閆 征,郝利民*,張黎明*,康彩彩,馬天嬌,崔 燕,鄭志強
(1.北京電子科技職業(yè)學院生物工程學院,北京 100176;2.軍事科學院軍需工程技術(shù)研究所,北京 100010;3.天津科技大學 工業(yè)發(fā)酵微生物教育部重點實驗室,天津 300457)
靈芝(Ganoderma lucidum)是真菌界、擔子菌門、傘菌綱、多孔菌目、靈芝科、靈芝屬的一種藥食兩用真菌,作為中國傳統(tǒng)名貴滋補藥材,具有補中益氣、扶正固本、延年益壽的功效[1]?,F(xiàn)代科學研究表明,靈芝除含有多糖、靈芝酸、蛋白質(zhì)、脂肪酸等活性成分外,還含有人體所需的膳食纖維、脂肪、氨基酸、微量元素和礦物質(zhì)等[2],具有抗氧化、調(diào)節(jié)免疫力、抑制腫瘤、提高機體耐缺氧能力等功效[3-4],對于治療高血壓、高血脂、肝病、心血管等疾病也具有良好的臨床效果[5]。
隨著靈芝需求量的不斷增加,消費者和靈芝深加工企業(yè)迫切需要品質(zhì)優(yōu)良、質(zhì)量穩(wěn)定的靈芝子實體,但由于種植方式、環(huán)境條件、加工工藝等因素導致人工栽培靈芝子實體的品質(zhì)參差不齊[6-7],進而影響相關(guān)產(chǎn)品的穩(wěn)定性,而歸根結(jié)底是由靈芝子實體中化學成分的差異所致。目前,對不同產(chǎn)地人工栽培靈芝子實體間差異的對比分析,主要集中在多糖、靈芝酸等活性成分[8-9],而關(guān)于其他化學成分差異的研究報道較少。因此本研究從人工栽培靈芝的主要產(chǎn)區(qū)選取3 種靈芝子實體,對其主要化學成分(多糖、靈芝酸、氨基酸和脂肪酸等)進行對比分析,以期為進一步完善靈芝的質(zhì)量標準和作用機理提供依據(jù)和參考。
人工栽培靈芝子實體采集時間為2016年10月,由天津藥物研究院中藥現(xiàn)代研究部鑒定;安徽1號來自安徽省六安市金寨縣,吉林1號來自吉林省通化市通化縣,吉林2號來自吉林省吉林市蛟河市,測試前,將靈芝子實體洗凈后80 ℃烘干,粉碎備用。
甲醇、乙腈(均為色譜純) 美國Thermo Fisher Scientific公司;靈芝酸A(SMB00445)、葡萄糖(G 7528)標準品 美國Sigma公司;靈芝酸B(HG220652)標準品 寶雞市晨光生物科技有限公司;其余試劑均為分析純。
JA12002電子天平 上海精科天平儀器廠;PHSJ-4A pH計 上海雷磁儀器廠;TGL16G臺式高速離心機上海醫(yī)用分析儀器廠;DGG電熱鼓風干燥箱 天津天宇機電有限公司;K9840自動凱氏定氮儀 濟南海能儀器股份有限公司;L-8800氨基酸全自動分析儀日本日立公司;1260高效液相色譜儀、6890-5975C氣相色譜-質(zhì)譜(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)聯(lián)用儀、ZORBAX Eclipse Plus C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)、ZORBAX Extend-C18(250 mm×4 mm,5 μm) 美國安捷倫公司;AA-6800原子吸收光譜儀、UVmini-1240紫外-可見分光光度計 日本島津儀器制造有限公司;SX2-12-10馬弗爐 北京市永光明醫(yī)療儀器廠;DZKW-4電子恒溫水浴鍋 南昌市恒順化驗設備制造有限公司。
1.3.1 常規(guī)營養(yǎng)成分測定
