邱立東 朱榮生 黃華泥 徐五星 任 易 陳 軍 陳麗峰 周 菁

(湖北省赤壁市人民醫(yī)院檢驗科 赤壁 437300)

近年來，抗生素在中國的養(yǎng)豬業(yè)得到了廣泛的應(yīng)用，豬的發(fā)病率和死亡率得到了有效地控制，但細(xì)菌的耐藥率也在增長。β-內(nèi)酰胺類抗生素是用作治療豬源性大腸桿菌感染的常用一類藥物，β-內(nèi)酰胺類抗生素可分為：青霉素類、頭孢菌素類、單酰胺環(huán)類、碳青霉烯類和青霉烯類酶抑制劑等[1～2]。β-內(nèi)酰胺類抗生素的抗菌機(jī)制為抑制胞壁的青霉素結(jié)合蛋白，從而阻礙細(xì)胞壁粘肽合成，使細(xì)菌胞壁缺損，菌體膨脹裂解[3]。

為治療致病性大腸桿菌的感染，養(yǎng)豬場大量使用氨芐青霉素，導(dǎo)致其耐藥率增加[4～5]。查閱近十年的文獻(xiàn)報道中，從養(yǎng)殖場中分離的大腸桿菌已經(jīng)逐漸對我國常用的獸藥抗生素產(chǎn)生了不同程度的抗藥性。然而，在這些報告中，關(guān)于大腸桿菌對氨芐青霉素的抗性描述在地區(qū)和時間上有些零碎和分散，缺乏系統(tǒng)的對中國大腸桿菌耐藥性的總體情況和趨勢的研究數(shù)據(jù)。 因此，本文搜索了數(shù)據(jù)庫中所有關(guān)于豬場中分離大腸桿菌的耐藥性的文章，并進(jìn)行了Meta分析。

1 材料與方法

1.1 搜索和選擇標(biāo)準(zhǔn)

遵循系統(tǒng)評價和Meta分析(PRISMA)指南首選報告項目，檢索了PubMed、EMBASE、EBSCO、ISI Web of Knowledge、中國國家知識基礎(chǔ)設(shè)施(CNKI)和萬方(中國)數(shù)據(jù)庫，以確定2008年1月～2017年12月發(fā)布的中國豬分離的大腸桿菌耐藥性研究。 檢索詞如下：“豬”、“耐藥性”、“抗生素耐藥性”、“β-內(nèi)酰胺類”、“青霉素類”、“頭孢菌素類”、“單酰胺環(huán)類”、“碳青霉烯類”、“大腸桿菌”、“豬原性大腸桿菌”、“華中”、“華東”、“華北”、“華南”、“東北”、“西北”、“西南”。在英文文獻(xiàn)中，檢索詞需要添加“中國”，因為英文文獻(xiàn)中會匯報其他國家。

1.2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)為：(1)研究中可獲得氨芐青霉素的耐藥率；(2)可獲得大腸桿菌菌株總數(shù)(或可用于計算它們的數(shù)據(jù))。 排除標(biāo)準(zhǔn)包括：(1)重復(fù)數(shù)據(jù)的文獻(xiàn);(2)數(shù)據(jù)不足的文獻(xiàn);(3)評論和摘要里的數(shù)據(jù);(4)日期范圍之外的大腸桿菌菌株(從2008年1月～2017年12月)；(5)來源于其他國家的大腸桿菌的菌株，而非中國；(6)在耐藥性檢測前，大腸桿菌菌株通過其他標(biāo)準(zhǔn)預(yù)先選擇，如含有某些基因；(7)從其他動物中分離的大腸桿菌菌株；(8)來自處理過的食物的數(shù)據(jù)，例如來自豬場環(huán)境的豬肉數(shù)據(jù)。所選文章和評論的參考文獻(xiàn)也通過手動掃描以確定其他符合條件的研究。

