劉榮珍，李彩娟，王永玲，凌去非

（蘇州大學基礎(chǔ)醫(yī)學與生物科學學院，江蘇 蘇州 215123）

白梭吻鱸（Sander lucioperca）屬于鱸形目（Pericformes）、鱸科（Percidae）、梭吻鱸屬（Sander）[1]，是一種品質(zhì)優(yōu)良的經(jīng)濟淡水魚類，具有抗病性強、適溫度范圍廣、生長速度快、味道鮮美、無肌間刺等優(yōu)良特征[2]。白梭吻鱸營養(yǎng)價值高，含有豐富的氨基酸、多不飽和脂肪酸等營養(yǎng)物質(zhì)，其粗蛋白含量約占肌肉量20%，17 種氨基酸總含量占19.4%，必須氨基酸總量占總氨基酸含量（36.48%）高于河鱸（36.23%）[3]，其中 5 種鮮味氨基酸含量為9.31%，高于鱖、黃顙魚等[4]，有“淡水魚王”之稱。

與其他魚類一樣，白梭吻鱸在儲運和銷售過程中極易遭受微生物和內(nèi)源酶的影響而導(dǎo)致品質(zhì)降低甚至腐敗變質(zhì)。近年來，冷藏保存在生鮮魚類的儲藏中具有較為廣泛的運用，但其保質(zhì)期較短，隨著儲藏時間的延長魚體肌肉仍會發(fā)生一些變化，如脂肪酸氧化、蛋白質(zhì)降解等，所以需要通過檢測相關(guān)生物化學指標來判定其品質(zhì)變化情況，保證其在安全期內(nèi)被食用。

目前，對白梭吻鱸的研究主要集中于養(yǎng)殖、繁殖等方面[5-7]，尚未見對其儲藏和保鮮方面的報道。本試驗通過分析4 ℃冷藏條件下白梭吻鱸的感官指標、硫代巴比妥酸值（thiobarbituric acid，TBA）、可揮發(fā)性鹽基氮值（total volatile basic-nitrogen，TVB-N）、pH 值和菌落總數(shù)（total viable count，TVC）變化，探究白梭吻鱸低溫儲藏期間鮮度品質(zhì)的變化規(guī)律，以期為白梭吻鱸的儲運、銷售提供理論支持和實踐指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

白梭吻鱸：蘇州沙家浜東湖現(xiàn)代漁業(yè)發(fā)展有限公司，共3 尾（均重1.3 kg），用雙層塑料袋充氧運至實驗室。

氧化鎂、硼酸、鹽酸、甲基紅指示劑、溴酚藍指示劑、95%乙醇、氯化鈉、胰蛋白胴、酵母浸膏、葡萄糖、瓊脂、三氯乙酸、2-硫代巴比妥酸、三氯甲烷等（均為分析純）：國藥集團化學試劑有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

SC310 pH 計：上海儀電科學儀器股份有限公司；AR224CN 電子分析天平：奧豪斯儀器（上海）有限公司；SD-18 攪肉機：九陽股份有限公司；UV-1000 分光光度計：翱藝儀器（上海）有限公司；MM-2 震蕩儀：上海旌派儀器有限公司；KN520 凱氏定氮儀：阿爾瓦儀器有限公司；DK-S24 電熱恒溫水浴鍋：上海精宏實驗設(shè)備有限公司；LS-B50L 高壓蒸汽滅菌鍋：上海華線醫(yī)用核子儀器有限公司；DHP-420 恒溫培養(yǎng)箱：上?？坪銓崢I(yè)發(fā)展有限公司；SW-CJ-2FD 超凈工作臺：上海博迅醫(yī)療生物儀器股份有限公司；BCD-186KB 冰箱：青島海爾股份有限公司。

1.3 試驗方法

1.3.1 樣品的處理

剛運至實驗室的鮮活白梭吻鱸，致死后去鱗、去內(nèi)臟，取魚體中部脊背兩側(cè)肌肉切塊（每小塊大小約2 cm×2 cm×2 cm），將魚塊和魚頭用蒸餾水洗凈，魚頭和魚塊分裝于自封袋中（約80 g/袋），封口，置于4 ℃冰箱中儲藏。每3 d 進行一次取樣并檢測相關(guān)指標。

1.3.2 感官評價

根據(jù)質(zhì)量指標法（quality index method，QIM），參照Nodali[8]、李學鵬等[9]的方法建立感官指標評價表。選取16 名從事水產(chǎn)行業(yè)感官評價員，根據(jù)白梭吻鱸QIM 評價標準表，見表1。

表1 白梭吻鱸QIM評價標準表Table 1 Criteria of quality index method for evaluating Sander lucioperca

續(xù)表1 白梭吻鱸QIM評價標準表Continue table 1 Criteria of quality index method for evaluating Sander lucioperca

