李啟艷,王 慧

(中國(guó)食品藥品檢定研究院，北京 102600)

山楂作為一種水果被大家所熟悉，其果膠含量居所有水果之首，并且它含有比較豐富的糖類、維生素和礦物質(zhì)[1]，同時(shí)在中藥當(dāng)中還是屬于一種消導(dǎo)藥，它的功效主要是治療消化不良、積食等疾病[2]。山楂也具有一些活血化瘀的作用，而且山楂當(dāng)中還含有一些黃酮類物質(zhì)，它對(duì)于調(diào)節(jié)膽固醇的代謝、保護(hù)血管、保護(hù)及修復(fù)胃粘膜都是很有幫助的。猴頭菇可以促進(jìn)人的食欲[3]，減少厭食帶來(lái)的困擾，還能增強(qiáng)食道粘膜屏障機(jī)能，提高淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率，提升白細(xì)胞等作用[4]。所以，猴頭菇可以提高食道以及胃部對(duì)于疾病的免疫能力[5]。低聚木糖是聚合糖類中增殖雙歧桿菌功能最強(qiáng)的品種之一，它的功效性是其他聚合糖類的近20倍，人體胃腸道內(nèi)沒(méi)有水解低聚木糖的酶[6]，所以其可直接進(jìn)入大腸內(nèi)優(yōu)先為雙歧桿菌所利用，促進(jìn)雙歧桿菌增殖同時(shí)產(chǎn)生多種有機(jī)酸[7]。降低腸道PH值，抑制有害菌生長(zhǎng)，使益生菌在腸道大量增殖，達(dá)到健胃護(hù)胃的效果。小麥低聚肽是來(lái)源于小麥蛋白水解產(chǎn)物的生物活性肽[8]，小麥低聚肽能優(yōu)先與脂肪酸自由基結(jié)合，使自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng)中止，從而提高胃黏膜抗氧化及清除自由基能力，降低脂質(zhì)過(guò)氧化[9]，小麥低聚肽還可顯著減輕胃黏膜損傷的炎癥反應(yīng)，減少胃黏膜上皮細(xì)胞的凋亡，促進(jìn)胃黏膜損傷的愈合。中藥白及具有收斂止血消腫生肌的功效，三七具有散瘀止血、消腫定痛的功效。本實(shí)驗(yàn)觀察了山楂與猴頭菇等配伍及與小麥低聚肽、中藥配方制成的不同制劑對(duì)乙醇致正常大鼠急性胃潰瘍模型的影響。

1 材料及方法

1.1 動(dòng)物

體重為190～240g的清潔級(jí)SD大鼠，雌雄各半,由濟(jì)南朋悅實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁育有限公司提供。

1.2 實(shí)驗(yàn)制劑及試劑

猴頭菇提取物、山楂提取物、低聚木糖購(gòu)買(mǎi)自西安天一生物技術(shù)有限公司，臨用時(shí)用蒸餾水配置到所需濃度；生理鹽水、無(wú)水乙醇、10%福爾馬林液購(gòu)買(mǎi)自天津市鼎盛鑫化工有限公司。

1.3 主要儀器

TKY-TSI自動(dòng)組織脫水機(jī)(湖北泰康醫(yī)療設(shè)備有限公司)；KD-3368AM電腦切片機(jī)(浙江省金華市科迪儀器設(shè)備有限公司)；BX43型顯微鏡(奧林巴斯)；YD-6L型生物組織冷凍包埋機(jī)(上海精學(xué)科學(xué)儀器有限公司)。

2 方法

2.1 不同山楂制劑對(duì)無(wú)水乙醇誘發(fā)大鼠胃粘膜損傷的影響

先將大鼠飼養(yǎng)觀察2周判斷是否健康，將健康的大鼠隨機(jī)分成6組[10]，每組8只，分為對(duì)照組(生理鹽水)；模型組；劑量組1：山楂提取物(0.06g/kg)；劑量組2：山楂提取物+猴頭菇提取物(山楂提取物0.06g/kg、猴頭菇提取物0.25g/kg)；劑量組3：山楂提取物+猴頭菇提取物+低聚木糖(山楂提取物0.06g/kg、猴頭菇提取物0.25g/kg、低聚木糖0.075g/kg)；劑量4：山楂+小麥低聚肽+中藥白及三七(山楂0.06g/kg、小麥低聚肽0.4g/kg、白及三七各0.05g/kg)。每天給大鼠灌胃給藥，連續(xù)7天，在第7天灌胃前禁食不禁水24小時(shí)。末次給藥后3小時(shí)實(shí)驗(yàn)大鼠分別灌服1ml無(wú)水乙醇。1小時(shí)后處死所有大鼠，取大鼠全胃浸入10%福爾馬林液固定1小時(shí)，后沿著大彎剪開(kāi)大鼠胃，沖洗潔凈胃壁，肉眼和顯微鏡下觀察胃粘膜的線狀及點(diǎn)狀潰瘍[11]。最后計(jì)算大鼠胃粘膜的潰瘍程度。

2.2 取材方法

將每只大鼠的胃組織標(biāo)本經(jīng)10%福爾馬林固定、按照常規(guī)方法取材、石蠟包埋、切片至4μm，HE染色，顯微鏡下觀察各組大鼠胃組織的病理變化情況。每項(xiàng)觀察指標(biāo)分別以1，2，3，4的得分來(lái)表示，且分值越高表示大鼠胃組織損害越嚴(yán)重，觀察指標(biāo)詳見(jiàn)表1。

表1 胃組織病理學(xué)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)[12]

3 結(jié)果

由表2可以看出，與模型組相比，劑量組1、2、3大鼠胃組織病理學(xué)評(píng)分依次降低，表示大鼠對(duì)無(wú)水乙醇誘發(fā)的胃粘膜損傷影響依次降低，且劑量組2與模型組比較，具有顯著性差異(P<0.05)；劑量組3和劑量組4與模型組比較，具有極顯著性差異(P<0.01)。且劑量組3與劑量組4的評(píng)分接近對(duì)照組，證明，劑量組3與劑量組4大鼠受無(wú)水乙醇誘發(fā)的胃粘膜損傷影響是最小的。

表2 不同山楂制劑對(duì)無(wú)水乙醇誘發(fā)大鼠胃粘膜損傷的影響評(píng)分

#與對(duì)照組相比，P <0.01；﹡ 與模型組相比，P <0.05；﹡﹡與模型組相比，P <0.01。

4 討論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與模型組相比，劑量組1、2、3、4大鼠的胃組織病變程度均減輕，其中劑量組2與模型組比較具有顯著差異(P<0.05)，劑量組3與劑量組4與模型組比較具有極顯著差異(P<0.01)，說(shuō)明，劑量組2大鼠的胃組織病變與模型組比較有一定程度的恢復(fù)，但療效不及劑量組3和劑量組4。實(shí)驗(yàn)結(jié)果也進(jìn)一步說(shuō)明山楂提取物、猴頭菇提取物、低聚木糖配伍與小麥低聚肽、白及、三七配伍對(duì)無(wú)水乙醇所致的胃粘膜損傷有很好的治療和保護(hù)作用，其作用優(yōu)于單獨(dú)的山楂提取物，且兩者療效作用相當(dāng)。關(guān)于不同山楂制劑對(duì)大鼠胃黏膜損傷的修護(hù)和防御機(jī)制，還需要進(jìn)一步的探討。