雷燕妮,張小斌,劉 棟

(1.商洛學(xué)院 生物醫(yī)藥與食品工程學(xué)院、中國中醫(yī)科學(xué)院商洛中藥材GAP科研工程中心,陜西 商洛 726000；2.商洛學(xué)院 健康管理學(xué)院,陜西 商洛 726000)

垂柳(Salixbabylonica.L)系楊柳科柳屬落葉喬木，其樹葉以及新發(fā)嫩枝都有一定的藥物價值，并在我國醫(yī)藥記錄上就有所記載[1]。其中在《本草綱目》[2]中所記，柳為性較寒，并且味苦，其主要作用為利尿、消腫。這種最為尋常的植物中，有著比較廣泛的藥物性質(zhì)，并在以后有著極大的開發(fā)空間。垂柳葉中總黃酮成分的藥理作用主要在于增強機體免疫并能夠直接對毛囊起到一個很好的修復(fù)作用，所以能夠直接增強其中的免疫力，并能夠極大的促進血液的流通，從而實現(xiàn)促進性作用[3,4]。目前，已有相關(guān)文獻報道垂柳葉中化學(xué)物質(zhì)的提取與分離，這方面的論述，所以可能是柳樹本身為我國的一種常見樹木，并且在中國有著古老的歷史，歷史上有很多非常時期，人們都以柳葉為食物來食用。生長有相當大的一個促進效果，并且對于一些已經(jīng)化療的毛囊有著再修復(fù)的作用[6]。通過實驗后的對比可以看出，垂柳可以直接影響到小白鼠的一個生長，并能夠進一步的去防止毛發(fā)的脫落提出了相應(yīng)的參考依據(jù)。

1 材料與儀器

1.1 材料與試劑

垂柳葉：2017年4月5日采自商洛學(xué)院校園內(nèi)，由商洛學(xué)院張小斌教授鑒定為楊柳科柳屬落葉喬木垂柳葉子，采后經(jīng)自然陰干、粉碎(過40目篩)，備用。

試劑：復(fù)方醋酸地塞米松軟膏(每克含醋酸地塞米松0.75 mg，新鄉(xiāng)市琦寧藥業(yè)有限公司)；松香：上海創(chuàng)真化工有限公司；去離子水；石蠟(廣州逸明化工有限公司)；環(huán)磷酰胺注射液(江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司生產(chǎn))。

1.2 實驗儀器

J305藥材粉碎機(長沙市卓成醫(yī)療器械有限公司)；FA1204B電子天平(上海精密儀表有限公司)；SY=360提取器 ；RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海汗諾儀器有限公司)；TD5A 離心機(常州市萬合儀器制造有限公司)。

1.3 試驗動物

SD健康小白鼠，體重為18～23 g，購自第四軍醫(yī)大學(xué)動物實驗中心。

2 試驗方法

2.1 受試藥物的制備

(1)垂柳葉乙醇提取物的制備。精密稱量垂柳葉粉末10 kg于燒瓶中，按料液比1 ∶3加入75%乙醇混勻，浸泡24 h后超聲提取3次，每次10 min，將兩種提取液進行合并，并逐步的冷卻達到對離心的提??；這樣就會直接造成轉(zhuǎn)發(fā)減壓的效果，并會使其中所配置的類型實現(xiàn)組量的離析，通過(0.1 g·mL-1)以及中劑量組(0.05 g·mL-1)和低劑量組(0.01 g·mL-1)來實現(xiàn)提取液的一個再分化。

(2)真空干燥后，配制成0.01 g·mL-1的受試溶液50 mL。對于垂柳葉的一個應(yīng)用來講，這種乙酸提取物主要是進行內(nèi)部結(jié)構(gòu)的發(fā)散并提取的，把2.1.1制備的垂柳葉通過多種的離析方法來對此進行分化，并將兩種提取液進行合并，直接將其實現(xiàn)濃縮，這樣就會成為一種干粉狀。真空干燥后，配制成0.01g·mL-1的受試溶液50 mL。

2.2 小鼠脫毛模型建立[7]

設(shè)定正常小白鼠80只，根據(jù)雌雄性來實現(xiàn)一個變化，將其中的適應(yīng)性分別設(shè)定位5 d，將提前設(shè)定好的松香以及石蠟進行等比例的協(xié)調(diào)，并將兩者進行熱融化處理，使至冷卻到一定合適的溫度中來進行。將所需麻醉的小鼠直接涂到其背部，并以一個固定面積為基本點來進行逐步的脫落，這樣才能會直接終止對毛發(fā)的增長，并將會誘導(dǎo)其生長期的發(fā)育效果以及生長狀態(tài)。能夠在形態(tài)差別上有所改變[8]。根據(jù)所設(shè)立的實驗將其中所脫毛的機器進行設(shè)定分組。一組用以探究垂柳葉對正常毛發(fā)的生長促進作用；另一組則用以探究垂柳葉對毛囊受損后脫毛的修護作用，從而對防脫生發(fā)作用做進一步研究。

