李婧倫 ， 蔡 成 ， 孫利麗 ， 曹 越 ， 趙宏敬 ， 宋曉東 ， 邢明偉

(1.東北林業(yè)大學(xué)野生動(dòng)物資源學(xué)院 ， 黑龍江 哈爾濱 150040；2.大連森林動(dòng)物園 ， 遼寧 大連 116013)

小羊駝(Lamapacos)屬哺乳綱偶蹄目駱駝科美洲鴕屬，主要分布于安第斯山脈[1]。小羊駝性情溫順，是良好的動(dòng)物園展示動(dòng)物，除此之外，小羊駝還是毛肉兼用的草飼家畜，有著較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值[2]。2018年5月9日，大連森林動(dòng)物園飼養(yǎng)的1只成年雌性小羊駝突然倒地不起，經(jīng)搶救無效后死亡。通過尸體剖檢、實(shí)驗(yàn)室檢查、病理學(xué)檢驗(yàn)后確診為纖維素性化膿性肺炎，報(bào)告如下。

1 發(fā)病經(jīng)過

早9點(diǎn)，飼養(yǎng)員打掃圈舍時(shí)發(fā)現(xiàn)2只小羊駝在運(yùn)動(dòng)場(chǎng)內(nèi)發(fā)生了碰撞，撞擊后1只小羊駝步態(tài)不穩(wěn)，與飼養(yǎng)員清掃使用的手推車再次發(fā)生碰撞后倒地不起，隨后死亡。查看監(jiān)控發(fā)現(xiàn)，該小羊駝在8點(diǎn)左右出現(xiàn)異常的狀況，主要為多次跪臥于地，不愿站立，精神沉郁。在此之前未發(fā)現(xiàn)該小羊駝精神狀態(tài)有異常，飲欲食欲均正常。

2 病理剖檢

死亡小羊駝被毛凌亂，尸僵不完全，腹股溝處皮膚有少量皮屑。胸腔內(nèi)有纖維素性膜黏附于臟器表面，有淡黃色積液約80 mL；左肺呈暗紅色，肺葉腫脹，呈肝變樣，切開可見大量壞死灶、化膿灶，右肺有一糜爛處，指壓即破，肺臟邊緣有氣腫；心臟表面有少量出血點(diǎn)；肝臟邊緣部分充血、鈍圓；脾臟表面泛白，質(zhì)地大小正常，其他臟器眼觀未見異常。

3 病理組織學(xué)檢查

3.1 石蠟切片制作 取死亡小羊駝的肺臟、心臟、肝臟、脾臟、腎臟組織塊(1×1×0.5 cm)置于10%甲醛溶液中固定24 h。流水沖洗20 min后放于不同濃度的乙醇中，自低濃度乙醇向高濃度乙醇進(jìn)行脫水。二甲苯透明后放入58 ℃石蠟中包埋成石蠟塊，完全冷卻后切片。撈片法選取石蠟片，使用蘇木精伊紅染液染色，再次使用梯度乙醇脫水、二甲苯透明后封固。

3.2 鏡檢結(jié)果 肺泡腔內(nèi)可見交織成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的纖維素性滲出物及大量紅細(xì)胞、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，部分肺泡擴(kuò)張，肺泡間隔變薄、斷裂(見封三彩版圖1)，腫脹部位的肺泡腔融合成為較大囊腔(見封三彩版圖2)；心肌纖維間有少量紅細(xì)胞，少量心肌纖維斷裂，間隔變寬，排列紊亂(見封三彩版圖3)；肝細(xì)胞部分水腫，呈氣球樣變(見封三彩版圖4)；腎組織間有少量紅細(xì)胞浸潤(rùn)，腎小球水腫(見封三彩版圖5)；脾組織中可見少量炎性細(xì)胞，紅、白髓界線不清(見封三彩版圖6)。

