李葉青 ，皮小弟，王 森，張 婕，羅櫻桃，鄧桂美

（1.河源職業(yè)技術(shù)學(xué)院機(jī)電工程學(xué)院，廣東 河源 517000；2.廣東省河源市質(zhì)量計(jì)量監(jiān)督檢測(cè)所，廣東 河源 517000）

農(nóng)藥，對(duì)于防治病蟲害、去除雜草、調(diào)節(jié)農(nóng)作物生長(zhǎng)具有重要作用。中國(guó)農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)數(shù)量多、規(guī)模小而且分散，生產(chǎn)者法律意識(shí)比較弱，從業(yè)人口眾多，構(gòu)成了農(nóng)藥殘留安全問題多發(fā)并將在較長(zhǎng)時(shí)期內(nèi)持續(xù)存在[1]。

目前，農(nóng)藥殘留監(jiān)測(cè)分析報(bào)道較多[2-5]，蔬菜中農(nóng)藥殘留的分析檢測(cè)方法主要集中在氣相色譜法[6]、高效液相色譜法[7]、氣/液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法[8-9]等。農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法主要有2種，即色譜法和快速檢測(cè)法。色譜法是定量分析方法，可作為執(zhí)法依據(jù)，但是檢測(cè)儀器投資大，檢測(cè)能力要求高，而且檢測(cè)周期較長(zhǎng)；快速檢測(cè)法是定性分析方法，主要針對(duì)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥，可對(duì)大量蔬菜樣本進(jìn)行初篩，檢測(cè)樣本量大，檢測(cè)能力要求相對(duì)較低。要從根本上解決蔬菜農(nóng)藥殘留安全問題，就必須對(duì)蔬菜生產(chǎn)、流通全過程實(shí)施全程管理和監(jiān)控，而實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法和儀器是很難及時(shí)、快速而全面地從各環(huán)節(jié)監(jiān)控食品安全狀況，這就需要大量能夠滿足這一要求的快速、方便、準(zhǔn)確、靈敏的食品安全分析快速檢測(cè)技術(shù)。簡(jiǎn)單高效、低成本的農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法和技術(shù)非常重要[10]，特別適合蔬菜生產(chǎn)基地、批發(fā)市場(chǎng)、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)和農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè)部門的初篩。2015年新《食品安全法》頒布，賦予快速檢測(cè)方法一定程度上的法律效力。食品安全快速檢測(cè)技術(shù)是食品安全保障的重要支撐。

本研究采用農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)法（以下簡(jiǎn)稱快檢），調(diào)查河源市區(qū)內(nèi)夏秋季常見蔬菜農(nóng)藥殘留情況，并對(duì)快檢農(nóng)殘超標(biāo)蔬菜進(jìn)行色譜儀器復(fù)檢，來驗(yàn)證快檢方法的適用性和準(zhǔn)確性；總結(jié)河源市常見蔬菜的總體農(nóng)藥殘留情況，并獲得蔬菜農(nóng)藥殘留超標(biāo)與蔬菜種類、種植時(shí)間及售賣場(chǎng)所之間的關(guān)系，以期為消費(fèi)者提供參考。

1 材料和方法

1.1 樣品來源

2018年7—11月，每7 d對(duì)河源市區(qū)及周邊的農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)、大型超市、農(nóng)產(chǎn)品商店及蔬菜自賣農(nóng)銷售的蔬菜進(jìn)行1次農(nóng)藥殘留的隨機(jī)檢查。主要選取各月份具有代表性的蔬菜，取樣量大致相同，其中葉菜類包括生菜、上海青、菜心，莖菜類為西芹菜，瓜菜類包括苦瓜、茄子，蔥蒜類為蒜苗。共計(jì)調(diào)查取樣數(shù)為354個(gè)；每月取樣點(diǎn)16個(gè)，其中農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)4～5個(gè)、大型超市3～4個(gè)、農(nóng)產(chǎn)品平價(jià)超市5～6個(gè)及蔬菜自賣農(nóng)2～3個(gè)。

1.2 儀器與試劑

儀器：TL-310多通道農(nóng)藥殘留快速測(cè)試儀 （廣東達(dá)元食品藥品安全技術(shù)有限公司）；JJ-2002電子天平（廣州玉治儀器有限公司）；GC2010Plus配FPD檢測(cè)器（日本島津）；LC20AT配FLD檢測(cè)器（日本島津）。