水分含量的測定采用直接干燥法,參照GB 5009.3—2016《食品中水分的測定》[10];粗蛋白含量的測定采用凱氏定氮法(粗蛋白質(zhì)含量=總氮含量×6.25),參照GB 5009.5—2016《食品中蛋白質(zhì)的測定》[11];粗脂肪含量的測定采用索氏脂肪抽提法,參照GB 5009.6—2016《食品中脂肪的測定》[12];碳水化合物含量的測定參照GB/Z 21922—2008《食品營養(yǎng)成分基本術(shù)語》[13];灰分采用灼燒重量法直接測定,參照GB 5009.4—2016《食品中灰分的測定》[14]。
1.3.2 氨基酸含量測定
參照GB 5009.124—2016《食品中氨基酸的測定》[15],采用酸水解法處理樣品,因此不考慮色氨酸的檢測。
試樣水解:精確稱取一定量的樣品放入水解管中,加入10 mL 6.0 mol/L HCl溶液,抽真空至真空度接近0 Pa后維持10 min,管口密封后110 ℃水解22 h,取出冷卻至室溫,過濾去除雜質(zhì),取濾液1 mL于10 mL比色管中,60 ℃水浴10 min,真空干燥器中蒸干,然后加入適量0.02 mol/L HCl溶液,在空氣中放置30 min后進行測定。
試樣測定:使用混合氨基酸標準工作液注入氨基酸自動分析儀,參照JJG 1064—2011《氨基酸分析儀檢定規(guī)程》及儀器說明書進行試樣的測定,以外標法通過峰面積計算樣品測定液中氨基酸濃度,色譜柱為磺酸型陽離子樹脂,檢測波長為570 nm和440 nm。
1.3.3 多糖含量測定
水溶性多糖提取條件:料液比1∶20(g/mL)、提取溫度100 ℃、提取時間2.5 h、提取2 次。提取結(jié)束后合并濾液,經(jīng)濃縮、醇沉、4 ℃靜置,離心,凍干,得靈芝子實體水溶性粗多糖。
堿溶性多糖提取條件:提取溶液用4% NaOH溶液調(diào)節(jié)pH 13.5,料液比1∶30(g/mL)、提取溫度80 ℃、提取時間2 h、提取2 次。提取結(jié)束后合并濾液,經(jīng)濃縮、醇沉、4 ℃靜置,離心凍干得靈芝子實體堿溶性粗多糖。
水溶性多糖和堿溶性粗多糖按式(1)計算粗多糖提取率:
多糖含量采用苯酚-硫酸法[16]進行測定。以葡萄糖為標準單糖,用紫外-可見分光光度計在490 nm波長處測定吸光度,以葡萄糖質(zhì)量濃度為橫坐標、吸光度為縱坐標繪制標準曲線,根據(jù)標準曲線按式(2)計算多糖含量:
1.3.4 靈芝多糖的單糖組成分析
采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(3-methyl-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one,PMP)柱前衍生高效液相色譜法[17],對3 種不同來源多糖的單糖組成進行分析,具體操作過程如下:
水解:準確稱取純多糖樣品5.0 mg,置于10 mL安培管中,加入2.0 mol/L三氟乙酸溶液2 mL,充入氮氣5 min,保護管中樣品,防止在水解過程中氧化,用噴燈封住管口,置于110 ℃烘箱水解2 h,取出冷卻至室溫,在管中加入5 mL甲醇,氮氣吹干,重復3 次以除盡管中殘留的三氟乙酸,然后向其中加入1 mL蒸餾水,得多糖水解產(chǎn)物。
衍生:取水解液100 μL,加入100 μL 0.3 mol/L的NaOH溶液和100 μL 0.5 mol/L的PMP-甲醇溶液,混合均勻,于70 ℃中水浴30 min。水浴結(jié)束后取出冷卻至常溫后,加入100 μL 0.3 mol/L的HCl溶液,混合均勻。再加入900 μL氯仿將多余的PMP萃取除去,重復3 次。最后加入500 μL的蒸餾水稀釋,0.22 μm濾膜過濾,制得多糖水解單糖衍生物,以供分析。
檢測:色譜柱:ZORBAX Extend-C18(250 mm×4 mm,5 μm);流動相:0.1 mol/L磷酸鹽(pH 6.7)緩沖液-乙腈(83∶17,V/V);流速:1.0 mL/min;柱溫:30 ℃;檢測波長:250 nm;進樣量:20 μL。