圖1 小羊駝肺臟 (H.E.染色,400×)→： 滲出纖維素

圖2 小羊駝肺氣腫肺臟 (H.E.染色,400×)→： 肺泡間隔斷裂

圖3 小羊駝心臟 (H.E.染色,400×)→： 心肌間紅細(xì)胞

圖4 小羊駝肝臟 (H.E.染色,400×)→： 肝細(xì)胞水腫

圖5 小羊駝腎臟 (H.E.染色,400×)→： 腎小球水腫

圖6 小羊駝脾臟 (H.E.染色,400×)→： 炎性細(xì)胞浸潤(rùn)

4 實(shí)驗(yàn)室檢查

4.1 細(xì)菌分離培養(yǎng) 取小羊駝肺臟，無菌條件下用接種環(huán)劃線接種于血瓊脂平板上，37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h。病原菌在血瓊脂培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，可見淡灰白色、水滴狀小菌落。

4.2 細(xì)菌涂片鏡檢 挑取單個(gè)菌落，涂布于滴加生理鹽水的載玻片上，干燥、固定后使用革蘭染液染色。100×油鏡下可見病原菌為中央微凸，兩端鈍圓的球桿狀，革蘭染色陰性，呈兩極濃染。

4.3 生化試驗(yàn) 挑取單個(gè)菌落，用無菌生理鹽水稀釋制成菌懸液，將菌懸液接種于細(xì)菌生化鑒定微量發(fā)酵管(添加25 μL牛血清)[3]，37 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 h。該菌能夠發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、果糖、甘露醇、尿素，M.R.試驗(yàn)、V-P試驗(yàn)陰性，可形成靛基質(zhì)。

5 診斷

根據(jù)病理剖檢結(jié)果及實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果，該小羊駝診斷為巴氏桿菌引起的纖維素性化膿性肺炎。

6 討論

6.1 從剖檢結(jié)果判斷，該小羊駝死因?yàn)槔w維素性化膿性肺炎，生前所受到的撞擊僅是一次應(yīng)激，并不是導(dǎo)致小羊駝臥地不起后死亡的主要原因。小羊駝生前患有疥螨感染的皮膚病，長(zhǎng)期肌肉注射伊維菌素治療，腹股溝處皮屑為疥螨感染所致。盡管治療過程中使用的伊維菌素為安全劑量，保證了安全的注射時(shí)間間隔，但是不能排除伊維菌素的毒性作用也是使小羊駝纖維素性化膿性肺炎病程發(fā)展加快的原因，目前已有文獻(xiàn)報(bào)道伊維菌素使大熊貓[4]、東北虎[5]、水貂[6]等野生動(dòng)物中毒。另1只小羊駝受撞擊后精神狀態(tài)良好，食欲正常，無不適表現(xiàn)，可見撞擊力度不大，不會(huì)導(dǎo)致小羊駝受傷、死亡。

6.2 小羊駝對(duì)疾病的耐受度很強(qiáng)，發(fā)病時(shí)往往不表現(xiàn)出明顯的臨床癥狀，當(dāng)出現(xiàn)精神沉郁、食欲不振等表現(xiàn)時(shí)，常為病程末期，此時(shí)治療難度大，治愈率低，死亡率高。在飼養(yǎng)過程中要注重動(dòng)物行為的觀察，發(fā)現(xiàn)異常應(yīng)及時(shí)上報(bào)獸醫(yī)，盡早治療。

6.3 巴氏桿菌為條件致病菌，在健康動(dòng)物的消化道、呼吸道內(nèi)都有存在。當(dāng)季節(jié)交替、氣溫變化明顯時(shí)，或動(dòng)物受到運(yùn)輸?shù)葢?yīng)激時(shí)，動(dòng)物機(jī)體抵抗力降低，此動(dòng)物會(huì)受到內(nèi)源性感染；污染的水、器皿、飼料、空氣等也會(huì)引起外源性感染，兩者都可引發(fā)全身性感染[7]，若動(dòng)物未能得到及時(shí)的救治，往往會(huì)造成死亡。根據(jù)該小羊駝的病理學(xué)檢查可見，病變部位除肺臟外，其他臟器也存在不同程度的病變，表明巴氏桿菌引起的纖維素性化膿性肺炎不僅局限于肺臟，隨病程發(fā)展也會(huì)造成全身感染。