姜洪 羅蘭 劉兆良 王浩祺 袁忠林

摘要：本試驗(yàn)采用殘留法，于第1天和 1、2、3、4、5、6、7、8、9周對(duì)4種不同緩釋載體反口橡膠塞、聚乙烯軟管（細(xì)，內(nèi)徑2 mm×外徑3 mm）、聚乙烯軟管（中，內(nèi)徑4 mm×外徑6 mm）及濾紙片上的蘋(píng)果蠹蛾主要性信息化合物E8， E10-十二碳二烯-1-醇含量進(jìn)行測(cè)定，并比較其釋放速率。結(jié)果表明，在室內(nèi)自然條件下，反口橡膠塞中蘋(píng)果蠹蛾性信息化合物殘留量在第2～5周時(shí)大于0.629 mg，第6周以后緩慢降低，到第9周剩余0.280 mg。而其它載體材料對(duì)蘋(píng)果蠹蛾性信息化合物的緩釋效果較差，1周之內(nèi)就將絕大多數(shù)的性信息化合物釋放掉。因此，反口橡膠塞可作為誘芯的載體用于蘋(píng)果蠹蛾的監(jiān)測(cè)與防治。

關(guān)鍵詞：蘋(píng)果蠹蛾;性信息化合物;緩釋載體;釋放速率

中圖分類號(hào)：S436.61文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A文章編號(hào)：1001-4942（2019）02-0103-04

Release Rate of Cydia pomonella （Lepidoptera： Tortricidae）

Sex Pheromones on Different Dispensers

Jiang Hong， Luo Lan， Liu Zhaoliang， Wang Haoqi， Yuan Zhonglin

（College of Plant Health and Medicine， Qingdao Agricultural University/ Key Lab of

Integrated Crop Pest Management of Shandong Province， Qingdao 266109， China）

AbstractThe residues of main sex pheromone compound in 4 different dispensers， rubber， PE pipe （middle， inside diameter as 4 mm and outside diameter as 6 mm）， PE pipe （fine， inside diameter as 2 mm and outside diameter as 3 mm） and filter paper， were measured on interval each week and last 9 weeks by gas chromatography， and their release rate were compared. The results showed that the codling moth sex pheromone residues in rubber dispenser were greater than 0.629 mg from the 2nd to the 5th week， and slowly decreased from the 6th weeks; it remained 0.280 mg in the 9th week. The other dispensers had faster release rates， and most of the sex pheromone was released in one week. In conclusion， the rubber could be used as dispenser to monitor and control codling moth.

KeywordsCydia pomonella; Sex pheromone; Controlled-release dispenser;Release rate

蘋(píng)果蠹蛾[Cydia pomonella （L.）]是一種毀滅性的仁果類果樹(shù)蛀果害蟲(chóng)，主要危害蘋(píng)果、梨等果實(shí)，造成大量蛀蟲(chóng)果，嚴(yán)重影響生產(chǎn)和銷售[1，2]。它于1953年在我國(guó)新疆發(fā)現(xiàn)，到2015年已在新疆、甘肅、寧夏、內(nèi)蒙古、吉林、遼寧和黑龍江發(fā)生危害[3，4]。作為重要的檢疫害蟲(chóng)，阻斷其擴(kuò)散與傳播是主要的防治措施，而利用昆蟲(chóng)性信息素監(jiān)測(cè)和控制其發(fā)生與為害是一種重要的手段，該技術(shù)具有專一性強(qiáng)、高效、無(wú)污染、不傷益蟲(chóng)等優(yōu)點(diǎn)，可滿足農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的要求[5]。