分別對冷藏 0、3、6、9、12、15 d 的白梭吻鱸頭部和樣品進行評價，記錄各個指標得分，各指標得分的總和即為當天 QI 值，QI 分值為 0～14。

1.3.3 pH 值測定

將魚肉攪碎，準確稱取10.0 g 攪碎的魚肉，加入90.0 mL 蒸餾水，攪拌使其混合均勻，浸漬大約30 min，期間不時振蕩。把已調(diào)試好的pH 計插入樣液，測定其pH 值[10]。每組測量 3 次。

1.3.4 TBA 值的測定

稱取10.0 g 攪碎的魚肉，加入50 mL 7.5%的三氯乙酸（含0.1%EDTA），攪拌使其混合均勻，置于振蕩儀上振蕩30 min。用雙層濾紙過濾，過濾完成后取濾液5 mL，再加入 5 mL 0.02 mol/L 的 TBA 溶液，放于沸水（90 ℃）中水浴40 min，取出后冷卻1 h 至室溫，加入5 mL 三氯甲烷搖勻，分層后用紫外分光光度計分別測上層液體在532 nm 和600 nm 波長下的吸光值，記錄數(shù)據(jù)。根據(jù)下列公式進行TBA 的計算：TBA（mg/100 g）=（A532-A600）/155×（1/10）×72.6×100[11-12]。

1.3.5 可揮發(fā)性鹽基氮的測定

按照GB 5099.228-2016《食品安全國家標準食品中揮發(fā)性鹽基氮的測定》進行。

1.3.6 菌落總數(shù)的測定

菌落總數(shù)根據(jù)GB/T 4789.2-2016《食品安全國家標準食品微生物學檢驗》進行測定。

1.3.7 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS21 中的Pearson 相關(guān)性分析進行相關(guān)性檢驗，差異性顯著水平P＜0.05，使用Microsoft office 2016 進行數(shù)據(jù)處理和繪圖，所有試驗重復(fù)3 次。

2 試驗結(jié)果

2.1 感官指標

冷藏過程中白梭吻鱸QI 分值隨時間的變化見圖1。

圖1 冷藏過程中白梭吻鱸QI分值隨時間的變化Fig.1 Changes of QI scores of Sander lucioperca during refrigerated storage over time

由圖1可見，白梭吻鱸的QI 分值隨著儲藏時間的延長呈逐漸上升的趨勢,QI 值與冷藏時間呈現(xiàn)較強的線性關(guān)系（R2=0.993 4）。在儲藏期第6天時QI 分值達到6.5，此時白梭吻鱸已經(jīng)開始出現(xiàn)異味，色澤比較暗淡，眼球無凸起。冷藏期第9天時產(chǎn)生強烈腐敗氣味，色澤暗沉，黏液渾濁，不具有食用性。并且在第12天時其QI 分值為12.1 分，接近最高分14 分，表明儲藏期第12天時魚樣已經(jīng)發(fā)生了嚴重的腐敗變質(zhì)。

2.2 硫代巴比妥酸值（TBA）

冷藏時間對白梭吻鱸的硫代巴比妥酸值的影響見圖2。

圖2 冷藏過程中白梭吻鱸TBA值隨時間的變化Fig.2 Changes of TBA values of Sander lucioperca during refrigerated storage over time

由圖2可見，隨著冷藏時間的增長白梭吻鱸的硫代巴比妥酸值呈不斷增加的趨勢，TBA 值由初始的0.098 mg/100 g 上升至第9天時為 0.641 mg/100 g，至儲藏期結(jié)束（15 d）時 TBA 值已達 1.11 mg/100 g，超出1.0 mg/100 g，魚體肌肉變質(zhì)。

2.3 揮發(fā)性鹽基氮值（TVB-N）

冷藏過程中白梭吻鱸TVB-N 值隨時間變化見圖3。

圖3 冷藏過程中白梭吻鱸TVB-N值隨時間變化Fig.3 Changes in TVB-N values of Sander lucioperca during refrigerated storage over time

由圖3可見，白梭吻鱸在4 ℃冷藏條件下TVB-N 值隨冷藏時間不斷上升，TVB-N 值由第0天的11.9mg/100 g增加到第9天的19.6 mg/100 g，冷藏期結(jié)束時TVB-N 值為 33.6 mg/100 g。第9天時 TVB-N 值為 19.6 mg/100 g，接近GB2733-2015《食品安全國家標準鮮、凍動物性水產(chǎn)品》規(guī)定的極限值20 mg/100 g，已有明顯的不良氣味產(chǎn)生，白梭吻鱸肌肉已不可食用。

2.4 pH值

白梭吻鱸冷藏期內(nèi)的pH 值變動情況如圖4所示。

圖4 冷藏過程中白梭吻鱸pH值隨時間的變化Fig.4 Changes of pH value of Sander lucioperca during refrigerated storage over time

由圖4可見，樣品pH 值變現(xiàn)為先降低后回升的趨勢，在儲藏期1 d～9 d pH 值由6.63 下降至6.18，隨后逐漸上升，儲藏末期即第15天時為6.79 并接近中性，呈現(xiàn)“V”字型變化。