1.3.5 脂肪酸含量測定
參照GB 5009.6—2016[12],先以石油醚(60~90 ℃)為提取溶劑,用索氏抽提法提取粗脂肪,然后用KOH-甲醇堿催化法對樣品進行預處理,用GC-MS聯(lián)用儀進行分析,具體操作如下:
脂肪酸甲酯化:取索氏抽提粗脂肪樣品100.0 mg于比色管中,依次加入5 mL正己烷-乙醚(2∶1,V/V)和3 mL 0.5 mol/L KOH-甲醇溶液,振蕩混勻后超聲波處理10 min,再向比色管中加入5 mL純水,振蕩混勻后轉(zhuǎn)移至離心管中,4 000 r/min離心2 min后取上層脂肪酸甲脂備用。
色譜條件:色譜柱為VF-5MS型毛細管色譜柱(30 m×0.25 mm,0.25 μm),載氣為高純氦氣(純度99.999%),柱流速為1 mL/min,分流比為5∶1;升溫程序:柱初溫為80 ℃,保溫2 min,以10 ℃/min速率升溫至200 ℃,再以5 ℃/min速率升溫至290 ℃,保溫5 min;進樣口溫度為280 ℃;進樣量為0.5 μL。
質(zhì)譜條件:電子電離源,傳輸線溫度為280 ℃,離子源溫度為220 ℃,掃描方式為全掃描,掃描范圍為m/z50~500,溶劑峰切除時間為6 min。
1.3.6 微量元素含量測定
將0.500 0 g樣品與15 mL HNO3-HClO4(4∶1,V/V)消化液混合,用電子萬用爐加熱樣品至微沸,待溶液變成淡黃綠色或無色,且瓶中出現(xiàn)白色煙霧后,冷卻至室溫,再加少量水繼續(xù)加熱以除去殘留的酸,重復3 次,然后用AA-6800型火焰原子吸收光譜儀進行測定。同時做空白樣和平行樣。
1.3.7 靈芝酸A和靈芝酸B含量測定
3 種靈芝子實體中靈芝酸A和B含量測定參照文獻[18]。具體操作如下:
色譜條件:色譜柱:ZORBAX Eclipse Plus C18(4.6 mm×250 mm,5 μm);流動相為35%乙腈-65% 0.1%醋酸溶液,檢測波長為254 nm;柱溫為25 ℃,進樣量為10 μL,流速為1.0 mL/min。
前處理:稱取100.0 mg靈芝子實體粉末,加入適量甲醇超聲處理25 min,并定容于25 mL容量瓶,制得供試液。
標準曲線:精密稱定靈芝酸A標準品0.5 mg,靈芝酸B標準品0.5 mg,加適量甲醇超聲處理25 min,定容于25 mL容量瓶,搖勻,得標準品溶液。將標準品溶液稀釋成不同質(zhì)量濃度,分別吸取不同質(zhì)量濃度的標準品溶液10 μL,0.45 μm有機濾膜過濾,進樣并記錄峰面積。
表1 3 種靈芝子實體的常規(guī)成分含量(干質(zhì)量)Table 1 Proximate chemical composition (dry basis) of three samples of G. lucidum
由表1可知,在3 種靈芝子實體中,安徽1號的能量、粗蛋白和碳水化合物含量最高,吉林1號的粗脂肪含量最高,而吉林2號的粗纖維含量最高,安徽1號和吉林1號樣品的灰分和水分含量相近,均低于吉林2號。
中草藥藥理作用的發(fā)揮需要一定的物質(zhì)基礎(chǔ),除功效活性成分外,營養(yǎng)物質(zhì)的組成與其藥理作用也存在緊密的聯(lián)系[19],通過對比3 種靈芝子實體的常規(guī)成分可知,產(chǎn)地是影響靈芝子實體營養(yǎng)成分組成和含量的重要因素,即使是同一省內(nèi)不同區(qū)域的靈芝子實體,其營養(yǎng)成分也存在一定差異。
表2 3 種靈芝子實體氨基酸含量Table 2 Amino acid contents of three samples of G. lucidumg/kg
