陳燕,彭偉

結(jié)直腸癌是一種常見(jiàn)的消化道惡性腫瘤，近年來(lái)隨著人們生活水平的提高以及生活方式的改變其發(fā)病率不斷升高，已位居消化道惡性腫瘤第2位[1-2],臨床上最主要的方法仍為手術(shù)治療[3]，由于惡性消化道腫瘤患者在本身存在消化和吸收不同程度的功能障礙，同時(shí)惡性腫瘤為消耗性疾病，會(huì)造成患者營(yíng)養(yǎng)不良[4]。并且根治術(shù)作為創(chuàng)傷性手術(shù)會(huì)增加機(jī)體的基礎(chǔ)代謝率進(jìn)而消耗患者的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，從而加重患者的營(yíng)養(yǎng)不良。胡德升等[5]報(bào)道機(jī)體的營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)與免疫狀態(tài)密切有關(guān), 營(yíng)養(yǎng)不良可抑制機(jī)體的非特異性和特異性免疫應(yīng)答，增加了術(shù)后并發(fā)癥的發(fā)生率[6]。結(jié)直腸癌根治術(shù)后常見(jiàn)的并發(fā)癥包括腹腔感染、腹腔出血、消化道出血、手術(shù)切口感染等[7]，因此本文擬通過(guò)探討根治術(shù)后并發(fā)切口感染與患者在圍手術(shù)期免疫狀態(tài)及炎癥反應(yīng)水平，為臨床上降低圍手術(shù)期并發(fā)切口感染風(fēng)險(xiǎn)提供一定的理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年2月至2017年5月期間本院進(jìn)行直腸癌根治術(shù)患者126例作為研究對(duì)象，納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡18～70歲，男女不限；②術(shù)后進(jìn)行病理學(xué)檢查確認(rèn)為直腸癌者，③術(shù)前均未行放化療及其他藥物治療者；④未使用免疫調(diào)節(jié)和白蛋白制劑者等。排除標(biāo)準(zhǔn)：①遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移或合并其他惡性腫瘤者；②患有嚴(yán)重的心、腦、肝、腎臟疾病者；③合并嚴(yán)重的感染性疾病、免疫功功能低下者；④有精神類疾病，依從性差者。該研究已經(jīng)得到了本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)。根據(jù)患者根治術(shù)后是否有切口感染分別為非感染組(65例)和感染組(61例)，非感染組和感染組男性分別為38例和32例，女性分別為27例和28例，兩組患者的一般資料如下表1，兩組一般資料之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)，具有可比性。

表1 兩組患者的一般資料

1.2 觀察指標(biāo)

術(shù)前1天、術(shù)后當(dāng)天及術(shù)后3天外周血淋巴細(xì)胞和血清炎癥因子的含量。

1.3 檢測(cè)試劑和方法

1.3.1 材料 人超敏C-反應(yīng)蛋白(high sensitive C-reaction protein,hs-CRP)(SBJ-H1429)、腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor-α，TNF-α)(SBJ-H1429)、白介素-1β(Interleukin-1β，IL-1β)(SBJ-H0417)、降鈣素原(Procalcitonin PCT)(SBJ-H0932)ELISA試劑盒為南京森貝佳公司產(chǎn)品，人單核細(xì)胞趨化蛋白-1(Monocyte chemotactic protein 1，MCP-1)(YS0160B)ELISA試劑盒為美國(guó)GTX公司產(chǎn)品。

1.3.2 患者術(shù)前1天、術(shù)后當(dāng)天及術(shù)后3天外周血淋巴細(xì)胞含量的檢測(cè) 采集兩組患者5 mL外周靜脈血，加入EDTA抗凝后將血液分為2份，一份加入CD3、CD4、 CD8、CD16、CD19、CD56熒光抗體進(jìn)行孵育，另一份運(yùn)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD16+CD56+、CD19+T淋巴細(xì)胞的表達(dá)。

1.3.3 患者術(shù)前1天、術(shù)后當(dāng)天及3天血清炎癥因子的檢測(cè) 分別于術(shù)前1天、術(shù)后當(dāng)天及術(shù)后3天采集兩組患者5 mL晨起空腹外周靜脈血，經(jīng)低速(400 r/min)離心5 min后分離后取血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)試劑盒檢測(cè)hs-CRP、TNF-α、IL-1β、PCT、MCP-1的含量，各檢測(cè)操作方法嚴(yán)格參照試劑盒說(shuō)明書(shū)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 兩組患者術(shù)前、術(shù)后當(dāng)天和3天免疫細(xì)胞含量的比較

與非感染組相比，感染組術(shù)前1天、術(shù)后當(dāng)天和3天外周血中CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD16+CD56+、CD19+細(xì)胞含量均明顯降低(均P<0.05)。同一組內(nèi)與術(shù)前1天相比，術(shù)后當(dāng)天、術(shù)后3天CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD16+CD56+、CD19+含量均顯著降低(均P<0.05)，具體見(jiàn)圖1。

2.2 兩組患者術(shù)前、術(shù)后當(dāng)天和3天炎性因子含量的比較

與非感染組相比，感染組術(shù)前1天、術(shù)后當(dāng)天和3天血清中hs-CRP、TNF-α、IL-1β、PCT、MCP-1含量均明顯升高(均P<0.05)。同一組內(nèi)與術(shù)前1天相比，術(shù)后當(dāng)天、術(shù)后3天hs-CRP、TNF-α、IL-1β、PCT、MCP-1含量均顯著升高(均P<0.05),見(jiàn)下圖2。

