唐清杰 嚴小微 唐力瓊 陳健曉 岑新杰

（1海南省農(nóng)業(yè)科學院糧食作物研究所/海南省農(nóng)作物遺傳育種重點實驗室，海口571100；2廣東省農(nóng)科院植物保護研究所，廣州510640；第一作者：Flyingfoxtqj@163.com；*通訊作者：hkcenxinjie@163.com）

白背飛虱和褐飛虱是東亞、南亞、東南亞等地水稻的主要害蟲[1]，2010-2011年，海南稻飛虱為害面積接近26.67萬hm2。白葉枯病是水稻上主要的細菌性病害，在我國華南、華中和華東以及其他東南亞稻區(qū)經(jīng)常暴發(fā)成災，是水稻高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)的重要限制因子[2-3]。稻瘟病也是華南水稻生產(chǎn)中主要的病害，近年來發(fā)生日益嚴重，選育和利用抗病品種是防治稻瘟病最經(jīng)濟、有效和安全的措施[4]。

為選育適合海南使用的抗病蟲品種（組合），提高海南水稻生產(chǎn)水平，本研究于2017年對7個不同類型水稻新種質(zhì)進行田間噴霧及接種抗性鑒定，以期為海南水稻抗病蟲育種提供參考。

1 材料與方法

1.1 稻瘟病鑒定

1.1.1 供試品種和接種菌株

供試品種：山欄糯2號、山欄陸1號、華香、海農(nóng)紅1號、海豐黑糯2號、?；?558、?；?27（海南省農(nóng)業(yè)科學院糧食作物研究所提供），廣陸矮4號（感病對照品種，廣東省農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所提供）。

人工接種菌株：選用華南稻區(qū)稻瘟病菌優(yōu)勢小種ZB和ZC群為主的菌株（廣東省農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所提供）。

1.1.2 稻瘟病鑒定方法

苗期人工接種鑒定：選用近年來代表性生理小種，在秧苗3～4葉期開展噴霧接種，接種時氣溫為25℃～28℃；接種后置于25℃～28℃的溫度條件下覆蓋黑暗保濕24 h，后定時噴霧保濕；7～10 d后等感病對照品種發(fā)病充分時調(diào)查葉瘟病級情況[5]。

穗頸瘟田間自然誘發(fā)鑒定：選擇霧多結露時間長的常發(fā)病稻區(qū)為試驗地，并選擇土質(zhì)肥沃、排灌方便的田塊為試驗田。供試品種浸種催芽后選擇條播或移栽，四周種植感病品種，在抽穗前增施1次氮肥，有利發(fā)病。黃熟后調(diào)查穗頸瘟[5]。

病級劃分及評價標準：葉瘟、穗頸瘟調(diào)查標準參照國家區(qū)試抗病性鑒定標準。根據(jù)綜合抗性指數(shù)開展抗性評價，品種綜合抗性指數(shù)=葉瘟平均病級×25%+穗瘟發(fā)病率病級×25%+穗瘟損失指數(shù)病級×50%[5]。

1.2 白葉枯病鑒定

1.2.1 供試品種和接種菌株

供試品種：山欄糯2號、山欄陸1號、華香、海農(nóng)紅1號、海豐黑糯2號、?；?558、?；?27（海南省農(nóng)業(yè)科學院糧食作物研究所提供），金剛30（感病對照品種，廣東省農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所提供）。

菌系選用具有代表性的優(yōu)勢菌系Ⅳ型，在協(xié)本氏培養(yǎng)基斜面上培養(yǎng)48～72 h后，用無菌水洗下菌液，配制成3億株/mL的菌液[5]（廣東省農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所提供）。

1.2.2 白葉枯病鑒定方法

人工接種法鑒定：晚稻秧齡控制在25 d內(nèi)；每個品種按序栽插1行，每行10叢，每叢1粒谷苗，株行距為17 cm×23 cm，每隔10個品種栽插感病品種作為對照；鑒定圃施肥水平高于一般大田；在水稻分蘗盛期剪葉接種，傍晚用手術剪刀蘸菌液剪去其中1行植株葉片頂部2 cm長，每叢接5片葉[5]。接種20 d后，感病對照品種病情穩(wěn)定達9級時調(diào)查，分級標準按照水稻種質(zhì)資源描述規(guī)范和數(shù)據(jù)標準[6]。

表1 三化螟鑒定評價標準

表2 褐飛虱鑒定評價標準

1.3 三化螟抗性鑒定

1．3．1 檢測品種和供試三化螟種群

供測品種：山欄糯2號、山欄陸1號、華香、海農(nóng)紅1號、海豐黑糯2號、海恢1558、?；?27（海南省農(nóng)業(yè)科學院糧食作物研究所提供），TKM6（抗蟲對照品種）和TN1（感蟲對照品種）（廣東省農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所保存）。三化螟種群2016年8月采自田間，待卵塊孵出幼蟲后，將幼蟲接在苗上。