1.3 統(tǒng)計分析

使用Microsoft Excel 12.0(Microsoft Co.，Ltd，Washington，USA)進(jìn)行數(shù)據(jù)收集，使用Stata 12.0(StataCorp LP，College Station，TX，USA)在該薈萃分析中進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析。基于顯著異質(zhì)性的可能性，使用Q檢驗來估計研究之間的異質(zhì)性，P<0.05被認(rèn)為表明具有統(tǒng)計學(xué)顯著的異質(zhì)性，根據(jù)P值選擇隨機(jī)效應(yīng)模型(REM)進(jìn)行Meta分析。使用95%置信區(qū)間(CI)和合適的模型計算中國大陸分離的大腸桿菌以及不同省份和年份中β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥性的總發(fā)生率。

2 結(jié)果

2.1 搜索結(jié)果

檢索了6個電子數(shù)據(jù)庫，并確定了從2008～2017發(fā)表的1610篇文章(圖1)。在對標(biāo)題和摘要進(jìn)行初步評價后，排除了1501篇不相關(guān)和重復(fù)的文章，其余文章的全文進(jìn)行了綜述。在93篇文章中，有32篇被排除在外，具體原因有：7篇是綜述；6篇的研究樣本少于5份；8篇研究使用相同的樣本；5篇研究不是來自中國大陸；2篇研究在不同的語言中重復(fù)；在4篇研究中提供了不完整的信息。最后，在系統(tǒng)回顧和薈萃分析中納入了61項研究(圖1)。

2.2 不同地區(qū)的耐藥發(fā)生率

從2008年～2017年所選擇的出來的文獻(xiàn)，通過Meta-分析每篇文獻(xiàn)里豬源性大腸桿菌對氨芐青霉素的耐藥率。為研究不同地區(qū)豬源性大腸桿菌的耐藥情況，將文獻(xiàn)按照地區(qū)進(jìn)行分類，統(tǒng)計分析結(jié)果見表1。

圖1 文獻(xiàn)篩選過程

表1 氨芐青霉素在地區(qū)豬源性大腸桿菌耐藥情況

地區(qū)耐藥性(95%CI)PI-squaredModeln/N華東0.895(0.851～0.939)0.00089.4%REM110/1239華中0.921(0.860～0.981)0.00089.7%REM467/516華南0.790(0.685～0.895)0.00099.2%REM1693/2181華北0.927(0.889～0.965)0.0000.0%REM279/477西北0.768(0.686～0.849)0.00061.6%REM401/537西南0.832(0.808～0.856)0.00098.5%REM1805/2651東北0.822(0.772～0.872)0.0000.0%REM225/274

注：P>0.05表示無明顯差異，P<0.05表示有統(tǒng)計學(xué)差異，P<0.01表示有顯著性差異。I2=0%，表明無異質(zhì)性；0%

3 討論

豬源性大腸桿菌是引發(fā)豬腹瀉的常見的細(xì)菌，針對豬原性大腸桿菌，常使用的抗生素為氨芐青霉素[6]。細(xì)菌對β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物耐藥的是由于超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的產(chǎn)生，其使藥物β-內(nèi)酰胺環(huán)水解而失去抗菌活性[7～8]。細(xì)菌耐藥性的增加，為養(yǎng)殖場疾病的預(yù)防和治療帶來了新的難題。對近10年來我國養(yǎng)殖場豬源致病性大腸桿菌對氨芐青霉素耐藥率的分析發(fā)現(xiàn)，氨芐青霉素耐藥性的高低依次是華北、華中、華東、西南、東北、華南以及西北地區(qū)。其中，華北地區(qū)耐藥性高達(dá)92.7%，從地理位置可以看出，適合養(yǎng)豬的地區(qū)養(yǎng)殖場較多，其耐藥率也會相對其它地區(qū)較高。不同地區(qū)的兩種藥物的耐藥率均大于60%以上，這說明在使用抗生素時，氨芐青霉素的使用頻率較高，導(dǎo)致不同地區(qū)對氨芐青霉素的耐藥性增加。從統(tǒng)計分析結(jié)果來看，不同地區(qū)的研究結(jié)果存在異質(zhì)性，這可能是收集的材料以及分析方法不同所導(dǎo)致的，另一方面也說明我國目前還缺乏系統(tǒng)性檢測養(yǎng)殖場致病菌耐藥率的有效渠道。