農(nóng)殘快速檢測(cè)試劑盒：內(nèi)含底物、顯色劑、膽堿酯酶、緩沖劑（廣東達(dá)元食品藥品安全技術(shù)有限公司），與農(nóng)殘速測(cè)儀配套使用。

1.3 檢測(cè)方法與判定依據(jù)

1.3.1 快速檢測(cè)技術(shù)驗(yàn)證

1.3.1.1 樣品快速檢測(cè)與判定 參照GB/T 5009.199—2003《蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)》方法進(jìn)行測(cè)定。

檢測(cè)操作參照儀器說明進(jìn)行：選取有代表性的蔬菜樣品，擦去表面泥土，剪成1.0 cm×1.0 cm的碎片，取樣品1.00 g，放入燒杯或提取瓶中，加入 5 mL緩沖溶液，振蕩 1～2 min，倒出提取液，靜置 3～5 min，待用；然后進(jìn)行對(duì)照溶液測(cè)試，先于試管中加入 2.5 mL緩沖溶液，再加入0.l mL酶液、0.1 mL顯色劑，搖勻后于37 ℃放置15 min以上（每批樣品的控制時(shí)間要求一致）。 加入0.l mL各項(xiàng)底物搖勻，此時(shí)檢液開始顯色反應(yīng)，應(yīng)立即放入儀器比色池中，記錄反應(yīng) 3 min的吸光度變化值；再對(duì)待測(cè)樣液進(jìn)行測(cè)試，先于試管中加入 2.5 mL樣品提取液，其他操作與對(duì)照溶液測(cè)試相同，記錄反應(yīng) 3 min的吸光度變化值。

結(jié)果判定：初次檢測(cè)抑制率＜50%的樣品，為合格樣品；初次檢測(cè)抑制率≥50%的樣品，需重復(fù)檢測(cè) 5 次以上，抑制率≥50%的重現(xiàn)性≥80%的判定為不合格樣品；重現(xiàn)性＜80%的判定為合格樣品。

1.3.1.2 樣品復(fù)檢與判定 快檢超標(biāo)樣品按照NY/T 761—2008《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測(cè)定》復(fù)檢。

有機(jī)磷農(nóng)藥前處理具體操作步驟：待測(cè)樣制備，準(zhǔn)確稱取25.0 g試樣于勻漿機(jī)中，加入50.0 mL乙腈，高速勻漿2 min后用濾紙過濾，將濾液倒入裝有5～7 g氯化鈉的具塞量筒中，收集濾液40～50 mL，蓋上塞子，劇烈震蕩1 min，室溫下靜置30 min。從量筒中吸取10.00 mL乙腈溶液于刻度試管中，80 ℃氮吹至近干，加入丙酮溶解并定容至5 mL，若有需要用有機(jī)濾膜過濾，待測(cè)。

氨基甲酸酯類農(nóng)藥前處理操作步驟：從待測(cè)樣品制備→80 ℃氮吹至近干與有機(jī)磷農(nóng)藥前處理步驟相同，再加入2.0 mL甲醇＋二氯甲烷（體積比為1∶99），過固相萃取氨基柱，分2次收集甲醇＋二氯甲烷（體積比為1∶99）濾液5 mL，50 ℃氮吹至近干，用甲醇溶解定容至5 mL，若有需要用有機(jī)濾膜過濾，待測(cè)。

測(cè)定條件依照NY/T 761—2008所示有機(jī)磷氣相色譜-FPD檢測(cè)，氨基甲酸酯類液相色譜柱后衍生FLD檢測(cè)，并按照GB 2763—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》進(jìn)行結(jié)果判定。

有機(jī)磷農(nóng)藥主要檢測(cè)：甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、對(duì)硫磷、甲基對(duì)硫磷、樂果、氧樂果、敵百蟲、敵敵畏、內(nèi)吸磷、馬拉硫磷、殺螟硫磷和水胺硫磷13種；氨基甲酸酯類農(nóng)藥主要檢測(cè)：涕滅威亞砜、涕滅威砜、滅多威、3-羥基克百威、涕滅威、克百威、甲萘威、異丙威8種。

1.3.1.3 樣品快檢假陽性與判定 一些蔬菜中含有對(duì)酶有抑制作用的植物次生物質(zhì)，其能起到抑制快檢試劑盒酶活性的作用，使測(cè)定結(jié)果偏高，也使得快檢判定為農(nóng)藥殘留超標(biāo)；快檢超標(biāo)樣品通過色譜儀器復(fù)檢，判定為農(nóng)藥殘留未超標(biāo)，這樣的樣品為快檢假陽性樣品。

