張傳仙

【摘要】目的：對比不同產(chǎn)地柴胡藥材的質(zhì)量。方法：選取黑龍江、甘肅、湖北、山西、內(nèi)蒙古5個產(chǎn)地柴胡飲片，檢測柴胡浸出物、總灰分、揮發(fā)油吸光度及柴胡皂苷α含量。結(jié)果：5產(chǎn)地浸出物、總灰分、揮發(fā)油吸光度達標率分別為100.00%、60.00%、60.00%;總皂苷α含量最高0.91%，最低0.39%。結(jié)論：黑龍江、內(nèi)蒙古產(chǎn)柴胡質(zhì)量相對較好。

【關(guān)鍵詞】柴胡;產(chǎn)地;藥材質(zhì)量

柴胡屬于傘形科，作用功效包括疏肝解郁、解表清里等。當前，國內(nèi)柴胡產(chǎn)地較多，除海南外大多地區(qū)均有分布。而且，不同產(chǎn)地柴胡受地域環(huán)境、貯藏等因素影響，在藥材質(zhì)量上存在一定差異。本次研究為證實這一點，選擇黑龍江、甘肅、湖北、山西、內(nèi)蒙古5個產(chǎn)地柴胡飲片，重點對比藥材質(zhì)量，現(xiàn)報道如下：

1資料與方法

1.1一般資料

選取黑龍江、甘肅、湖北、山西、內(nèi)蒙古5個產(chǎn)地的柴胡飲片，均為自采。

1.2方法

1.2.1儀器與試劑

所用儀器包括上海天美科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)的UV-1102分光光度計、安徽三星樹脂科技有限公司生產(chǎn)的D101大孔樹脂、瑞士普利賽斯電子分析天平、江蘇昆山市超聲儀器有限公司生產(chǎn)的KQ-250E超聲波清洗器等。所用試劑包括中國藥品生物制品鑒定所提供的柴胡皂苷u對照品（批號200358）、柴胡對照藥材（批號110814）及中國食品藥品檢定研究院提供的柴胡皂苷d對照品（批號201105）、無灰濾紙、稀鹽酸、乙醇（分析純）、甲醇（色譜純）等。

1.2.2檢測方法

①柴胡浸出物：在250mL平底燒瓶內(nèi)置入4g柴胡粉末，添加100mL 95%乙醇。靜置1h，回流1h，平底燒瓶取下，密塞，放冷，稱重。損失量以95%乙醇補齊，混勻，吸取25mL濾液。依據(jù)熱浸法檢測，經(jīng)干燥品計算供試品中浸出物含量，各樣本連續(xù)檢測3次，取3次平均值。根據(jù)2015年《中國藥典》，浸出物含量應(yīng)>12.0%。

②總灰分：粉碎柴胡飲片，確保可通過二號篩，混勻，取3g柴胡粉末，置于坩堝內(nèi)，稱重。升溫，熾熱，直至炭化。溫度增加到600°C，確保完全灰化，保持恒重。殘渣稱重，計算總灰分含量。各樣本連續(xù)檢測3次，取3次平均值。根據(jù)2015年《中國藥典》，總灰分含量應(yīng)<7.0%。

⑧酸不溶性灰分取步驟②所得灰分，置于坩堝，加入10mL稀鹽酸，坩堝以表面皿覆蓋，置于水浴，加熱lOmin。以5mL熱水沖洗表面皿，洗液一并置入坩堝，以無灰濾紙濾液。以水將坩堝內(nèi)殘渣洗于濾紙上，持續(xù)洗滌，直至洗液無氯化物反應(yīng)。在同一坩堝內(nèi)置入濾渣、濾紙。干燥，熾灼，直至恒重。對殘渣重量進行計算，并計算供試品中酸不溶性灰分含量。各樣本連續(xù)檢測3次，取3次平均值。

④揮發(fā)油吸光度：在2000mL三角燒瓶內(nèi)放置200g供試品，加水1000mL，維持微沸狀態(tài)，回流2h，放冷，過濾。取殘渣，加入500mL水，回流提取，持續(xù)1h。冷卻，過濾。兩次濾液合并，做減壓濃縮處理，直至濾液體積是生藥體積的0.8倍。冷卻，以95%乙醇加入，調(diào)整醇濃度為70%。靜置過夜，減壓濃縮，回收乙醇，所余藥液進行80°C水浴，濃縮于燒瓶內(nèi)，添加80mL水，蒸館裝置連接并加熱。在50mL量瓶內(nèi)置入館出液，待館出液接近50mL時，以續(xù)館出液添加到刻度內(nèi)，混勻，即為樣品溶液。取10mL樣品溶液，置于干燥小燒杯。水浴，蒸干，留取殘渣，添加10mL水，促使溶解，即可獲得空白溶液。依據(jù)照分光光度法，于（27713）nln波長處，對吸收度進行檢測。根據(jù)2015年《中國藥典》，揮發(fā)油吸光度應(yīng)>0.17。

