逄金柱，劉正冬，賈 妮，李菊芳，裴晨紅，米麗娟，李 濤，房洪濤，戴耀華

（1.內(nèi)蒙古歐世蒙牛乳制品有限責(zé)任公司，北京 101107；2.首都兒科研究所，北京 100020)

母乳被認(rèn)為是嬰兒最理想的食物[1]，其所含蛋白質(zhì)是影響嬰兒生長(zhǎng)發(fā)育至關(guān)重要的營(yíng)養(yǎng)素，不僅能夠?yàn)閶雰禾峁┖铣勺陨淼鞍踪|(zhì)的所需氨基酸，還在幫助嬰兒抵御致病菌的入侵、促進(jìn)腸道有益菌群的生長(zhǎng)、建立腸道免疫環(huán)境和促進(jìn)腸道成熟等方面發(fā)揮重要作用[2]。盡管母乳中蛋白質(zhì)平均質(zhì)量濃度為0.9～1.2 g/100 mL[3]，遠(yuǎn)低于牛乳和乳基嬰兒配方奶粉，但母乳蛋白質(zhì)氨基酸構(gòu)成模式被認(rèn)為最適合嬰兒的需要，目前對(duì)6 月齡以下嬰兒必需氨基酸的推薦攝入量即是基于母乳平均攝入量計(jì)算而得的[4]，但這些推薦攝入量?jī)H考慮了不同哺乳階段母乳中蛋白質(zhì)攝入量的變化，而沒有考慮不同泌乳階段乳清蛋白/酪蛋白以及氨基酸構(gòu)成的變化。另外由于人乳中含有的蛋白質(zhì)種類和含量不同于牛乳，人乳中含有更多的乳清蛋白和較少的酪蛋白，因此人乳中蛋白質(zhì)氨基酸模式也不同于牛乳，如人乳中半胱氨酸與蛋氨酸比值為1.3∶1～2∶1，遠(yuǎn)高于牛乳中1∶3[5-6]。因此，研究母乳氨基酸的構(gòu)成不僅可以更好地了解嬰兒喂養(yǎng)的營(yíng)養(yǎng)需要，還可以為母乳替代品嬰兒配方奶粉的開發(fā)提供依據(jù)。

母乳成分受到多種因素的影響而變化，包括遺傳、哺乳階段、地域和飲食習(xí)慣差異、是否足月分娩以及社會(huì)經(jīng)濟(jì)地位等。研究認(rèn)為母乳蛋白質(zhì)含量隨著哺乳期的延長(zhǎng)而下降，表現(xiàn)為初乳中蛋白質(zhì)含量遠(yuǎn)高于成熟乳；總氨基酸含量也隨泌乳期延長(zhǎng)而下降[7-8]。不過母乳蛋白質(zhì)含量受地域差異的影響并不大，有限的研究數(shù)據(jù)表明氨基酸構(gòu)成會(huì)存在一些明顯差異[9]。因此，對(duì)于不同哺乳階段母乳氨基酸構(gòu)成模式是否存在變化，尤其是不同地區(qū)、不同哺乳階段母乳氨基酸構(gòu)成模式是否有所差異，還需進(jìn)一步的研究。另外，目前對(duì)于不同哺乳階段母乳氨基酸的研究采用的多是橫向采集的方法，在同一時(shí)間采集某地區(qū)相同泌乳期不同乳母的乳汁后按照泌乳時(shí)間建立母乳樣品庫后再進(jìn)行分析[10-11]，由于母乳成分會(huì)受到母體基因型的影響，橫向采集母乳樣品的方法會(huì)對(duì)母乳成分研究結(jié)果的解釋帶來一些困難。而縱向隊(duì)列研究可屏蔽個(gè)體差異的影響，確保研究結(jié)果準(zhǔn)確可靠，且具有區(qū)域代表性。因此，本實(shí)驗(yàn)采用縱向隊(duì)列研究的方法采集中國(guó)北方（北京）和南方（深圳）2 個(gè)城市乳母0～12 月不同哺乳階段的母乳，分析和比較母乳蛋白質(zhì)含量、氨基酸含量和構(gòu)成模式的變化。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 志愿者招募

