鐘艷丹 趙磊 熊清芳 胡志亮 楊永峰

恩替卡韋(entecavir)為環(huán)氧羥碳脫氧鳥苷，具有強(qiáng)有力抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用，且耐藥率低，為國內(nèi)外慢性乙型肝炎(CHB)防治指南一致推薦的抗HBV治療的一線藥物[1-3]。恩替卡韋分散片是江蘇正大天晴藥業(yè)研制的用于CHB抗病毒治療的藥物，前期研究顯示其藥效學(xué)、動(dòng)物毒性試驗(yàn)與人體藥代動(dòng)力學(xué)與恩替卡韋相似。研究報(bào)道，HBeAg陰性CHB患者HBsAg的攜帶率占33%，且呈增加趨勢(shì)[4]。本文通過比較HBeAg陰性CHB患者在恩替卡韋分散片治療前后T淋巴細(xì)胞的變化，旨在了解恩替卡韋分散片治療對(duì)HBeAg陰性CHB患者免疫功能的影響。

資料和方法

一、病例來源

62例HBeAg陰性CHB患者均系2015年1月至2017年12月在我院門診及住院患者，其中男46例，女16例，年齡20～56歲，平均年齡(35±8)歲，診斷符合2010年《慢性乙型肝炎防治指南》的標(biāo)準(zhǔn)[5]，并符合下列入選條件：(1)HBeAg陰性；(2)血清HBV DNA>1×104拷貝數(shù)/ml；(3)ALT>2倍正常值上限。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)既往使用過核苷(酸)類似物、干擾素或其他免疫調(diào)節(jié)劑(如胸腺肽)；(2)合并甲型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、丁型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、巨細(xì)胞病毒和EB病毒感染者；(3)合并妊娠、肝硬化、甲狀腺功能亢進(jìn)癥、系統(tǒng)性紅斑狼瘡，嚴(yán)重心臟、腎、內(nèi)分泌和造血系統(tǒng)疾病者。

二、治療方法

62例患者除一般護(hù)肝治療外，加用恩替卡韋分散片(江蘇正大天晴藥業(yè))0.5 mg，口服，1次/d，觀察24周。

三、檢測(cè)方法

(1)肝功能(包括ALT、AST、TBil、Alb、GLO)：治療前后用Beckman公司自動(dòng)生化儀檢測(cè)；(2)血清HBV標(biāo)志物(HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe):治療前后用微粒子酶免疫熒光檢測(cè)(AxSYM系統(tǒng)，購自美國Abbott公司)；(3)HBV DNA：采用羅氏(Cobas Ampliprep/Cobas Taqman)第二代實(shí)時(shí)PCR法(檢測(cè)下限值為20 IU/ml)；(4)T細(xì)胞亞群：采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(熒光標(biāo)記單克隆抗體購自Beckman-Coulter公司)。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

結(jié) 果

一、 療效情況

在治療24周結(jié)束時(shí)，62例CHB患者肝功能ALT、HBV DNA水平較治療前明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，表1)。

二、 治療前后外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化

患者治療后外周血CD3+、CD4+和CD8+細(xì)胞計(jì)數(shù)較治療前升高，CD4+/CD8+比值也明顯高于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(表2)。

討 論

恩替卡韋分散片是國產(chǎn)新一代鳥嘌呤核苷類似物，通過在人體內(nèi)磷酸化成為具有活性的三磷酸鹽，與HBV多聚酶的天然底物三磷酸脫氧鳥嘌呤核苷競(jìng)爭(zhēng)，從而作用于HBV復(fù)制的啟動(dòng)、逆轉(zhuǎn)錄和合成三個(gè)步驟，阻斷HBV病毒的復(fù)制，達(dá)到治療慢性乙型肝炎的目的[6]。本研究通過觀察62例HBeAg陰性CHB患者的治療效果，發(fā)現(xiàn)恩替卡韋分散片能迅速降低HBV DNA水平，使ALT復(fù)常，臨床療效好。本文也評(píng)估了恩替卡韋在高效抗病毒的同時(shí)對(duì)HBeAg陰性CHB患者免疫功能的影響。

研究顯示宿主的細(xì)胞免疫功能，特別是HBV特異性CD4+T 細(xì)胞反應(yīng)和CD8+T細(xì)胞反應(yīng)對(duì)HBV的清除和疾病的轉(zhuǎn)歸有重要意義。CD4+T 細(xì)胞數(shù)量下降是導(dǎo)致機(jī)體無法有效清除病毒，使感染變得遷徙的重要因素[7]。CD4+/CD8+比值常作為評(píng)估免疫狀態(tài)的指標(biāo)，比值上升提示免疫應(yīng)答的正調(diào)節(jié)占優(yōu)勢(shì)，比值下降，提示免疫功能低下。檢測(cè)外周血T細(xì)胞亞群能反映機(jī)體細(xì)胞免疫狀態(tài)，當(dāng)T淋巴細(xì)胞亞群的數(shù)量和功能發(fā)生異常時(shí)，可導(dǎo)致免疫功能紊亂而發(fā)生持續(xù)的HBV感染。研究顯示，CHB患者體內(nèi)存在細(xì)胞免疫功能的紊亂，T淋巴細(xì)胞亞群失衡導(dǎo)致機(jī)體不能有效清除入侵的HBV，導(dǎo)致疾病的發(fā)生和發(fā)展。有研究表明[8]，CHB 患者CD4+細(xì)胞減少，CD8+細(xì)胞升高，使CD4+/CD8+比值下降。CHB患者在HBV DNA復(fù)制時(shí)，T細(xì)胞亞群存在明顯的紊亂。

本研究提示，HBeAg陰性CHB患者使用恩替卡韋分散片治療24周后， HBV DNA水平明顯下降，CD3+、CD4+、CD8+水平升高，CD4+/CD8+比值也升高，表明恩替卡韋分散片可能通過抑制HBV復(fù)制、降低CHB患者體內(nèi)病毒載量，間接引起機(jī)體細(xì)胞免疫功能的改善，但確切免疫調(diào)節(jié)機(jī)制有待深入研究。

表1 62例CHB患者治療24周前后肝功能和HBV DNA水平(±s)的變化

表2 62例患者治療24周前后T淋巴細(xì)胞亞群(±s)的變化