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        酶特性實驗的分析及改進(jìn)

        2019-04-16 00:54:00郭衛(wèi)華
        中學(xué)生物學(xué) 2019年2期

        郭衛(wèi)華

        摘要以2018年高考理綜全國卷I試題為例,結(jié)合近三年的高考理綜全國卷I試題,分析了高考命題特點及對后期的備考建議,以期為2019屆高三生物復(fù)習(xí)提供可資借鑒與參考。

        關(guān)鍵詞高考試題 特點分析 復(fù)習(xí)啟示

        中圖分類號G633.91 文獻(xiàn)標(biāo)志碼B

        酶特性實驗是高中生物學(xué)的一個重要實驗,很多教師也對此進(jìn)行了研究和改進(jìn)。對于酶專一性實驗,筆者在教學(xué)中發(fā)現(xiàn)教材上沒有設(shè)計排除兩種酶中可能混有還原性物質(zhì)的可能性。而在探究pH對酶活性影響時,人教社的《必修1.分子與細(xì)胞》中第84頁用括號注明“建議用淀粉酶探究溫度對酶活性的影響,用過氧化氫酶探究pH對酶活性的影響”,但并未說明原因。下面對這兩個實驗進(jìn)行了原因分析并重新設(shè)計,在教學(xué)實施中獲得了較好效果。

        1探究酶專一性的實驗

        1.1酶專一性實驗再現(xiàn)

        實驗步驟見表1。

        這是一個比較經(jīng)典的實驗,很多教師上課時基本也是這樣講的,同時還會讓學(xué)生思考“此實驗?zāi)芊裼玫庖捍骒沉衷噭﹣頇z驗”。學(xué)生基本也知道不能用碘液,因為碘液無法檢驗蔗糖是否被水解,碘液檢驗的是反應(yīng)物,而斐林試劑檢驗的生成物。

        1.2酶專一性的改進(jìn)

        改進(jìn)實驗的實驗步驟:

        取4支試管分別編號見表2中①、②、③、④,加入試劑,充分混勻后放在50℃恒溫水浴中保溫5 min,再各加入斐林試劑2mL,搖勻。50%再水浴2 min,觀察是否有沉淀并記錄實驗結(jié)果。

        再取4支試管分別編號見表2中⑤、⑥、⑦、⑧,如表2所示,加入試劑,最后各試管加入蒸餾水補足到總體積6mL,搖勻。50%再水浴2min,觀察是否有沉淀并記錄實驗結(jié)果。

        實驗結(jié)果及分析:只有①號和④號出現(xiàn)磚紅色沉淀,由此可知淀粉酶只能催化淀粉水解,不能催化蔗糖水解;蔗糖酶只能催化蔗糖水解,不能催化淀粉分解;即“酶具有專一性”。

        該實驗設(shè)計反思:淀粉酶代替唾液,免去了收集唾液的麻煩及唾液中食物殘渣的影響;淀粉酶和蔗糖酶都為植物體內(nèi)的酶,最適溫度一般在40~50%,故本實驗設(shè)置反應(yīng)溫度在50%,也是斐林試劑水浴的溫度,從而避免了前后溫度不一致而把溫度作為自變量了;增加了兩組對照(⑦號和⑧號),排除了兩種酶中混有還原性物質(zhì)的可能,實驗過程更加嚴(yán)謹(jǐn)。

        2探究pH對酶活性影響的實驗

        2.1探究pH對酶活性影響實驗再現(xiàn)

        實驗步驟見表3。

        2.2實驗反思

        ①、③號試管內(nèi)溶液的顏色變化完全出乎預(yù)料,是不是由于操作失誤造成的呢?于是,學(xué)生對①號試管反復(fù)進(jìn)行實驗,發(fā)現(xiàn)在加入HCl后的不同時間內(nèi)滴加I-KI溶液所呈現(xiàn)的顏色不一樣,有時呈現(xiàn)紅色,有時呈現(xiàn)褐色,或者二者之間的顏色;對③試管進(jìn)行多次操作實驗,發(fā)現(xiàn)只有滴加足夠多的I-KI溶液,藍(lán)色才不消失。

