楊一平,林蔚紅,戴建忠,張 芬,錢(qián)秋杰,孫海燕,陳偉國(guó)
(浙江省海寧市蠶桑技術(shù)服務(wù)站,浙江 海寧 314400)
桑螟是桑園主要害蟲(chóng)之一,秋季第4、5代易暴發(fā)成災(zāi),常導(dǎo)致桑園片葉不存,嚴(yán)重影響秋蠶飼養(yǎng)[1]。因高齡桑螟幼蟲(chóng)潛伏隱蔽的特點(diǎn),農(nóng)藥防治要求在低齡期進(jìn)行,而秋季采葉養(yǎng)蠶間隔時(shí)間短,可選的適用農(nóng)藥品種極少,再加上從2017年開(kāi)始,桑園主要?dú)⑾x(chóng)劑“滅多威”列入限制使用農(nóng)藥名錄[2,3],對(duì)秋季桑螟防治非常不利,生產(chǎn)上急需新的適用農(nóng)藥品種。
蟲(chóng)螨腈(Chlorfenapyr)又名溴蟲(chóng)腈,是美國(guó)氰胺公司于20世紀(jì)80年代后期研制開(kāi)發(fā)的芳基吡咯類(lèi)殺蟲(chóng)殺螨劑。該藥主要通過(guò)氧化磷酸化的解偶聯(lián)作用阻礙昆蟲(chóng)呼吸,使昆蟲(chóng)不能產(chǎn)生能量而導(dǎo)致軀體癱瘓,從而無(wú)法進(jìn)行正常的生理活動(dòng)而死亡[4,5]。蟲(chóng)螨腈對(duì)家蠶和桑園害蟲(chóng)間存在一定的選擇毒性,對(duì)非靶標(biāo)生物家蠶的毒性較低[6],因而成為近年來(lái)桑園害蟲(chóng)防治農(nóng)藥的主要篩選試驗(yàn)對(duì)象。為進(jìn)一步明確蟲(chóng)螨腈防治桑螟的藥效以及對(duì)養(yǎng)蠶生產(chǎn)的安全性,我們于2018年秋季進(jìn)行了24%蟲(chóng)螨腈懸浮劑應(yīng)用試驗(yàn)。
1.1.1 供試農(nóng)藥
240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑(江蘇生久農(nóng)化有限公司生產(chǎn)),40%辛硫磷乳油(江蘇寶靈化工股份有限公司生產(chǎn)),77.5%敵敵畏乳油(南通江山農(nóng)藥化工股份有限公司生產(chǎn))。
1.1.2 供試桑園
海寧市蠶桑站試驗(yàn)桑園,8年生“農(nóng)桑14號(hào)”,中低桿養(yǎng)成,每667 m2桑園栽1000株。
1.1.3 家蠶品種
一代雜交種為“白玉×秋豐”,浙江省海寧市新興蠶種制造有限公司生產(chǎn)。
1.2.1 處理設(shè)置
設(shè)240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑750倍(320 mg/L)、1500倍(160 mg/L)2個(gè)稀釋濃度處理,77.5%敵敵畏乳油750倍+40%辛硫磷乳油1500倍(以下簡(jiǎn)稱(chēng)“敵辛混劑”)為農(nóng)藥對(duì)照,噴清水為空白對(duì)照,共4個(gè)處理,處理間設(shè)2行桑樹(shù)保護(hù)。
1.2.2 噴藥方法
采用大紅葉3WBD-16HBA電動(dòng)噴霧器,以桑葉正反面均勻噴濕為度,農(nóng)藥處理和清水對(duì)照區(qū)噴水量一致。
1.2.3 調(diào)查方法
在噴藥前和噴藥后2 d、4 d、8 d、12 d調(diào)查,分別調(diào)查記載低齡(1~3齡)和高齡(4~5)桑螟蟲(chóng)量,重復(fù)3次,計(jì)算各農(nóng)藥處理重復(fù)小區(qū)的蟲(chóng)口減退率及校正防效。
1.3.1 蟲(chóng)螨腈對(duì)家蠶的室內(nèi)毒性測(cè)定
在預(yù)備試驗(yàn)基礎(chǔ)上,將240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑稀釋成7~9個(gè)梯度濃度,取適熟桑葉分別浸入不同濃度的藥液中1 min,取出后自然晾干,置于保鮮盒內(nèi),然后給入20頭3齡起蠶,在溫度26.5℃±1℃、相對(duì)濕度75%~85%的恒溫室內(nèi)飼喂藥葉,添毒時(shí)間分24 h、48 h和72 h,然后改用新鮮無(wú)毒桑葉繼續(xù)飼養(yǎng)至4齡餉食,每天調(diào)查家蠶幼蟲(chóng)中毒死亡數(shù),以清水處理為空白對(duì)照,重復(fù)3次。
1.3.2 蟲(chóng)螨腈在桑葉上的殘留毒性試驗(yàn)
殘毒試驗(yàn)以農(nóng)藥處理和采葉養(yǎng)蠶間隔時(shí)間為雙向處理組合。農(nóng)藥處理為240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L、160 mg/L,“敵辛混劑”為農(nóng)藥對(duì)照,清水為空白對(duì)照,共4個(gè)處理。采葉養(yǎng)蠶間隔時(shí)間設(shè)噴藥后1 d、2 d、3 d、4 d、5 d、7 d,各處理小區(qū)30頭蠶供試,重復(fù)3次。供試家蠶1~2齡期常規(guī)飼養(yǎng),3齡起蠶開(kāi)始分別飼喂不同處理的桑葉,連續(xù)1個(gè)齡期,逐日調(diào)查記載各處理死亡蠶頭數(shù);其中噴藥后3 d、5 d、7 d處理區(qū)繼續(xù)飼養(yǎng)到上蔟結(jié)繭,調(diào)查各小區(qū)繭質(zhì)成績(jī)。
