楊一平，林蔚紅，戴建忠，張 芬，錢(qián)秋杰，孫海燕，陳偉國(guó)

（浙江省海寧市蠶桑技術(shù)服務(wù)站，浙江 海寧 314400）

桑螟是桑園主要害蟲(chóng)之一，秋季第4、5代易暴發(fā)成災(zāi)，常導(dǎo)致桑園片葉不存，嚴(yán)重影響秋蠶飼養(yǎng)［1］。因高齡桑螟幼蟲(chóng)潛伏隱蔽的特點(diǎn)，農(nóng)藥防治要求在低齡期進(jìn)行，而秋季采葉養(yǎng)蠶間隔時(shí)間短，可選的適用農(nóng)藥品種極少，再加上從2017年開(kāi)始，桑園主要?dú)⑾x(chóng)劑“滅多威”列入限制使用農(nóng)藥名錄［2，3］，對(duì)秋季桑螟防治非常不利，生產(chǎn)上急需新的適用農(nóng)藥品種。

蟲(chóng)螨腈（Chlorfenapyr）又名溴蟲(chóng)腈，是美國(guó)氰胺公司于20世紀(jì)80年代后期研制開(kāi)發(fā)的芳基吡咯類(lèi)殺蟲(chóng)殺螨劑。該藥主要通過(guò)氧化磷酸化的解偶聯(lián)作用阻礙昆蟲(chóng)呼吸，使昆蟲(chóng)不能產(chǎn)生能量而導(dǎo)致軀體癱瘓，從而無(wú)法進(jìn)行正常的生理活動(dòng)而死亡［4，5］。蟲(chóng)螨腈對(duì)家蠶和桑園害蟲(chóng)間存在一定的選擇毒性，對(duì)非靶標(biāo)生物家蠶的毒性較低［6］，因而成為近年來(lái)桑園害蟲(chóng)防治農(nóng)藥的主要篩選試驗(yàn)對(duì)象。為進(jìn)一步明確蟲(chóng)螨腈防治桑螟的藥效以及對(duì)養(yǎng)蠶生產(chǎn)的安全性，我們于2018年秋季進(jìn)行了24%蟲(chóng)螨腈懸浮劑應(yīng)用試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

1.1.1 供試農(nóng)藥

240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑（江蘇生久農(nóng)化有限公司生產(chǎn)），40%辛硫磷乳油（江蘇寶靈化工股份有限公司生產(chǎn)），77.5%敵敵畏乳油（南通江山農(nóng)藥化工股份有限公司生產(chǎn)）。

1.1.2 供試桑園

海寧市蠶桑站試驗(yàn)桑園，8年生“農(nóng)桑14號(hào)”，中低桿養(yǎng)成，每667 m2桑園栽1000株。

1.1.3 家蠶品種

一代雜交種為“白玉×秋豐”，浙江省海寧市新興蠶種制造有限公司生產(chǎn)。

1.2 對(duì)桑螟田間防效試驗(yàn)方法

1.2.1 處理設(shè)置

設(shè)240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑750倍（320 mg/L）、1500倍（160 mg/L）2個(gè)稀釋濃度處理，77.5%敵敵畏乳油750倍+40%辛硫磷乳油1500倍（以下簡(jiǎn)稱(chēng)“敵辛混劑”）為農(nóng)藥對(duì)照，噴清水為空白對(duì)照，共4個(gè)處理，處理間設(shè)2行桑樹(shù)保護(hù)。

1.2.2 噴藥方法

采用大紅葉3WBD-16HBA電動(dòng)噴霧器，以桑葉正反面均勻噴濕為度，農(nóng)藥處理和清水對(duì)照區(qū)噴水量一致。

1.2.3 調(diào)查方法

在噴藥前和噴藥后2 d、4 d、8 d、12 d調(diào)查，分別調(diào)查記載低齡（1～3齡）和高齡（4～5）桑螟蟲(chóng)量，重復(fù)3次，計(jì)算各農(nóng)藥處理重復(fù)小區(qū)的蟲(chóng)口減退率及校正防效。

1.3 對(duì)家蠶毒性試驗(yàn)方法

1.3.1 蟲(chóng)螨腈對(duì)家蠶的室內(nèi)毒性測(cè)定

在預(yù)備試驗(yàn)基礎(chǔ)上，將240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑稀釋成7～9個(gè)梯度濃度，取適熟桑葉分別浸入不同濃度的藥液中1 min，取出后自然晾干，置于保鮮盒內(nèi)，然后給入20頭3齡起蠶，在溫度26.5℃±1℃、相對(duì)濕度75%～85%的恒溫室內(nèi)飼喂藥葉，添毒時(shí)間分24 h、48 h和72 h，然后改用新鮮無(wú)毒桑葉繼續(xù)飼養(yǎng)至4齡餉食，每天調(diào)查家蠶幼蟲(chóng)中毒死亡數(shù)，以清水處理為空白對(duì)照，重復(fù)3次。