由表2可知,3 種靈芝子實體中共檢測出17 種氨基酸,包括7 種必需氨基酸和10 種非必需氨基酸,因采用酸水解法而色氨酸無法檢出。氨基酸總量由高到低依次:安徽1號(46.35 g/kg)>吉林2號(41.72 g/kg)>吉林1號(19.16 g/kg),與3 種靈芝子實體蛋白質(zhì)含量(表1)檢測結(jié)果順序一致。3 種靈芝子實體中,必需氨基酸總量占氨基酸總量的30%~40%,其中安徽1號靈芝子實體的氨基酸總量、必需氨基酸含量與吉林2號相近,但與吉林1號存在顯著差異。安徽1號與吉林2號的氨基酸總量與文獻[20]報道相近,而吉林1號的含量較低,這可能是由于菌種、栽培方式、椴木品種和采收期限等因素導致靈芝子實體中氨基酸組成和含量的差異。
氨基酸不僅是一種常規(guī)營養(yǎng)物質(zhì),還具有重要的功效活性[21],如合成蛋白質(zhì)、糖異生底物、神經(jīng)遞質(zhì)和信號轉(zhuǎn)導分子的前體及蛋白質(zhì)周轉(zhuǎn)的調(diào)節(jié)物等,在生物體生長發(fā)育和組織修復更新中具有重要作用。靈芝是氨基酸的“貯存庫”,具有氨基酸種類多、含量高、活性高、易被人體吸收的特點,其中亮氨酸、纈氨酸和異亮氨酸3 種支鏈氨基酸(branched-chain amino acids,BCAA)總量均較高(安徽1號9.85 g/kg;吉林1號4.06 g/kg;吉林2號8.61 g/kg),BCAA不僅具有抗疲勞和增強運動能力的功能,在減輕運動性肌肉損傷和抑制延遲性肌肉酸痛發(fā)生等方面也具有顯著作用[22],靈芝具有顯著抗疲勞功效,可能與其子實體中高含量的BCAA有關(guān)。在3 種靈芝子實體中谷氨酸、天冬氨酸和甘氨酸含量也較高,天冬氨酸在人體內(nèi)可被轉(zhuǎn)化為谷氨酸,而谷氨酸不僅具有較強的降血氨作用,還是神經(jīng)中樞和大腦皮質(zhì)的重要補充劑,可作為能源替代物延緩能量物質(zhì)耗竭,從而達到促進運動疲勞恢復的功效,并能促進機體運動過程產(chǎn)生的代謝廢物及有毒物質(zhì)的清除,而甘氨酸作為一種非必需氨基酸,除參與蛋白質(zhì)和許多重要代謝性生理分子的合成外,還有抗炎和免疫調(diào)節(jié)作用,這可能與靈芝顯著的抗疲勞和免疫調(diào)節(jié)作用相關(guān)。
2.3.1 多糖含量
圖1 3 種靈芝子實體的水溶性粗多糖和堿溶性粗多糖提取率Fig. 1 Yield of crude polysaccharides extracted from three samples of G. lucidum and their polysaccharide contents using water extraction and alkali extraction methods
由圖1可知,3 種靈芝子實體中的水溶性粗多糖提取率相近,且均符合《藥典》(2015版)的標準。而堿溶性粗多糖提取率差異較大,其中吉林2號的最高,吉林1號的最低,但均顯著高于水溶性粗多糖。堿液較中性水能更有效破壞靈芝子實體細胞壁的纖維質(zhì)超聚結(jié)構(gòu),進而促進細胞內(nèi)物質(zhì)的溶出,包括蛋白質(zhì)、糖蛋白、多糖等,尤其是含有糖醛酸的多糖、酸性多糖和復合多糖等,從而使堿溶性粗多糖提取率顯著增加。由圖1還可知,堿溶性粗多糖中多糖含量低于水溶性粗多糖,一方面可能是由于堿溶性粗多糖中的酸性多糖在中性水中的溶解度較低,導致無法用苯酚-硫酸法檢出,另一方面可能是由于較強的堿液使某些多糖發(fā)生水解。
靈芝多糖是靈芝的主要活性成分之一[23-24],與靈芝的多種藥理活性和保健功效密切相關(guān),其含量是《藥典》(2015版)中判定靈芝品質(zhì)和藥用價值的重要指標之一,呂興萍等[25]研究發(fā)現(xiàn),影響靈芝多糖含量因素較為復雜,除產(chǎn)地因素外,還與靈芝的栽培技術(shù)、采收條件和預處理等有關(guān)。