蟲(chóng)口減退率和校正防效計(jì)算公式如下:蟲(chóng)口減退率(%)=(1-殘存蟲(chóng)口量/施藥前蟲(chóng)口量)×100%;校正防效(%)=(處理組蟲(chóng)口減退率-對(duì)照組蟲(chóng)口減退率)/(100-對(duì)照組蟲(chóng)口減退率)×100%。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用DPS(15.10版)數(shù)據(jù)處理軟件統(tǒng)計(jì)[7],以Duncan新復(fù)極差測(cè)驗(yàn)法進(jìn)行多重比較,檢測(cè)田間藥劑試驗(yàn)校正防效的差異顯著性;對(duì)藥液質(zhì)量濃度對(duì)數(shù)與幼蟲(chóng)死亡率概率值進(jìn)行線(xiàn)性回歸分析,求出致死中濃度(LC50)和95%置信限。
從表1可以看出,噴藥后2 d,240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L對(duì)1~3齡桑螟的防效最高,“敵辛混劑”略低,240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑160 mg/L最低,3個(gè)處理校正防效均在70%以上,處理間差異不顯著。噴藥后4 d,3個(gè)處理校正防效均提高到80%以上,240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L校正防效達(dá)到94.47%,處理間差異也不顯著,表明240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑藥效作用較慢。噴藥后8 d和12 d,240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L的校正防效顯著高于240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑160 mg/L,兩者均極顯著高于“敵辛混劑”。“敵辛混劑”的校正防效持續(xù)下降,表明240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑的藥效期明顯長(zhǎng)于“敵辛混劑”。
從表2可見(jiàn),噴藥后2 d,對(duì)4~5齡桑螟的校正防效,240g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L顯著高于240g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑160 mg/L,兩者均極顯著高于“敵辛混劑”。噴藥后4 d,240g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L極顯著高于240g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑160 mg/L,兩者均極顯著高于“敵辛混劑”。噴藥后2 d、4 d、8 d和12 d,3個(gè)處理校正防效均持續(xù)增高,其中噴藥后2~4 d的增幅最大,且噴藥后8 d和12 d的防效高于表1中1~3齡桑螟的同期防效,這是因?yàn)槌怂巹?duì)4~5齡桑螟的直接作用外,對(duì)1~3齡桑螟的防效在后期疊加到對(duì)4~5齡桑螟的防效上所致。由此可見(jiàn),在桑螟低齡期防治十分關(guān)鍵。
從表3可見(jiàn)藥劑處理對(duì)全齡桑螟的防效趨勢(shì),240g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L和160 mg/L的校正防效從噴藥后2 d到12 d均呈現(xiàn)持續(xù)增高,“敵辛混劑”從噴藥后4 d到12 d則持續(xù)下降,表明240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑的藥效期明顯長(zhǎng)于“敵辛混劑”。
2.2.1 240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑對(duì)家蠶的食下毒性
240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑對(duì)3齡起蠶的食下毒性隨著連續(xù)添毒時(shí)間的延長(zhǎng)而增強(qiáng),見(jiàn)表4。3齡起蠶添毒24 h的LC50>3750 mg/L(即240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑稀釋64倍),連續(xù)添毒48 h的LC50為1858.2552 mg/L(即240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑稀釋129倍),連續(xù)添毒72 h的LC50為1207.4615 mg/L(即240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑稀釋99倍)。添毒后24 h內(nèi)一般僅少量中毒死亡蠶,2~3 d后是死亡高峰,可見(jiàn)240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑對(duì)家蠶的食下毒性較低,藥效作用較慢,隨時(shí)間延長(zhǎng)而表現(xiàn)出累積效應(yīng)。