在利用昆蟲(chóng)性信息素監(jiān)測(cè)和誘殺中，誘捕器的類型、放置高度及密度、性信息素的誘芯材料和性誘劑的成分及含量是十分重要的，它們直接影響誘捕器的誘捕效果和有效使用時(shí)效。為了提高誘捕效果，國(guó)內(nèi)外專家學(xué)者在此方面進(jìn)行了大量研究。目前研究表明，蘋(píng)果蠹蛾的性信息素主要成分為E8， E10-十二碳二烯-1-醇，田間試驗(yàn)結(jié)果表明，三角式誘捕器的效果較好[6];在田間應(yīng)用1.25 mg性誘劑的誘芯誘蛾量最多，高于5 mg或低于0.5 mg劑量的誘芯誘蛾量明顯下降[7]。誘芯材料對(duì)昆蟲(chóng)性信息化合物的利用效率差別很大，但國(guó)內(nèi)關(guān)于蘋(píng)果蠹蛾性信息素緩釋載體材料比較的研究報(bào)道很少。其中李晶等[8]發(fā)現(xiàn)新型毛細(xì)管誘芯CP20104A、CP20104B、CP20104C、CP20104D、CP20104E的誘捕性能較橡膠誘芯的強(qiáng);楊興翠等[9]探索過(guò)蘋(píng)果蠹蛾信息素微膠囊的制備及其緩釋效果。為篩選載體材料易得、成本低廉的誘芯材料，本研究利用氣相色譜法比較4種緩釋載體對(duì)蘋(píng)果蠹蛾性信息化合物的緩釋效果，旨在為研制效果好的緩釋材料并將其用于田間蘋(píng)果蠹蛾的監(jiān)測(cè)與防控奠定基礎(chǔ)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

蘋(píng)果蠹蛾主要性信息化合物（E8， E10-十二碳二烯-1-醇）購(gòu)自美國(guó)Bedoukian公司，產(chǎn)品純度為95%;正己烷為色譜純，天津市津東天正化學(xué)試劑廠生產(chǎn)。

緩釋載體：聚乙烯軟管（細(xì)）和聚乙烯軟管（中），內(nèi)徑×外徑分別為2×3、4×6 mm，網(wǎng)購(gòu)于曼特拉旗艦店;濾紙片，杭州特種紙業(yè)有限公司生產(chǎn);反口橡膠塞（綠色），底部直徑0.9 cm，上部直徑0.5 cm，高1.9 cm，購(gòu)于北京中捷四方生物科技有限公司。

儀器設(shè)備：氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（Agilent 6890N-5973N）、氣相色譜儀（Agilent 7890A），由美國(guó)安捷倫科技有限公司生產(chǎn)。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1蘋(píng)果蠹蛾性信息化合物含量測(cè)定方法參照陳傳秀等[10]的方法進(jìn)行。氣相色譜條件：首先使用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（Agilent 6890N-5973N）進(jìn)行GC-MS檢測(cè)，確定蘋(píng)果蠹蛾性信息化合物的保留時(shí)間。采用7890A氣相色譜儀進(jìn)行樣品分析，非極性毛細(xì)管色譜柱為30 m×0.25 mm×0.25 μm。升溫程序：50℃保持2 min，以5 ℃·min-1升溫至220℃，保持10 min。進(jìn)樣器溫度220℃，柱頭壓力103.43 kPa，隔墊吹掃流量2.6mL·min-1，不分流進(jìn)樣模式（保持0.75min），分流出口吹掃流量60 mL·min-1，載氣節(jié)省20mL·min-1;色譜柱流速1.5 mL·min-1，檢測(cè)器溫度230℃，He流量20 mL·min-1;空氣流量400 mL·min-1;尾吹氣流量41.915mL·min-1。用Agilent Chemstation軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)采集。

1.2.2蘋(píng)果蠹蛾性信息化合物標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制參照楊興翠等[9]的方法進(jìn)行。精確稱取0.1000 g蘋(píng)果蠹蛾性信息化合物，用正己烷溶解后轉(zhuǎn)移到100 mL容量瓶中定容。分別吸取0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mL上述溶液于10 mL比色管內(nèi)，加正己烷至10 mL刻度，得到濃度為0、0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30 mg/mL溶液，用氣相色譜儀（Agilent 7890A）檢測(cè)不同濃度對(duì)應(yīng)的峰面積，以濃度為縱坐標(biāo)，峰面積為橫坐標(biāo)，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.3蘋(píng)果蠹蛾性信息化合物不同載體誘芯的制備參照朱虹昱等[11]的方法制備載體誘芯。將蘋(píng)果蠹蛾性信息化合物配制成質(zhì)量濃度為100mg/mL的正己烷溶液，將10 μL溶液用微量進(jìn)樣器加到上述4種不同載體中，溶劑自然揮發(fā)后，每個(gè)緩釋載體就成為含性信息化合物1 mg的誘芯;空白誘芯載體用等量的正己烷。