2.3.2 單糖組成對比
9 種標準品單糖在高效液相色譜檢測中得到完全分離,各標準品單糖的出峰時間、標準曲線方程以及相關(guān)系數(shù)如表3所示。
表3 各標準品單糖的出峰時間和標準曲線Table 3 Peak times of monosaccharide standards and standard curves
將3 種不同來源靈芝子實體粗多糖分別進一步分離純化,所得純多糖的單糖組成檢測結(jié)果見表4。
表4 3 種靈芝子實體分離純化所得純多糖中單糖相對含量Table 4 Monosaccharide compositions of purified polysaccharides from three samples of G. lucidum
由表4可知,3 種樣品所得純多糖的單糖組成差異較大,其中從安徽1號分離純化所得純多糖主要由半乳糖、鼠李糖和核糖組成,從吉林1號分離純化的純多糖主要由半乳糖、葡萄糖醛酸、鼠李糖和葡萄糖組成,而吉林2號純多糖主要由木糖、葡萄糖、巖藻糖和鼠李糖組成,3 種靈芝子實體純多糖中均含有鼠李糖,安徽1號和吉林1號靈芝子實體多糖的主要單糖是半乳糖,占其質(zhì)量的50%以上,而在吉林2號靈芝子實體多糖中沒有檢測到半乳糖,其單糖組成主要是木糖。
單糖是多糖的組成單位,其組成和比例與多糖的高級結(jié)構(gòu)、溶解性和生物活性等密切相關(guān),如何高效、準確、穩(wěn)定地檢測多糖的單糖組成,一直是活性多糖品質(zhì)分析和質(zhì)量控制的熱點。關(guān)于靈芝多糖單糖組成的研究較多,如梁加貝等[26]采用高效毛細管電泳法測得靈芝多糖中葡萄糖、半乳糖、木糖、甘露糖的物質(zhì)的量比為4.5∶2.8∶1.3∶3.6,葉素丹[27]采用氣相色譜法測得靈芝多糖由葡萄糖、半乳糖、木糖、鼠李糖、阿拉伯糖和甘露糖組成,以葡萄糖和半乳糖為主。靈芝子實體多糖的單糖組成與靈芝產(chǎn)地、菌種、檢測方法等因素有關(guān),歸納起來,葡萄糖、半乳糖、木糖、鼠李糖、阿拉伯糖和甘露糖是靈芝子實體多糖中的主要單糖。
表5 3 種靈芝子實體的脂肪酸組成及其相對含量Table 5 Fatty acid compositions of three samples of G. lucidum
由表5可知,3 種靈芝子實體中,均檢出14 種脂肪酸,其中飽和脂肪酸8 種,不飽和脂肪酸6 種(包括單不飽和脂肪酸4 種,多不飽和脂肪酸2 種),3 種靈芝子實體的脂肪酸總含量由高到低依次:安徽1號>吉林2號>吉林1號。3 種靈芝子實體中不飽和脂肪酸占總脂肪酸的比例均超過65%,其中油酸相對含量最高,其次是棕櫚酸和亞油酸,這與以往的研究結(jié)果[28]相近。安徽1號的油酸和棕櫚酸含量最高,而吉林1號和吉林2號的棕櫚酸和亞油酸含量相近。
相對于靈芝子實體,靈芝孢子的脂肪酸組成和含量更高,所以以往的研究主要集中在靈芝孢子中。由表5可知,3 種靈芝子實體中的脂肪酸同樣以不飽和脂肪酸為主,且油酸相對含量均較高,其次是亞油酸和亞麻酸。油酸、棕櫚酸和亞油酸是對人體非常有益的3 種長鏈不飽和脂肪酸[29],油酸能抑制低密度脂蛋白的升高和減少高血脂的發(fā)生,而亞油酸能促進膽固醇的轉(zhuǎn)運,預防動脈粥樣硬化,從而降低心腦血管疾病的發(fā)生,亞油酸還具有增強人體抗氧化能力和免疫能力,促進生長發(fā)育的作用。亞麻酸是維持大腦和神經(jīng)系統(tǒng)的必需因子,缺乏亞麻酸會導致人體免疫力降低、疲勞、健忘、視力下降、動脈硬化等癥狀的發(fā)生。靈芝中不飽和脂肪酸的高比例對于其功效有重要意義。
表6 3 種靈芝子實體的微量元素含量Table 6 Microelement contents of three samples of G. lucidum mg/kg