快檢假陽性率計(jì)算公式為：X＝a/b×100%，

式中：X 快檢假陽性率；a為某一快檢農(nóng)殘超標(biāo)樣品經(jīng)色譜儀器復(fù)檢判定農(nóng)殘未超標(biāo)數(shù)；b為某一樣品快檢農(nóng)殘超標(biāo)數(shù)。

1.3.2 蔬菜農(nóng)藥殘留情況分析

根據(jù)快檢與復(fù)檢檢測(cè)結(jié)果對(duì)河源市2018年夏秋季市售蔬菜農(nóng)藥殘留實(shí)際情況進(jìn)行分析，并從不同蔬菜種類、不同月份（7—11月）、不同取樣點(diǎn)3個(gè)角度分析蔬菜農(nóng)藥殘留超標(biāo)與蔬菜種類、種植時(shí)間及售賣場(chǎng)所之間的關(guān)系。

1.4 數(shù)據(jù)處理

利用Excel對(duì)采集數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)的準(zhǔn)確性

快檢共檢測(cè)蔬菜樣品354個(gè)，43個(gè)超標(biāo)，超標(biāo)率為12.15%。僅蒜苗和西芹菜出現(xiàn)假陽性，假陽性率分別為90.48%（19/21）和75.00%（3/4）。

從不同種類蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)結(jié)果來看（表1）：葉菜類162個(gè)樣品中超標(biāo)8個(gè)，快檢超標(biāo)率為4.94%，假陽性率為0.00%；莖菜類40個(gè)樣品中超標(biāo)4個(gè)，快檢超標(biāo)率為10.00%，假陽性率為75.00%；瓜菜類102個(gè)樣品中超標(biāo)10個(gè)，快檢超標(biāo)率為9.80%，假陽性率為0.00%；蔥蒜類50個(gè)樣品中超標(biāo)21個(gè)，快檢超標(biāo)率為42.00%，假陽性率為90.48%。由于莖菜類（西芹菜）葉綠素含量較高，蔥蒜類（蒜苗）含有特定次生物質(zhì)，其出現(xiàn)快檢假陽性率高。

綜合以上來看，對(duì)于葉菜類和瓜菜類，本調(diào)查研究中使用的酶抑制率測(cè)定農(nóng)藥殘留的快檢方法是適用的；而對(duì)于莖菜類和蔥蒜類，由于樣品只涉及西芹菜和蒜苗，只能說明本試驗(yàn)酶抑制率測(cè)定農(nóng)藥殘留方法不適合西芹菜和蒜苗的測(cè)定或方法有待改進(jìn)。

2.2 河源市夏秋季蔬菜農(nóng)藥殘留實(shí)際情況分析

在354個(gè)蔬菜樣品中，蔬菜農(nóng)藥殘留總檢出率為93.50%，實(shí)際超標(biāo)率為5.93%。

2.2.1 不同蔬菜種類實(shí)際農(nóng)藥殘留情況

由表2可知，不同種類蔬菜的農(nóng)藥殘留量不同，檢出率高低順序?yàn)榍o菜類（97.50%）＞瓜菜類（96.08%）＞蔥蒜類（96.00%）＞葉菜類（90.12%）；超標(biāo)率高低順序?yàn)楣喜祟悾?.80%）＞葉菜類（4.94%）＞蔥蒜類（4.00%）＞莖菜類（2.50%）。

瓜菜類蔬菜農(nóng)藥殘留檢出率高于其他種類的主要原因可能與季節(jié)有關(guān)，調(diào)查期間為瓜類蔬菜盛產(chǎn)期，農(nóng)藥直接噴灑在瓜果表面，容易吸收，且此時(shí)期瓜果生長(zhǎng)較快，用藥與上市可能未達(dá)到安全間隔期，導(dǎo)致瓜菜類蔬菜附著的農(nóng)藥相對(duì)較多。