1．3．2 檢測方法

于苗期進行鑒定：將供測水稻品種催芽后播在50 cm×40 cm、深25 cm塑料盆，每個品種播20～30粒，3次重復，隨機排列。種子萌發(fā)后第10 d間苗，每個處理保留壯秧苗10～15株，當秧苗長至3～4個分蘗，接入三化螟初孵1齡幼蟲，每叢10頭。接蟲后7 d，調(diào)查枯心苗數(shù)，并計算枯心率（枯心率=枯心數(shù)/總苗數(shù)×100%）和校正枯心率（校正枯心率=參試品種枯心率/感蟲對照品種枯心率×100%）。枯心苗率達到25%，試驗有效。

1.4 稻飛虱抗性鑒定

1．4．1 檢測品種和供試褐飛虱種群

供測品種：山欄糯2號、山欄陸1號、華香、海農(nóng)紅1號、海豐黑糯2號、海恢1558、海恢227（海南省農(nóng)業(yè)科學院糧食作物研究所提供），RATHU HEENATI（抗蟲對照品種）和TN1（感蟲對照品種）（廣東省農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所保存）。供試褐飛虱種群采自田間，實驗室飼養(yǎng)6代，為生物型1、2混合種群。

1．4．2 檢測方法

于苗期進行鑒定：將供測水稻品種催芽后播在40 cm×30 cm、深10 cm的塑料盆，每個品種播30～40粒，3次重復，隨機排列。種子萌發(fā)后第4 d間苗，每行保留壯秧苗30株。當秧苗長至3片葉時，接入2～3齡褐飛虱若蟲，平均每株苗接蟲5頭。當感蟲對照品種TN1受害達到9級時對供測品種進行評級。所得數(shù)據(jù)采用加權平均進行總體測評。

2 結果與討論

2.1 稻瘟病抗性鑒定結果

從表3可見，對稻瘟病表現(xiàn)為抗的種質(zhì)為?；?558，中抗的為海農(nóng)紅1號，其他種質(zhì)表現(xiàn)為中感、感和高感。

2.2 對白葉枯病抗性鑒定結果

從表4可見，對白葉枯病優(yōu)勢致病菌系Ⅳ型菌表現(xiàn)為抗病的種質(zhì)為海農(nóng)紅1號、華香和?；?27，表現(xiàn)中抗的為?；?558和海豐黑糯2號，其他種質(zhì)皆表現(xiàn)為高感。

2.3 三化螟抗性鑒定檢測結果

當感蟲對照品種TN1達到100%的枯心率，抗蟲對照品種TKM6為33．07%，鑒定有效。從表5可見，表現(xiàn)為抗三化螟的品種有恢復系?；?558和?；?27，校正枯心率21%～40%；表現(xiàn)中抗的品種為海豐黑糯2號，校正枯心率41%～60%；表現(xiàn)感蟲的品種為華香，校正枯心率61%～80%；表現(xiàn)高感的為海農(nóng)紅1號、山欄糯1號和山欄陸1號，校正枯心率達到100%。

表3 稻瘟病抗性鑒定結果

表4 白葉枯病抗性鑒定結果

表5 三化螟鑒定結果

表6 褐飛虱鑒定抗性鑒定結果

2.4 稻飛虱抗性鑒定結果

從表6可見，山欄糯2號受害等級為5～9級，以9級為主，總體抗性評級為高感；山欄陸1號受害等級全部為9級，總體抗性評級為高感；華香受害等級為5級和9級，總體抗性評級為高感；海農(nóng)紅1號受害等級分布于5級和9級，總體抗性評級為高感；海豐黑糯2號受害等級為5級和9級，以5級苗為多，總體抗性評級為感；?；?558受害等級為5～9級，以5級苗為多，總體抗性評級為感；?；?27受害等級分布于5級和9級，以5級苗為多，總體抗性評級為感。

3 結論與討論

從7個供測的水稻新種質(zhì)的抗性鑒定結果來看，稻瘟病抗性種質(zhì)1個，中抗1個。白葉枯病優(yōu)勢致病菌系Ⅳ型菌抗性種質(zhì)3個，中抗種質(zhì)2個。三化螟抗性種質(zhì)2個，皆為恢復系，中抗1個。沒有發(fā)現(xiàn)抗稻飛虱材料。

雖然供測材料較少，但雙抗甚至三抗的種質(zhì)卻很多；恢復系海恢1558抗稻瘟病和三化螟，中抗白葉枯??；恢復系?；?27抗白葉枯病和三化螟；紅米海農(nóng)紅1號抗白葉枯病，中抗稻瘟??；海豐黑糯2號中抗白葉枯病和三化螟。這些新種質(zhì)或者品種在海南稻區(qū)推廣種植能有效抵御病蟲害的發(fā)生。