3 討論

臨床上我國(guó)的直腸癌患者以中低位直腸癌多見(jiàn)[8-9]。雖然靶向治療、免疫治療、新輔助治療等治療方法不斷興起，結(jié)直腸癌的生存期不斷增加[10-11]，但手術(shù)仍為其最主要的治療

圖1 兩組患者術(shù)前、術(shù)后當(dāng)天和3天免疫細(xì)胞含量的比較

圖2 兩組患者術(shù)前、術(shù)后當(dāng)天和3天炎性因子含量的比較

手段，結(jié)直腸癌根治術(shù)多年來(lái)隨著臨床廣泛開(kāi)展和手術(shù)器械不斷發(fā)展，術(shù)后總體并發(fā)癥的發(fā)生雖有所減少，但術(shù)后切口感染的發(fā)生率仍較高[12-13]。El-Gazzaz[14]等人通過(guò)回顧性分析696例直腸癌根根治術(shù)患者的病例資料，研究結(jié)果顯示，術(shù)前合并糖尿病疾病是術(shù)后并發(fā)切口感染的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，推測(cè)其可能的原因是糖尿病患者血管硬化容易閉塞，傷口難以愈合，容易并發(fā)感染。同時(shí)Christian 等[15]等人發(fā)現(xiàn)BMI和糖尿病是術(shù)后并發(fā)切口感染切重要危險(xiǎn)因素，本研究中為排除合并糖尿病因素對(duì)本研究的影響，在一般資料中將合并糖尿病和BMI進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩組患者合并糖尿病的比例和BMI無(wú)明顯差異，因此可進(jìn)行對(duì)比。

機(jī)體通過(guò)特異性和非特異性免疫應(yīng)答對(duì)病原菌產(chǎn)生殺傷作用，其中特異性免疫應(yīng)答細(xì)胞包括CD3+CD4+T細(xì)胞、CD3+CD8+T細(xì)胞和CD19+B 細(xì)胞，非特異性免疫應(yīng)答為CD16+CD56+NK 細(xì)胞，特異性和非特異性免疫應(yīng)答細(xì)胞通過(guò)合成和分泌各種免疫球蛋白和細(xì)胞因子，共同發(fā)揮清除病原菌作用[16-17]。本研究通過(guò)對(duì)比患者圍手術(shù)期CD3+CD4+T細(xì)胞、CD3+CD8+T細(xì)胞、CD19+B 細(xì)胞和CD16+CD56+NK細(xì)胞的變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與術(shù)前1天相比，兩組患者術(shù)后當(dāng)天和術(shù)后3天外周血中CD3+CD4+T細(xì)胞、CD3+CD8+T細(xì)胞、CD19+B 細(xì)胞和CD16+CD56+NK細(xì)胞均顯著降低(均P<0.05)。同一時(shí)間點(diǎn)，與非感染組相比，感染組術(shù)前1天、術(shù)后當(dāng)天和3天外周血中CD3+CD4+T細(xì)胞、CD3+CD8+T細(xì)胞、CD19+B 細(xì)胞和CD16+CD56+NK細(xì)胞含量均明顯降低(均P<0.05)。推測(cè)可能與直結(jié)直腸癌行根治術(shù)的手術(shù)創(chuàng)傷及機(jī)體的應(yīng)激狀態(tài)抑制機(jī)體的免疫功能有關(guān)，導(dǎo)致術(shù)后免疫細(xì)胞含量降低，降低了機(jī)體抗感染能力，增加術(shù)后切口感染的風(fēng)險(xiǎn)。

傅華軍[18]等發(fā)現(xiàn)術(shù)后并發(fā)切口還可感染激活了機(jī)體的炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致hs-CRP、TNF-α、IL-1β、PCT、MCP-1等炎性因子的含量顯著升高。炎癥反應(yīng)可首先激活并分泌TNF-α進(jìn)而介導(dǎo)后續(xù)的級(jí)聯(lián)反應(yīng)和炎癥反應(yīng)[19-20]，而PCT和hs-CRP由肝細(xì)胞合成分泌，可作為反應(yīng)炎癥嚴(yán)重程度的指標(biāo)[21]。IL-1β、MCP-1作為炎癥反應(yīng)的重要媒介，在炎癥反應(yīng)過(guò)程中可激活、介導(dǎo)炎癥反應(yīng)[22]。本研究通過(guò)分析術(shù)前1天、術(shù)后當(dāng)天及3天機(jī)體hs-CRP、TNF-α、IL-1β、PCT、MCP-1的變化，結(jié)果顯示與非感染組相比，感染組術(shù)前1天、術(shù)后當(dāng)天和3天血清中hs-CRP、TNF-α、IL-1β、PCT、MCP-1含量均明顯升高(均P<0.05)。同一組內(nèi)與術(shù)前1天相比，術(shù)后當(dāng)天、3天hs-CRP、TNF-α、IL-1β、PCT、MCP-1含量均顯著升高(均P<0.05),提示炎性因子含量的變化與根治術(shù)后并發(fā)切口感染密切有關(guān)。

綜上所述，機(jī)體的免疫功能和炎癥反應(yīng)狀態(tài)與結(jié)直腸癌根治術(shù)后切口感染密切有關(guān)，其相關(guān)指標(biāo)可作為預(yù)測(cè)結(jié)直腸癌根治術(shù)后并發(fā)切口感染的重要指標(biāo)，具有一定的臨床價(jià)值。