⑤檢測總皂苷α含量柴胡樣品粉碎，過20目篩。在500mL燒瓶內(nèi)置入30g樣品粗粉，以8倍量氫氧化鉀一乙醇溶液回流提取3次，每次2h。提取液合并，溶劑回收，加水，混懸溶解。以D101大孔樹脂處理。先以水洗脫，再以70%乙醇洗脫，溶劑稅收，以正丁醇萃取。正丁醇回收，獲得浸膏，干燥，磨成細粉。取90mg，置于10mL量瓶，添加甲醇溶解，定容，直至達到刻度，搖勻。檢測前，過0.45um濾膜，即可獲得樣品。取取適量柴胡皂苷α對照品，添加甲醇，制備標準品，確保其每lmL中含0.32mg溶液。檢測時，空白溶液為5mL甲醇，分別取0.2mL供試品溶液、0.2mL對照品溶液，并分別加入0.1%對二甲氨基苯甲醛乙醇液0.1mL。70°C條件下，持續(xù)溫?zé)醠Omin。冷卻，添加4.0mL磷酸。70°C條件下，反應(yīng)30min，冷卻。供試品溶液、對照品溶液均在454nm波長處計算，即可獲得總皂苷α含量。

1.2.3方法學(xué)考察

①線性關(guān)系：分別吸取2mL、4 mL、6mL、8mL、10mL上述對照品溶液，置于10mL量瓶。添加甲醇，定容，直至達刻度。取0.2mg，檢測吸光度。橫坐標為質(zhì)量濃度，縱坐標為吸光度，創(chuàng)建標準曲線，回歸方程A 436580p-530667，r=0.9996.提示吸光度與質(zhì)量濃度之間有良好線性關(guān)系。

②精密度試驗：樣品重復(fù)檢測5次，計算吸光度。發(fā)現(xiàn)RSD不超過3%，提示儀器精密度良好。

⑧穩(wěn)定性試驗：分別在0h、1h、2h、4h、8h對吸光度進行檢測，發(fā)現(xiàn)不同時間含量RSD為1.81%，提示16h樣品具有較好穩(wěn)定性。

④重現(xiàn)性試驗：樣品重復(fù)制備5份，對吸光度進行檢測。發(fā)現(xiàn)RSD為2.10%，提示具有良好重現(xiàn)性。

⑤回收率試驗：取每份30g柴胡，共6份。精密稱定。分別以lmL對照品溶液加入，根據(jù)上述方法檢測總皂苷a含量，計算平均回收率，結(jié)果為98.2%，RSD為2.5%，提示回收率良好。

2結(jié)果

不同產(chǎn)地柴胡總灰分均未超過《藥典》標準，最高6.98%，最低4.32%;甘肅、山西浸出物未達標準，合格率60.00%：湖北、山西揮發(fā)油吸光度未達到標準，合格率為60.00%：總皂苷a含量最高0.91%，最低0.39%。詳見表1。

3討論

中藥是祖國中醫(yī)一個重要組成部分，藥材質(zhì)量的高低直接影響患者治療效果及生命安危，且牽動整個中醫(yī)藥事業(yè)的發(fā)展。柴胡入肝、膽、肺經(jīng)，性辛，具有疏肝解郁、疏散退熱等功效，在月經(jīng)不調(diào)、胸脅脹痛等病癥治療中發(fā)揮著重要的作用。柴胡分類較多，國內(nèi)有40種17個變種，且產(chǎn)地廣闊。也有研究提出，不同產(chǎn)地柴胡受地域環(huán)境、人為種植、貯藏等因素影響，在藥材質(zhì)量上存在差異。

本次研究分析了5個不同產(chǎn)地柴胡的浸出物、總灰分、揮發(fā)油吸光度等。其中，浸出物可直接影響制劑工藝，是藥材前處理中一個重要組成部分。本次研究中，甘肅、山西浸出物未達《藥典》標準。總灰分能對前處理中是否妥善清除泥沙雜質(zhì)進行反映，本研究5產(chǎn)地總灰分均符合《藥典》標準。湖北、山西揮發(fā)油吸光度未達到標準，考慮與地域環(huán)境等因素有關(guān)。在總皂苷含量上，黑龍江產(chǎn)柴胡含量最高（0.91%），其次為內(nèi)蒙古（0.71%），最低為山西（0.39%）。因此，自地域角度來說，綜合浸出物、總灰分、揮發(fā)油吸光度及總皂苷a含量四項檢測指標，筆者認為黑龍江、內(nèi)蒙古產(chǎn)柴胡質(zhì)量相對較好。本次研究所用方法學(xué)具有較好精密度、穩(wěn)定性、重現(xiàn)性，且加樣回收率較高，可對不同產(chǎn)地柴胡藥材中總皂苷含量進行檢測，具有較高應(yīng)用價值，可為完善不同產(chǎn)地柴胡藥材質(zhì)量標準提供科學(xué)依據(jù)。

綜上所述，自地域角度來說，相較于湖北、甘肅、山西，黑龍江、內(nèi)蒙古產(chǎn)柴胡質(zhì)量相對較好。