1.2.4不同載體、不同時(shí)間蘋(píng)果蠹蛾性信息化合物殘留量的測(cè)定將制備好的不同載體緩釋誘芯懸于室內(nèi)，分別于第1天和1、2、3、4、5、6、7、8、9周取樣測(cè)定性信息化合物殘留量，比較不同載體材料的緩釋速率，每處理3次重復(fù)。將取樣的不同載體材料誘芯剪碎，加入3 mL正己烷，提取24 h后，取1 mL提取液注入干凈的色譜樣品瓶中，蓋緊瓶蓋并于4℃冰箱中保存待測(cè)。為確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，所有樣品于制備完成后集中在氣相色譜上進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)時(shí)用微量進(jìn)樣器取1 μL提取液用氣相色譜檢測(cè)，測(cè)定峰面積，與同一時(shí)期制備的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行對(duì)比計(jì)算殘留量。

1.3數(shù)據(jù)處理

根據(jù)3次重復(fù)峰面積的平均值與同一時(shí)間測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算所測(cè)樣品中蘋(píng)果蠹蛾性信息化合物含量，再根據(jù)稀釋倍數(shù)換算成每種載體性信息化合物的殘留量。用Microsoft Excel 2007進(jìn)行數(shù)據(jù)處理并作圖，使用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行方差分析與擬合。

2結(jié)果與分析

2.1蘋(píng)果蠹蛾性信息化合物含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線

蘋(píng)果蠹蛾性信息化合物在色譜樣品瓶中貯存時(shí)可能會(huì)發(fā)生降解、吸附或揮發(fā)，因此測(cè)定了不同時(shí)間蘋(píng)果蠹蛾性信息化合物含量并制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，以此來(lái)校正不同時(shí)間誘芯載體中性信息化合物的殘留量。以蘋(píng)果蠹蛾性信息化合物的濃度對(duì)峰面積平均值進(jìn)行回歸，得到不同時(shí)間的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，由表1可知，在不同時(shí)間標(biāo)準(zhǔn)曲線呈良好的線性關(guān)系。

2.2蘋(píng)果蠹蛾性信息化合物在不同載體中的緩釋情況

由圖1可知，反口橡膠塞和聚乙烯軟管（中）載體中蘋(píng)果蠹蛾性信息化合物隨時(shí)間延長(zhǎng)基本呈先快后慢的下降趨勢(shì)。經(jīng)測(cè)定，不同時(shí)間取樣的不同載體中性信息化合物含量存在差異。具體表現(xiàn)為第1天，反口橡膠塞、聚乙烯軟管（中）、聚乙烯軟管（細(xì)）和濾紙上性信息化合物殘留量分別為0.9987、0.8767、0.6495、0.4083 mg;第1周，反口橡膠塞、聚乙烯軟管（中）、聚乙烯軟管（細(xì)）和濾紙上殘留量分別為0.9011、0.2361、0.0998、0 mg;第2周反口橡膠塞、聚乙烯軟管（中）和聚乙烯軟管（細(xì)）殘留量分別為0.6628、0.0804、0 mg;從第3周開(kāi)始，反口橡膠塞、聚乙烯軟管（中）中的性信息化合物緩慢減少，反口橡膠塞中的殘留量在第5周大于0.629 mg，第6周以后小于0.5 mg;聚乙烯軟管（中）中的殘留量自第3周開(kāi)始均小于0.1 mg;第9周反口橡膠塞中的殘留量為0.280 mg。由此可得，反口橡膠塞是4種載體中緩釋效果最好的材料，其緩釋效果可達(dá)9周以上。方差分析表明，反口橡膠塞中蘋(píng)果蠹蛾性信息化合物殘留量在第2～5周之間、7～9周之間差異不顯著（P>0.05）。

3討論與結(jié)論

蘋(píng)果蠹蛾是一種重要的檢疫性害蟲(chóng)，采用昆蟲(chóng)信息化合物制備的仿生誘芯對(duì)其進(jìn)行監(jiān)測(cè)、誘殺具有重要意義。良好的緩釋材料對(duì)于害蟲(chóng)的誘集時(shí)間、誘集效果十分重要。本研究通過(guò)4種緩釋載體的篩選，得出反口橡膠塞對(duì)蘋(píng)果蠹蛾性信息化合物的緩釋效果最好，是制作蘋(píng)果蠹蛾誘芯的較好材料。

本試驗(yàn)只研究了不同載體對(duì)蘋(píng)果蠹蛾性信息化合物主要成分的緩釋效果，對(duì)不同配比的各成分以及添加抗氧化劑的緩釋情況未有涉及。蘋(píng)果蠹蛾性信息化合物不同成分的配比、抗氧化劑添加后的緩釋效果及田間誘蛾試驗(yàn)還需進(jìn)一步研究。

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