參照2014年發(fā)布的《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則第11部分:家蠶急性毒性試驗(yàn)》附錄A“農(nóng)藥對(duì)家蠶的毒性等級(jí)劃分”[8],240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑對(duì)家蠶的毒性等級(jí)為低毒(LC50>200 mg/L)。
2.2.2 240g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑在桑葉上的殘留毒性
由于240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑在桑葉上的殘留毒性試驗(yàn)濃度為320 mg/L和160 mg/L,遠(yuǎn)低于食下毒性測(cè)定的LC50值,因此上述濃度藥液噴灑桑葉后飼喂3齡起蠶不表現(xiàn)中毒癥狀和死亡蠶。農(nóng)藥對(duì)照處理“敵辛混劑”噴藥后1 d采葉飼喂3齡蠶,死亡率100%,間隔2 d的死亡率為91.11%,間隔3 d后采葉飼喂3齡蠶無(wú)中毒癥狀和死亡蠶(表5)。
表1 240g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑對(duì)桑螟1~3齡幼蟲(chóng)的防效Table 1 Effect of 240 g/l Chlorfenapyr Suspension Agent on Controlling 1st~3rd Instar Larvae of Phalidid Caterpillar
表2 240g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑對(duì)桑螟4~5齡幼蟲(chóng)的防效Table 2 Effect of 240 g/l Chlorfenapyr Suspension Agent on Controlling 4th~5th Instar Larvae oOf Phalidid Caterpillar
表3 240g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑對(duì)桑螟全齡幼蟲(chóng)的防效Table 3 Effect of 240 g/l Chlorfenapyr Suspension Agent on Controlling All Larval Duration of Phalidid Caterpillar
2.2.3 240g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑處理桑葉的飼養(yǎng)成績(jī)
噴藥后3 d、5 d、7 d處理區(qū)飼養(yǎng)至上蔟結(jié)繭,養(yǎng)蠶成績(jī)見(jiàn)表6。3齡起蠶結(jié)繭率,240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L、160 mg/L不同間隔時(shí)間處理組合與清水對(duì)照差異均不顯著,與“敵辛混劑”噴藥后3 d、5 d的差異亦不顯著,但“敵辛混劑”噴藥后7 d的結(jié)繭率最低,可能因試驗(yàn)誤差所致。各處理組合的好蛹率指標(biāo)都很高,處理間差異不顯著,表明供試農(nóng)藥對(duì)化蛹無(wú)不良影響。各處理組合的粒繭重差異不顯著,但總體來(lái)說(shuō)數(shù)值偏小,主要是因?yàn)樵囼?yàn)在晚秋蠶期進(jìn)行,桑葉老化、硬化導(dǎo)致蠶體小,繭形小。繭層率指標(biāo),240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑160 mg/L噴藥后7 d最高,極顯著高于240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L噴藥后3 d和240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑160 mg/L噴藥后3 d,顯著高于240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L噴藥后5 d和240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑160 mg/L噴藥后5 d,與240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L噴藥后7 d差異不顯著;240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L和160 mg/L噴藥后7 d的繭層率與清水對(duì)照差異不顯著,噴藥后5 d和3 d的繭層率顯著低于清水對(duì)照??梢?jiàn)240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑處理的桑葉連續(xù)飼蠶對(duì)繭層率有一定影響,從養(yǎng)蠶經(jīng)濟(jì)性狀指標(biāo)看,240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L和160 mg/L噴霧處理的桑葉應(yīng)當(dāng)在噴藥7 d后采葉養(yǎng)蠶。
