郭曉芳

(河南省直屬機(jī)關(guān)第一門診部藥劑科，河南 鄭州 450000)

革蘭陰性細(xì)菌是醫(yī)院感染的主要菌株，其中銅綠假單胞菌最為常見。近年來隨著抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，抗菌藥物的耐藥性越來越明顯，為細(xì)菌性感染的治療帶來巨大困難，已經(jīng)成為臨床工作的重點與難點[1]。目前，我國臨床應(yīng)用的抗菌藥物種類以第三代頭孢菌素最為常見，但是隨著抗菌藥物的廣泛使用，細(xì)菌會產(chǎn)生多種內(nèi)酰胺酶，內(nèi)酰胺酶中所含的ESBLs會抑制第三代和第四代頭孢菌素內(nèi)酰胺類抗生素的抗菌作用，提高細(xì)菌的耐藥性[2]。銅綠假單胞是臨床中常見的革蘭陰性細(xì)菌之一[3]，尤其在ICU、呼吸科、兒科中非常常見，銅綠假單胞菌會使機(jī)體菌群失調(diào)，為銅綠假單胞菌的生長與繁殖創(chuàng)造了良好的條件，同時能夠引起多系統(tǒng)、多臟器、多部位感染。為更好地掌握抗菌藥物臨床使用及耐藥性，選取2017年1月至2017年12月期間我院微生物室分離出的131株頭孢他啶耐藥(MIC≥16 μg·ml-1)銅綠假單胞菌作為研究對象，分析銅綠假單胞菌對β-內(nèi)酰胺類抗生素的耐藥性，為今后臨床用藥工作提供參考，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 臨床資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月至2017年12月期間我院微生物室分離出的131株頭孢他啶耐藥(MIC≥16μg·ml-1)銅綠假單胞菌作為研究對象，菌株來源：痰液33株、膿液42株、分泌物26株、引流液13株、尿液17株。

1.2 方法

1.2.1藥敏試驗

采用K-B法進(jìn)行藥敏試驗，操作按照臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(2011年)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，所有操作與藥敏結(jié)果判讀均由同一實驗室人員完成；按照CSLI/NCCLS(2005年)文件換算標(biāo)準(zhǔn)計算耐藥率。

1.2.2金屬β-內(nèi)酰胺酶的檢測

采用紙片協(xié)同法進(jìn)行β-內(nèi)酰胺酶檢測[2]，具體如下：先將本組131株菌株制備成菌液(0.5麥?zhǔn)蠁挝?，均勻地涂布在M-H瓊脂平板(Oxoid公司)上，并將2張抗菌藥物紙片(頭孢他啶、頭孢他啶克拉維酸、頭孢噻肟、頭孢噻肟克拉維酸，美國BBL公司)貼在平皿上，紙片之間相距2 cm，在其中1張紙片上滴EDTA 5 μL，結(jié)果判斷陽性標(biāo)準(zhǔn)：含EDTA的亞胺培南紙片的抑菌圈直徑相對于亞胺培南紙片增加6 cm，即說明該菌株可以產(chǎn)金屬酶。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS20.0軟件分析，計數(shù)資料采用百分比表示，數(shù)據(jù)對比采取χ2校驗，P<0.05，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 β-內(nèi)酰胺酶檢測與藥敏試驗結(jié)果

本組131株銅綠假單胞菌株中，共檢出產(chǎn)金屬β-內(nèi)酰胺酶菌株28株，陽性率為21.37%。銅綠假單胞菌對頭孢曲松的耐藥率為71.76%，對慶大霉素、氨曲南、頭孢哌酮的耐藥率分別為42.75%、44.28%與49.62%，銅綠假單胞菌對哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、頭孢哌酮/舒巴坦、頭孢他啶、左氧氟沙星、哌拉西林、頭孢吡肟以及亞胺培南的耐藥率均<40%，見表1。

表1 藥敏試驗

2.2 陽性與陰性菌株藥敏試驗結(jié)果

金屬β-內(nèi)酰胺酶陽性菌株對11種抗生素的耐藥率均明顯高于金屬β-內(nèi)酰胺酶陰性菌株(P<0.05)，見表2。

表2 β-內(nèi)酰胺酶陽性與陰性菌株藥敏試驗結(jié)果對比(n(%))

注：與陽性組比較，*P<0.05。

3 討論

銅綠假單胞菌是一種常見的條件致病菌，能夠?qū)е氯矶嗯K器、多系統(tǒng)、多部位感染。調(diào)查顯示，老年患者與兒童患者由于體質(zhì)較差，抵抗力較低，在治療期間通常導(dǎo)致患者體內(nèi)菌群失調(diào)，微生態(tài)失衡，為銅綠假單胞菌的繁衍創(chuàng)造了良好條件。

銅綠假單胞菌對β-內(nèi)酰胺類抗生素具有明顯的耐藥性，本組研究中，131株銅綠假單胞菌株中，共檢出產(chǎn)金屬β-內(nèi)酰胺酶菌株28株，陽性率為21.37%。其中銅綠假單胞菌對頭孢曲松的耐藥率最高，其次分別為頭孢哌酮、氨曲南和慶大霉素，銅綠假單胞菌對哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、頭孢哌酮/舒巴坦、頭孢他啶、左氧氟沙星、哌拉西林、頭孢吡肟以及亞胺培南的耐藥率均<40%。可以發(fā)現(xiàn)銅綠假單胞菌對氨基糖苷類抗菌藥物較更為敏感，可能與其產(chǎn)金屬β-內(nèi)酰胺酶有關(guān)。因此，對于頭孢他啶耐藥的銅綠假單胞菌可以根據(jù)藥敏譜給予相應(yīng)的抗菌藥物，并考慮與碳青霉烯類、氨基糖苷類等藥物聯(lián)合用藥，以提高治療效果，減少耐藥菌株產(chǎn)生[5-6]。

另外，研究還發(fā)現(xiàn)金屬β-內(nèi)酰胺酶陽性菌株對11種抗生素的耐藥率均明顯高于金屬β-內(nèi)酰胺酶陰性菌株，說明銅綠假單胞菌對β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物存在明顯耐藥性的主要機(jī)制為產(chǎn)金屬β-內(nèi)酰胺酶，因此在臨床治療中要及時開展細(xì)菌培養(yǎng)和藥敏試驗，以促進(jìn)合理用藥，避免耐藥性的發(fā)生。