表1 不同蔬菜種類農(nóng)藥殘留快檢與復(fù)檢檢測(cè)結(jié)果

表2 不同蔬菜種類實(shí)際農(nóng)藥殘留檢測(cè)結(jié)果

2.2.2 各月份蔬菜實(shí)際農(nóng)藥殘留情況

由表3可知，5個(gè)月的蔬菜農(nóng)藥殘留檢出率分別為77.27%、97.37%、93.96%、97.30%和96.34%，超標(biāo)率分別為0.00%、0.00%、3.45%、2.70%和18.29%，實(shí)際合格率分別為 100.00%、100.00%、96.55%、97.30%、81.71%，合格率以11月份最低。綜合分析，可能是種植時(shí)期菜農(nóng)施藥次數(shù)增多，用藥量加大，導(dǎo)致蔬菜中農(nóng)藥殘留檢出率高，超標(biāo)嚴(yán)重[11]。

2.2.3 不同取樣點(diǎn)蔬菜實(shí)際農(nóng)藥殘留情況

表4為不同取樣點(diǎn)的蔬菜農(nóng)藥殘留檢出情況，檢測(cè)結(jié)果表明蔬菜的來源不同，農(nóng)藥殘留超標(biāo)率有很大不同，檢出率大小順序?yàn)榇笮统校?00.00%）＞農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)（93.87%）＞農(nóng)產(chǎn)品商店（91.00%）＞蔬菜自賣農(nóng)（90.91%）；超標(biāo)率大小排序?yàn)檗r(nóng)產(chǎn)品商店（12.00%）＞ 蔬菜自賣農(nóng)（9.09%）＞農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)（3.57%）＞大型超市（0.00%）。

可見，大型超市的蔬菜農(nóng)藥殘留超標(biāo)率最低，主要是因?yàn)榇笮统信渲棉r(nóng)產(chǎn)品快檢室，蔬菜的來貨渠道監(jiān)管較嚴(yán)；農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)稍高于大型超市，在于其快檢制度還不夠完善；大部分農(nóng)產(chǎn)品商店與蔬菜自賣農(nóng)相似，農(nóng)藥殘留超標(biāo)率較高，在于其均自產(chǎn)自銷，自我約束力較低。

3 結(jié)論與討論

此次調(diào)查分析，應(yīng)用快檢法共檢測(cè)蔬菜樣品354個(gè)，43個(gè)超標(biāo)。色譜儀器復(fù)檢快檢超標(biāo)樣，僅蒜苗和西芹菜出現(xiàn)假陽性，假陽性率分別為90.48%（19/21）和75.00%（3/4），其余蔬菜農(nóng)藥殘留快檢結(jié)果準(zhǔn)確。農(nóng)藥殘留快檢總檢出率93.50%（331/354），快檢總超標(biāo)率12.15%（43/354），實(shí)際總超標(biāo)率5.93%（21/354）。市售蔬菜中存在農(nóng)藥檢出及超標(biāo)現(xiàn)象：從不同種類來看，莖菜類農(nóng)殘檢出率最高（97.50%），瓜菜類農(nóng)殘超標(biāo)率最高，為9.80%；7—11月中，8月蔬菜農(nóng)殘檢出率最高（97.37%），11月蔬菜農(nóng)殘超標(biāo)率最高，為18.29%；從不同取樣點(diǎn)來看，大型超市檢出率最高（100.00%），農(nóng)產(chǎn)品商店超標(biāo)率最高，為12.00%。除部分蔬菜種類（如蒜苗、西芹菜等），快檢結(jié)果快速且準(zhǔn)確。

表3 不同月份實(shí)際農(nóng)藥殘留檢測(cè)結(jié)果

表4 不同取樣點(diǎn)蔬菜實(shí)際農(nóng)藥殘留檢測(cè)結(jié)果

膽堿酯酶的特異性等因素使得農(nóng)藥殘留酶抑制率快速檢測(cè)法存在一些不足之處，且使該方法的應(yīng)用在一定程度上受到限制[12]；但是該方法可以解決因?qū)嶒?yàn)室的設(shè)備有限、樣品檢測(cè)數(shù)量有限、樣品檢測(cè)費(fèi)用較高而無法解決的問題，在規(guī)避風(fēng)險(xiǎn)前提下特別適合蔬菜生產(chǎn)基地、批發(fā)市場(chǎng)、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)和農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè)部門的初篩。

市售蔬菜中存在農(nóng)藥超標(biāo)現(xiàn)象。為解決蔬菜中農(nóng)藥殘留問題，政府相關(guān)主管部門需建立并完善隨機(jī)抽檢機(jī)制[13]，從田間到市場(chǎng)再到餐桌全過程監(jiān)管，促使蔬菜生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)者科學(xué)合理使用農(nóng)藥，確保蔬菜食用安全。