2.5 菌落總數(shù)（TVC）

白梭吻鱸4 ℃貯藏期間菌落總數(shù)隨冷藏時間的變化情況見圖5。

由圖5可見，白梭吻鱸的菌落總數(shù)0 d 時為3.56 lgCFU/g 隨著冷藏時間增加，白梭吻鱸菌落總數(shù)始終呈不斷上升趨勢（P＜0.05），到儲藏期第12天時TVC 值為 5.78 lgCFU/g，儲藏期末期（第15天時）為7.29 lg CFU/g，其數(shù)值已超過限量值。

圖5 白梭吻鱸4℃冷藏期間TVC變化Fig.5 Changes of TVC of Sander lucioperca during refrigeration at 4 ℃

3 小結(jié)與討論

白梭吻鱸的各項理化指標和微生物隨儲藏時間的延長呈現(xiàn)規(guī)律性的變化趨勢。在白梭吻鱸冷藏（4 ℃）過程中，pH 值呈現(xiàn)先下降后回升的“V”字型變化規(guī)律；QI 分值、TBA 值、TVB-N 值和 TVC 值呈持續(xù)上升趨勢。由于微生物和酶類的作用，魚體死后仍在發(fā)生一系列生物和化學變化，進而使魚體出現(xiàn)視覺和嗅覺的變化。質(zhì)量指標（QIM）法采用缺陷評分的方法對魚的感官評性狀進行打分，可以作為反映魚類品質(zhì)變化的一種評價方法[13-14]。

TBA 值常作為反映脂肪酸被氧化程度的指標[15]。白梭吻鱸4 ℃儲藏過程中的TBA 值呈不斷升高趨勢，與高白鮭[16]、草魚魚片[17]4 ℃儲藏條件下TBA 值的變化趨勢基本相似。表明隨著冷藏時間延長，白梭吻鱸肌肉中的不飽和脂肪酸不斷被氧化，魚肉的營養(yǎng)價值和食用品質(zhì)逐漸下降。

TVB-N 值可作為判定水產(chǎn)品和新鮮程度的指標[18]。本研究表明白梭吻鱸冷藏期間其TVB-N 呈增加趨勢，這與高白鮭[19]和南美白對蝦[20]儲藏期間TVB-N 值的變化情況基本一致，這是由于水產(chǎn)動物蛋白質(zhì)在微生物和酶的作用下分解產(chǎn)生胺類物質(zhì)。在第9天時TVB-N 接近GB2733-2015《食品安全國家標準鮮、凍動物性水產(chǎn)品》中淡水魚的極限值20 mg/100 g，魚體腐敗變質(zhì)不可食用。

pH 值的變化嚴重影響著魚類肌肉的品質(zhì)變化。白梭吻鱸冷藏過程中，pH 值呈現(xiàn)先下降后回升的變化趨勢，與低溫儲藏條件下泥鰍[21]的pH 值變化趨勢一致，可能是由于白梭吻鱸死后糖原在相關(guān)酶的作用下轉(zhuǎn)化為乳酸，同時三磷酸腺苷（adenosine triphosphate，ATP）分解產(chǎn)生磷酸等，乳酸和磷酸的累積導(dǎo)致酸堿度降低，在儲存期的中后期，蛋白質(zhì)被分解產(chǎn)生氨類等堿性物質(zhì)導(dǎo)致酸堿度回升并不斷接近甚至大于開始階段的 pH 值[22]。

微生物是白梭吻鱸肌肉品質(zhì)變化的主要原因。TVC 隨儲藏時間延長而不斷上升，前期增長緩慢，后期增速變快，與鮰魚[23]冰藏貯存過程中的TVC 變化趨勢一致，這可能由于前期低溫冷藏對微生物有一定抑制作用，后期魚體腐敗變質(zhì)加速了細菌繁殖，同時低溫條件對嗜冷菌的選擇作用使嗜冷菌成為優(yōu)勢菌群且數(shù)量不斷增加，微生物數(shù)量累積增多。TVC 初始值為 3.56 lgCFU/g，第6天時為 4.28 lgCFU/g，15 d 時TVC 含量上升至7.29 lgCFU/g，遠遠超過可食用上限（6.0 lgCFU/g）[24-25]，魚肉嚴重腐敗變質(zhì)。有研究表明冷藏條件下鯽魚[26]初始菌落總數(shù)為3.78 lgCFU/g，冷藏到第6天時上升至4.57 lgCFU/g，第10天時菌落總數(shù)達7.42 lgCFU/g，與本試驗數(shù)據(jù)變化情況相似。

總之，感官指標顯示4 ℃條件下白梭吻鱸的貨架期大約為6 d。TVB-N 值表明其貨架期為約9 d，菌落總數(shù)在儲藏期12 d 時仍然在限定標準范圍內(nèi)，15 d 時超過限定標準。綜合感官評價QI 分值、TBA 值、TVBN 值、TVC 值，初步判定白梭吻鱸4 ℃條件下的貨架期大約為6 d。