由表6可知,在3 種靈芝子實體中,吉林1號的微量元素含量最豐富,除Cu和Zn含量較低外,其他微量元素含量均高于安徽1號和吉林2號,而安徽1號的Cu和Zn含量高于吉林1號和吉林2號。
雖然3 種靈芝子實體微量元素含量均符合國家標準,卻存在較大差異,即使是同一省內(nèi)不同區(qū)域的靈芝子實體,微量元素含量也相差較大。7 種主要微量元素中,Ca、Mg、Fe含量在3 種靈芝子實體中含量均較高,這與何晉浙等[18]的研究結(jié)果一致。Ca不僅是人體骨骼和牙齒的重要元素,還參與人體多種生命活動,且靈芝中的Ca主要以有機態(tài)形式存在,對于我國日常Ca攝入量不足的人群具有重要意義。Fe對免疫功能和生血有重要影響,缺Fe不僅會影響吞噬細胞功能,還會導致貧血。而Mg對于維持細胞的正常代謝和功能發(fā)揮起著重要作用,缺Mg會引起包括代謝綜合征、高血壓、II型糖尿病和冠狀動脈硬化型心臟病等多種慢性病。
圖2 3 種靈芝子實體靈芝酸A、靈芝酸B的含量Fig. 2 Total contents of ganoderic acid A and B in three samples of G. lucidum
由圖2可知,3 種靈芝子實體中靈芝酸A和靈芝酸B含量相差較大,安徽1號靈芝子實體中靈芝酸A和靈芝酸B的總含量(5.62 mg/g)最高,其次是吉林1號靈芝子實體(3.24 mg/g),吉林2號靈芝子實體的總含量(0.51 mg/g)最低。安徽1號的靈芝酸A含量顯著大于吉林1號和吉林2號,而安徽1號和吉林1號靈芝酸B含量相近?!端幍洹罚?015版)中規(guī)定,采用高氯酸比色法檢測靈芝子實體三萜質(zhì)量分數(shù)應不低于0.50%(以齊墩果酸計),而采用比色法測定容易受到靈芝中脂肪酸類成分的干擾,近年來,更多的研究采用高效液相色譜法檢測靈芝中的三萜類化合物,精確性顯著提高,但測定結(jié)果顯著低于比色法[30]。
靈芝酸是一類含有羧基的三萜類化合物,主要分為四環(huán)三萜與五環(huán)三萜,是靈芝中最主要的三萜類物質(zhì)。自1982年Kubota等首次從靈芝中分離得到靈芝酸A和B以來,已分離到的靈芝酸有100多種,如靈芝酸A、B、C、D、E、F、G、I、L、ma、md、mg等[31]。靈芝酸化學結(jié)構(gòu)復雜,藥理活性廣泛,具有抗病毒、抑菌、防治心血管疾病、保護肝臟和防治癲癇等功效[32],被認為是靈芝中與靈芝多糖同樣重要的功效活性成分,而日本更是以靈芝酸含量評價靈芝質(zhì)量的好壞,尤其是靈芝酸A和B,認為其含量越高,質(zhì)量越好。
靈芝在人工栽培過程中,其子實體化學成分會受到菌種、產(chǎn)區(qū)氣候、椴木品種,以及采后加工方法等因素的影響。本實驗對不同產(chǎn)地、同一產(chǎn)地不同地區(qū)靈芝子實體的營養(yǎng)成分和主要活性成分進行分析,結(jié)果表明雖然不同產(chǎn)地靈芝子實體化學成分的種類及其含量差異較大,但3 種靈芝子實體均有較高含量的Ca、Mg、Fe三種微量元素,以及較高含量的必需氨基酸和不飽和脂肪酸,而這些成分對于抗疲勞和增強運動能力,以及增強人體的抗氧化能力和免疫能力等都有顯著促進作用。多糖是靈芝中主要功效活性成分之一,對調(diào)節(jié)免疫力、抗腫瘤、抗衰老、保肝、提高機體耐缺氧能力等活性均具有顯著作用,3 種靈芝子實體的水溶性粗多糖提取率相近,但堿溶性粗多糖提取率卻存在著顯著差異,且純化多糖的單糖組成也不同。而3 種靈芝子實體中靈芝酸A和靈芝酸B含量,以及靈芝酸A和B的總含量差異均較大,其中安徽1號含量最高。分析結(jié)果為進一步完善靈芝子實體的質(zhì)量標準,以及根據(jù)功效活性制定靈芝質(zhì)量指標提供技術(shù)支持和數(shù)據(jù)參考。