1.3.2 蟲(chóng)螨腈在桑葉上的殘留毒性試驗(yàn)

殘毒試驗(yàn)以農(nóng)藥處理和采葉養(yǎng)蠶間隔時(shí)間為雙向處理組合。農(nóng)藥處理為240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L、160 mg/L，“敵辛混劑”為農(nóng)藥對(duì)照，清水為空白對(duì)照，共4個(gè)處理。采葉養(yǎng)蠶間隔時(shí)間設(shè)噴藥后1 d、2 d、3 d、4 d、5 d、7 d，各處理小區(qū)30頭蠶供試，重復(fù)3次。供試家蠶1～2齡期常規(guī)飼養(yǎng)，3齡起蠶開(kāi)始分別飼喂不同處理的桑葉，連續(xù)1個(gè)齡期，逐日調(diào)查記載各處理死亡蠶頭數(shù)；其中噴藥后3 d、5 d、7 d處理區(qū)繼續(xù)飼養(yǎng)到上蔟結(jié)繭，調(diào)查各小區(qū)繭質(zhì)成績(jī)。

1.4 數(shù)據(jù)處理

蟲(chóng)口減退率和校正防效計(jì)算公式如下：蟲(chóng)口減退率（%）=（1-殘存蟲(chóng)口量/施藥前蟲(chóng)口量）×100%；校正防效（%）=（處理組蟲(chóng)口減退率-對(duì)照組蟲(chóng)口減退率）/（100-對(duì)照組蟲(chóng)口減退率）×100%。

試驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用DPS（15.10版）數(shù)據(jù)處理軟件統(tǒng)計(jì)［7］，以Duncan新復(fù)極差測(cè)驗(yàn)法進(jìn)行多重比較，檢測(cè)田間藥劑試驗(yàn)校正防效的差異顯著性；對(duì)藥液質(zhì)量濃度對(duì)數(shù)與幼蟲(chóng)死亡率概率值進(jìn)行線(xiàn)性回歸分析，求出致死中濃度（LC50）和95%置信限。

2 結(jié)果與分析

2.1 田間防效

從表1可以看出，噴藥后2 d，240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L對(duì)1～3齡桑螟的防效最高，“敵辛混劑”略低，240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑160 mg/L最低，3個(gè)處理校正防效均在70%以上，處理間差異不顯著。噴藥后4 d，3個(gè)處理校正防效均提高到80%以上，240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L校正防效達(dá)到94.47%，處理間差異也不顯著，表明240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑藥效作用較慢。噴藥后8 d和12 d，240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L的校正防效顯著高于240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑160 mg/L，兩者均極顯著高于“敵辛混劑”。“敵辛混劑”的校正防效持續(xù)下降，表明240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑的藥效期明顯長(zhǎng)于“敵辛混劑”。

從表2可見(jiàn)，噴藥后2 d，對(duì)4～5齡桑螟的校正防效，240g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L顯著高于240g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑160 mg/L，兩者均極顯著高于“敵辛混劑”。噴藥后4 d，240g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L極顯著高于240g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑160 mg/L，兩者均極顯著高于“敵辛混劑”。噴藥后2 d、4 d、8 d和12 d，3個(gè)處理校正防效均持續(xù)增高，其中噴藥后2～4 d的增幅最大，且噴藥后8 d和12 d的防效高于表1中1～3齡桑螟的同期防效，這是因?yàn)槌怂巹?duì)4～5齡桑螟的直接作用外，對(duì)1～3齡桑螟的防效在后期疊加到對(duì)4～5齡桑螟的防效上所致。由此可見(jiàn)，在桑螟低齡期防治十分關(guān)鍵。

從表3可見(jiàn)藥劑處理對(duì)全齡桑螟的防效趨勢(shì)，240g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L和160 mg/L的校正防效從噴藥后2 d到12 d均呈現(xiàn)持續(xù)增高，“敵辛混劑”從噴藥后4 d到12 d則持續(xù)下降，表明240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑的藥效期明顯長(zhǎng)于“敵辛混劑”。

