因此，血清蛋白電泳只能作為多發(fā)性骨髓瘤的初篩診斷，而免疫固定電泳是多發(fā)性骨髓瘤診斷和確診的重要手段。