        這究竟是怎么回事呢?結(jié)合化學(xué)知識,淀粉及其水解產(chǎn)物與碘的顯色反應(yīng),是由于碘分子嵌入淀粉螺旋圈內(nèi),借著范得華力與淀粉聯(lián)系在一起,形成淀粉一碘絡(luò)合物的緣故。其顏色與多糖鏈長度有關(guān),當(dāng)鏈長小于6個葡萄糖單位時,不能形成一個螺旋圈,因而不能顯色,當(dāng)鏈長度平均為20個葡萄糖單位時顯紅色,大于60個葡萄糖單位時顯藍(lán)色。對①號試管內(nèi)在加入HCl后的不同時間段滴加I-KI溶液,有時呈現(xiàn)紅色,有時呈現(xiàn)褐色,或者二者之間的顏色,說明淀粉發(fā)生了不同程度的水解,產(chǎn)生了分子量大小不等的水解產(chǎn)物。試管內(nèi)已經(jīng)加了1mL體積分?jǐn)?shù)為5%的HCl溶液,難道淀粉酶在酸的作用下沒有變性失去活性嗎?經(jīng)過查閱資料,發(fā)現(xiàn),淀粉酶的確失去了活性。但是師生忽視淀粉不但在酶的作用下發(fā)生水解,在酸的作用下同樣發(fā)生水解。這樣①號試管內(nèi)所表現(xiàn)出的實驗現(xiàn)象就掩蓋了在酸性環(huán)境中淀粉酶的活性受到抑制或者變性失去活性的事實,這樣看來淀粉酶探究pH對酶活性的影響是不合適的。

        那么③號試管內(nèi)現(xiàn)象出現(xiàn)的原因又是什么呢?滴加溶I-KI液試管內(nèi)溶液瞬間變藍(lán),說明試管內(nèi)一定有淀粉存在,但是為什么藍(lán)色在瞬間又消失了呢,難道淀粉在瞬間又被水解了嗎?經(jīng)過查閱資料,得知③號試管中還存在著另一種化學(xué)反應(yīng),即I2(I2與氯氣類似都為同一主族元素,有相似的化學(xué)性質(zhì))與NaOH發(fā)生了化學(xué)反應(yīng):2NaOH+L2=NM+NMO+H2O。盡管剛剛加入的I-KI溶液中的碘和淀粉反應(yīng)產(chǎn)生淀粉一碘絡(luò)合物,使溶液變?yōu)樗{(lán)色,但是由于碘分子是嵌入淀粉的螺旋圈內(nèi),借范得華力與淀粉聯(lián)系在一起的,其化學(xué)性質(zhì)并沒有發(fā)生改變。所以爾后又迅速與NaOH發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生了無色的NaI、NaIO,使試管內(nèi)呈現(xiàn)的藍(lán)色在瞬間又歸為無色。只有當(dāng)加入足夠多的碘一碘化鉀溶液時,與NaOH充分反應(yīng)完畢后剩余的碘才與淀粉發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生淀粉一碘絡(luò)合物,出現(xiàn)藍(lán)色。從③號試管的顏色變化看,盡管當(dāng)加入足量的I-KI溶液時,所期望的溶液顏色——藍(lán)色最終出現(xiàn)了,也同樣說明堿性環(huán)境影響了酶的活性。但是,如果用淀粉酶探究pH對酶活性影響的學(xué)生實驗時,需要向?qū)W生解釋的太多,所以從③號試管內(nèi)的顏色變化看,用淀粉酶探究pH對酶活性的影響也是不合適的。

        那么,如果用斐林試劑代替碘液來檢驗產(chǎn)物是否可行?答案是否定的。因為斐林試劑(甲液:質(zhì)量濃度0.1g/mL NaOH溶液、乙液:質(zhì)量濃度0.05g/mL CuSO~溶液)其實質(zhì)為新制的Cu(OH)2,從化學(xué)方面,可知加入鹽酸會將新制的Cu(OH)2分解,致使還原糖無法和斐林試劑反應(yīng),自然無法確定到底是否有還原糖生成。

        綜上所述用淀粉酶探究pH對酶活性的影響是不合適的,建議用過氧化氫酶探究pH對酶活性的影響。

        2.3探究pH對過氧化氫酶活性的影響的實驗設(shè)計實驗步驟見表4。在實驗過程中,學(xué)生不僅要嚴(yán)格遵循實驗設(shè)計基本原則,但又不能生搬硬套,而且有時還要考慮檢測試劑等,才能最大限度地確保實驗的準(zhǔn)確性和說服力。上述實驗只是筆者在教學(xué)中碰到的疑惑及一些改進(jìn),只是定性實驗,對于各溶液的濃度及試劑用量等僅供參考。

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