試驗(yàn)結(jié)果表明,240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑對(duì)桑螟1~3齡幼蟲(chóng)的防效優(yōu)于對(duì)4~5齡幼蟲(chóng)的防效,應(yīng)掌握在桑螟低齡期噴藥防治;240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L的防效顯著優(yōu)于160 mg/L,以及對(duì)照農(nóng)藥“敵辛混劑”,生產(chǎn)中可與對(duì)照農(nóng)藥交替使用;在桑螟常規(guī)蟲(chóng)量防治時(shí)可用240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑160 mg/L,蟲(chóng)量多或蟲(chóng)齡高時(shí)以320 mg/L為宜。蟲(chóng)螨腈藥效作用較慢,對(duì)桑螟的防效在噴藥后3~4 d時(shí)最高,須注意不能為了追求速效性而盲目提高使用濃度,與藥效快的農(nóng)藥混配使用,則可兼顧速效性和持效,馮世民、朱浩龍等[9~10]報(bào)道溴蟲(chóng)腈與辛硫磷混配對(duì)桑螟、桑尺蠖防效良好,但在混配比例方面有待進(jìn)一步優(yōu)化。
表4 240g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑對(duì)3齡起蠶的食下毒性Table 4 Food Toxicity of 240 g/l Chlorfenapyr Suspension Agent pn Newly Exuviated Silkworm Larvae at Third Instar
表5 240g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑噴藥后的桑葉對(duì)家蠶的殘毒期Table 5 Residual toxicity of 240 g/L Chlorfenapyr suspension agent on silkworm larvae
表6 240g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑對(duì)結(jié)繭率和繭質(zhì)的影響Table 6 Effects of 240 g/l Chlorfenapyr Suspension Agent on Cocooning Rate and Cocoon Quality
240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑對(duì)3齡起蠶的急性毒性為低毒,稀釋64倍(3750 mg/L)添毒24 h的死亡率低于50%;連續(xù)添毒48 h和72 h的LC50分別為1858.2552 mg/L、1207.4615 mg/L,即隨著連續(xù)添毒時(shí)間的延長(zhǎng)而毒性作用增強(qiáng),表明240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑對(duì)家蠶的食下毒性表現(xiàn)為藥效較慢且具有累積效應(yīng),添毒后24 h內(nèi)一般僅少量中毒死亡蠶,2~3 d后是死亡高峰。這與對(duì)桑螟防效最高的時(shí)間吻合。羅雁婕等[11]測(cè)定了溴蟲(chóng)腈對(duì)2齡起蠶的毒性,添食毒葉24 h內(nèi)沒(méi)有引起明顯的死亡,其LC50>5000 mg/L,添食毒葉96 h的對(duì)家蠶的LC50為119.715 mg/L,其毒性累積作用與本試驗(yàn)的趨勢(shì)相似。不同的試驗(yàn)方法會(huì)影響結(jié)果,對(duì)于毒性較低且藥效較慢的溴蟲(chóng)腈,如試驗(yàn)濃度范圍窄、調(diào)查時(shí)間短,其真實(shí)中毒結(jié)果尚未表現(xiàn)出來(lái)。這可能是溴蟲(chóng)腈對(duì)家蠶的毒性試驗(yàn)結(jié)果差異較大的主要原因[6,12~14]。
240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L和160 mg/L噴于桑樹(shù)后1 d開(kāi)始采葉,對(duì)3齡起蠶均無(wú)中毒癥狀和死亡現(xiàn)象,這與室內(nèi)急性食下毒性測(cè)定結(jié)果相符。在噴藥后3 d、5 d、7 d采葉飼喂3齡起蠶,直至上蔟結(jié)繭,調(diào)查養(yǎng)蠶成績(jī)表明,3齡起蠶結(jié)繭率、好蛹率、粒繭重與清水對(duì)照無(wú)顯著性差異,但繭層率在噴藥后間隔3 d和5 d均顯著低于清水對(duì)照。因此,240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L和160 mg/L噴藥的桑葉應(yīng)當(dāng)間隔7 d后采葉養(yǎng)蠶,避免影響蠶繭質(zhì)量。關(guān)于溴蟲(chóng)腈在桑葉上的殘毒期測(cè)定結(jié)果,以5~7 d的為多[12,15~16];謝道燕等[17]的試驗(yàn)結(jié)果為 11 d,而佘柳濤等[18]在不同季節(jié)測(cè)定殘毒期,夏季3~5 d,春季>7 d。由于蟲(chóng)螨腈在不同地區(qū)、不同季節(jié)噴施后,在桑葉上的殘毒期相差較大,生產(chǎn)上推廣應(yīng)用前應(yīng)經(jīng)過(guò)當(dāng)?shù)氐奶镩g試驗(yàn)。