2.2 對(duì)家蠶的毒性

2.2.1 240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑對(duì)家蠶的食下毒性

240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑對(duì)3齡起蠶的食下毒性隨著連續(xù)添毒時(shí)間的延長(zhǎng)而增強(qiáng)，見(jiàn)表4。3齡起蠶添毒24 h的LC50＞3750 mg/L（即240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑稀釋64倍），連續(xù)添毒48 h的LC50為1858.2552 mg/L（即240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑稀釋129倍），連續(xù)添毒72 h的LC50為1207.4615 mg/L（即240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑稀釋99倍）。添毒后24 h內(nèi)一般僅少量中毒死亡蠶，2～3 d后是死亡高峰，可見(jiàn)240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑對(duì)家蠶的食下毒性較低，藥效作用較慢，隨時(shí)間延長(zhǎng)而表現(xiàn)出累積效應(yīng)。

參照2014年發(fā)布的《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則第11部分：家蠶急性毒性試驗(yàn)》附錄A“農(nóng)藥對(duì)家蠶的毒性等級(jí)劃分”［8］，240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑對(duì)家蠶的毒性等級(jí)為低毒（LC50＞200 mg/L）。

2.2.2 240g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑在桑葉上的殘留毒性

由于240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑在桑葉上的殘留毒性試驗(yàn)濃度為320 mg/L和160 mg/L，遠(yuǎn)低于食下毒性測(cè)定的LC50值，因此上述濃度藥液噴灑桑葉后飼喂3齡起蠶不表現(xiàn)中毒癥狀和死亡蠶。農(nóng)藥對(duì)照處理“敵辛混劑”噴藥后1 d采葉飼喂3齡蠶，死亡率100%，間隔2 d的死亡率為91.11%，間隔3 d后采葉飼喂3齡蠶無(wú)中毒癥狀和死亡蠶（表5）。

表1 240g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑對(duì)桑螟1～3齡幼蟲(chóng)的防效Table 1 Effect of 240 g/l Chlorfenapyr Suspension Agent on Controlling 1st～3rd Instar Larvae of Phalidid Caterpillar

表2 240g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑對(duì)桑螟4～5齡幼蟲(chóng)的防效Table 2 Effect of 240 g/l Chlorfenapyr Suspension Agent on Controlling 4th～5th Instar Larvae oOf Phalidid Caterpillar

表3 240g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑對(duì)桑螟全齡幼蟲(chóng)的防效Table 3 Effect of 240 g/l Chlorfenapyr Suspension Agent on Controlling All Larval Duration of Phalidid Caterpillar

2.2.3 240g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑處理桑葉的飼養(yǎng)成績(jī)

噴藥后3 d、5 d、7 d處理區(qū)飼養(yǎng)至上蔟結(jié)繭，養(yǎng)蠶成績(jī)見(jiàn)表6。3齡起蠶結(jié)繭率，240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L、160 mg/L不同間隔時(shí)間處理組合與清水對(duì)照差異均不顯著，與“敵辛混劑”噴藥后3 d、5 d的差異亦不顯著，但“敵辛混劑”噴藥后7 d的結(jié)繭率最低，可能因試驗(yàn)誤差所致。各處理組合的好蛹率指標(biāo)都很高，處理間差異不顯著，表明供試農(nóng)藥對(duì)化蛹無(wú)不良影響。各處理組合的粒繭重差異不顯著，但總體來(lái)說(shuō)數(shù)值偏小，主要是因?yàn)樵囼?yàn)在晚秋蠶期進(jìn)行，桑葉老化、硬化導(dǎo)致蠶體小，繭形小。繭層率指標(biāo)，240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑160 mg/L噴藥后7 d最高，極顯著高于240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L噴藥后3 d和240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑160 mg/L噴藥后3 d，顯著高于240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L噴藥后5 d和240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑160 mg/L噴藥后5 d，與240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L噴藥后7 d差異不顯著；240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L和160 mg/L噴藥后7 d的繭層率與清水對(duì)照差異不顯著，噴藥后5 d和3 d的繭層率顯著低于清水對(duì)照?？梢?jiàn)240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑處理的桑葉連續(xù)飼蠶對(duì)繭層率有一定影響，從養(yǎng)蠶經(jīng)濟(jì)性狀指標(biāo)看，240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L和160 mg/L噴霧處理的桑葉應(yīng)當(dāng)在噴藥7 d后采葉養(yǎng)蠶。