2.3 試驗動物分組及給藥

對兩種毛發(fā)差別大的小鼠進行分組，并隨機分為六個小組，將一半用以對正常毛發(fā)的生長促進作用進行研究；那么剩下的部分就能夠以毛囊脫落的形式來進行初步的實驗，那么具體的情況可以以1、2來進行表述。

2.3.1 促進正常毛發(fā)生長試驗組的分組情況 根據(jù)兩種分組可見，這兩種小鼠的飼養(yǎng)主要是以藥物成分為主，將這兩種脫毛的狀況通過第2天的觀察來進行對比，并連續(xù)性的涂至第15天。

2.3.2 減緩化療損傷性脫毛試驗組分組情況 將其中的具體分組設(shè)定為兩種假設(shè)形式，對于小鼠的正常飼養(yǎng)來講，毛發(fā)的脫落也將會和背部涂抹有重大的關(guān)系，并根據(jù)溶液的不同來實現(xiàn)生長的一個初步導(dǎo)向。那么根據(jù)毛發(fā)脫落后的一個觀測，可以將其使用為期兩天的一個簡單測試，能夠根據(jù)毛囊的生長性來實現(xiàn)一個基本背部的處理。

表1 促進正常毛發(fā)生長基本記錄和狀況

表2 減緩損傷脫毛試驗組的具體形式

3 結(jié)果與分析

3.1 促進正常毛發(fā)生長作用試驗結(jié)果及分析

由表3可以看出，空白對照組和醇提物乙酸乙酯萃取組經(jīng)過藥物作用后的第9天，經(jīng)過對燈下的一個基本處理來實現(xiàn)一個對絨毛的基本設(shè)定，根據(jù)其中的提取液來制定出一個較好的準則。涂藥第7天出現(xiàn)相同現(xiàn)象；在第11天，在兩組的對照中，小鼠的一個生長狀態(tài)是非常好的，并且根據(jù)固定時間的觀察可以看出，這三種小鼠的毛發(fā)都是良好的一個狀態(tài)。且醇提取物組優(yōu)于其他兩組；對于空白組的一個基本對照來講，其他兩種小組的毛發(fā)都有著不同的基本變化狀態(tài)，并且其中的提取物也相對明顯。垂柳葉醇提取物對正常毛發(fā)的生長促進作用較顯著，其次為醇提物的乙酸乙酯萃取物。那么對于這兩種基本狀況來講，能夠?qū)π“资蟮奶岣咭彩且粋€較為準確的事實，所以本實驗過程中是不能夠有效對此進行實際探索的。

3.2 減緩化療損傷性脫毛試驗結(jié)果及分析

根據(jù)表4來看，這種小白鼠的基本注射狀況是在第3天出現(xiàn)變化的，并能夠基本上實現(xiàn)一個背部狀況的脫落以及相應(yīng)的基本變化規(guī)律。毛發(fā)脫落情況進一步加重，除醇提取物組外，其他兩組小鼠均出現(xiàn)明顯的大面積背毛脫落；第8天，空白對照組及乙酸乙酯萃取物組的小鼠背毛全部脫盡；第10天，除醇提取物組1只小鼠背毛脫落程度次于其他小鼠外，其余小鼠背毛均已全部脫盡。結(jié)果表明，垂柳葉醇提取物可有一定的效果，并且在損傷性皮膚中也有相應(yīng)的參考對比。

表3 促進正常毛發(fā)生長作用試驗結(jié)果

注：“-”表示沒有毛發(fā)再生，“+”表示很少絨毛生長，“++”表示較明顯毛發(fā)生長，“+++”表示毛發(fā)基本狀態(tài)良好，“++++”表示毛發(fā)正常變化無異，“*”代表所述狀況顯著。

表4 緩解化療損傷性脫毛的具體實驗

注："*"表示與空白對照組比較差異顯著(P<0.05，n=8)。

4 結(jié)論

一般情況下都是對小鼠的一個模型建立，并能夠根據(jù)其中的統(tǒng)計來做出柳葉提取的一個具體范圍指數(shù)，并根據(jù)其中的再生長實現(xiàn)一個較為精確的促進值：垂柳葉乙醇提取物對正常毛發(fā)的生長促進作用較為顯著，醇提物的乙酸乙酯萃取物次之。

環(huán)磷酰胺作為化療藥物可破壞新生毛發(fā)，故在造模時需使小鼠毛囊處于生長期；筆者試驗用松香石蠟脫毛劑對小鼠有著重要的輔助作用，能夠準對性的提出一些基本的誘導(dǎo)處理。并能夠根據(jù)其中的后期增長來實現(xiàn)一個注射性的基本要求，這樣的話就能夠造成一個基本的脫毛實驗和具體的損傷程度檢測，這樣就會直接起到一個延緩的作用。垂柳葉乙醇提物和乙醇提物的乙酸乙酯萃取物均具有一定的減緩毛發(fā)脫落，修護環(huán)磷酰胺所致的毛囊受損，并與參照組形成一個有效的差異對比。所以垂柳在應(yīng)用中都將會直接形成一種產(chǎn)品保健的方法來對此實現(xiàn)有利的價值分類和開發(fā)。