3 小結(jié)與討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑對(duì)桑螟1～3齡幼蟲(chóng)的防效優(yōu)于對(duì)4～5齡幼蟲(chóng)的防效，應(yīng)掌握在桑螟低齡期噴藥防治；240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L的防效顯著優(yōu)于160 mg/L，以及對(duì)照農(nóng)藥“敵辛混劑”，生產(chǎn)中可與對(duì)照農(nóng)藥交替使用；在桑螟常規(guī)蟲(chóng)量防治時(shí)可用240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑160 mg/L，蟲(chóng)量多或蟲(chóng)齡高時(shí)以320 mg/L為宜。蟲(chóng)螨腈藥效作用較慢，對(duì)桑螟的防效在噴藥后3～4 d時(shí)最高，須注意不能為了追求速效性而盲目提高使用濃度，與藥效快的農(nóng)藥混配使用，則可兼顧速效性和持效，馮世民、朱浩龍等［9～10］報(bào)道溴蟲(chóng)腈與辛硫磷混配對(duì)桑螟、桑尺蠖防效良好，但在混配比例方面有待進(jìn)一步優(yōu)化。

表4 240g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑對(duì)3齡起蠶的食下毒性Table 4 Food Toxicity of 240 g/l Chlorfenapyr Suspension Agent pn Newly Exuviated Silkworm Larvae at Third Instar

表5 240g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑噴藥后的桑葉對(duì)家蠶的殘毒期Table 5 Residual toxicity of 240 g/L Chlorfenapyr suspension agent on silkworm larvae

表6 240g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑對(duì)結(jié)繭率和繭質(zhì)的影響Table 6 Effects of 240 g/l Chlorfenapyr Suspension Agent on Cocooning Rate and Cocoon Quality

240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑對(duì)3齡起蠶的急性毒性為低毒，稀釋64倍（3750 mg/L）添毒24 h的死亡率低于50%；連續(xù)添毒48 h和72 h的LC50分別為1858.2552 mg/L、1207.4615 mg/L，即隨著連續(xù)添毒時(shí)間的延長(zhǎng)而毒性作用增強(qiáng)，表明240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑對(duì)家蠶的食下毒性表現(xiàn)為藥效較慢且具有累積效應(yīng)，添毒后24 h內(nèi)一般僅少量中毒死亡蠶，2～3 d后是死亡高峰。這與對(duì)桑螟防效最高的時(shí)間吻合。羅雁婕等［11］測(cè)定了溴蟲(chóng)腈對(duì)2齡起蠶的毒性，添食毒葉24 h內(nèi)沒(méi)有引起明顯的死亡，其LC50＞5000 mg/L，添食毒葉96 h的對(duì)家蠶的LC50為119.715 mg/L，其毒性累積作用與本試驗(yàn)的趨勢(shì)相似。不同的試驗(yàn)方法會(huì)影響結(jié)果，對(duì)于毒性較低且藥效較慢的溴蟲(chóng)腈，如試驗(yàn)濃度范圍窄、調(diào)查時(shí)間短，其真實(shí)中毒結(jié)果尚未表現(xiàn)出來(lái)。這可能是溴蟲(chóng)腈對(duì)家蠶的毒性試驗(yàn)結(jié)果差異較大的主要原因［6，12～14］。

240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L和160 mg/L噴于桑樹(shù)后1 d開(kāi)始采葉，對(duì)3齡起蠶均無(wú)中毒癥狀和死亡現(xiàn)象，這與室內(nèi)急性食下毒性測(cè)定結(jié)果相符。在噴藥后3 d、5 d、7 d采葉飼喂3齡起蠶，直至上蔟結(jié)繭，調(diào)查養(yǎng)蠶成績(jī)表明，3齡起蠶結(jié)繭率、好蛹率、粒繭重與清水對(duì)照無(wú)顯著性差異，但繭層率在噴藥后間隔3 d和5 d均顯著低于清水對(duì)照。因此，240 g/L蟲(chóng)螨腈懸浮劑320 mg/L和160 mg/L噴藥的桑葉應(yīng)當(dāng)間隔7 d后采葉養(yǎng)蠶，避免影響蠶繭質(zhì)量。關(guān)于溴蟲(chóng)腈在桑葉上的殘毒期測(cè)定結(jié)果，以5～7 d的為多［12，15～16］；謝道燕等［17］的試驗(yàn)結(jié)果為 11 d，而佘柳濤等［18］在不同季節(jié)測(cè)定殘毒期，夏季3～5 d，春季＞7 d。由于蟲(chóng)螨腈在不同地區(qū)、不同季節(jié)噴施后，在桑葉上的殘毒期相差較大，生產(chǎn)上推廣應(yīng)用前應(yīng)經(jīng)過(guò)當(dāng)?shù)氐奶镩g試驗(yàn)。