2012年6月—2013年12月，于北京市和深圳市共募集足月分娩健康嬰兒的產(chǎn)婦60 名，年齡35 周歲以下，身體健康，無慢性疾病和乳腺疾病，母乳喂養(yǎng)嬰兒12 個(gè)月。所有參與者在入組前都簽署了知情同意書。本研究得到了首都兒科研究所科學(xué)倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)。

1.1.2 母乳采集

由科研人員于上午9∶00～11∶00在醫(yī)院或入戶采集母乳，采用吸奶器采集單側(cè)乳房的全部乳汁，取10～60 mL，-80 ℃保存?zhèn)溆??？v向采集母乳共10 次，包括初乳（3～5?d）、過渡乳（13～15?d）和成熟乳（3、4 周和2、3、4、6、9、12 月）。

1.1.3 試劑

本研究所使用試劑除特別說明外均為分析純，水為GB/T 6682—2008《分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法》中規(guī)定的一級(jí)水；石油醚、氫氧化鈉（優(yōu)級(jí)純）、鹽酸（優(yōu)級(jí)純）、過甲酸、氫氧化鉀、硫酸銅、硫酸鉀、硫酸、硼酸、甲基紅指示劑、溴甲酚綠指示劑、亞甲基藍(lán)指示劑、體積分?jǐn)?shù)95%乙醇溶液、苯酚、檸檬酸鈉（優(yōu)級(jí)純） 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

Kjeltec 8400全自動(dòng)凱氏定氮儀 丹麥福斯公司；L-8900全自動(dòng)氨基酸分析儀 日本日立公司。

1.3 方法

1.3.1 蛋白質(zhì)含量的測(cè)定

依據(jù)GB 5009.5—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》凱氏定氮法測(cè)定母乳中蛋白質(zhì)含量。

1.3.2 氨基酸含量的測(cè)定

采用氨基酸自動(dòng)分析儀測(cè)定母乳中氨基酸含量，其中16 種氨基酸依據(jù)GB/T 5009.124—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中氨基酸的測(cè)定》采用6 mol/L鹽酸溶液水解20 h后上機(jī)測(cè)試，胱氨酸在酸水解后用過甲酸氧化2 h再上機(jī)測(cè)試，色氨酸采用4.2 mol/L氫氧化鉀溶液水解26 h后上機(jī)測(cè)試。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析。數(shù)據(jù)采用±s表示，服從正態(tài)分布時(shí)采用單因素方差（one-way analysis of variance，One-way ANOVA）分析進(jìn)行組間差異比較，未知或不服從正態(tài)分布時(shí)采用Mann-Whitney U檢驗(yàn)進(jìn)行組間差異比較；采用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行組間差異比較；同時(shí)采用One-way ANOVA進(jìn)行隨時(shí)間變化的線性趨勢(shì)性檢驗(yàn)，P＜0.05時(shí)組間差異有顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 人口學(xué)資料統(tǒng)計(jì)分析

表 1 乳母和嬰兒的基本情況Table 1 Information abour lactating mothers and infants

從表1中可以看出，北京完成0～12 月齡調(diào)研的乳母人數(shù)為21 人，深圳為30 人。其中深圳乳母的生育年齡極顯著高于北京（P＝0.002），但兩個(gè)地區(qū)乳母分娩前體質(zhì)量無顯著差異（P＞0.05）；所有乳母均于足月分娩健康嬰兒，其中北京市順產(chǎn)和剖宮產(chǎn)人數(shù)比例約為1∶1；深圳市剖宮產(chǎn)人數(shù)略多于順產(chǎn)人數(shù)，但經(jīng)過卡方檢驗(yàn)比較后得到兩城市間順產(chǎn)和剖宮產(chǎn)人數(shù)無顯著差異（P＞0.05）；同時(shí)，兩城市新生兒的出生體質(zhì)量和身長(zhǎng)也均無顯著差異（P＞0.05）。

2.2 母乳蛋白質(zhì)含量隨泌乳時(shí)間的變化

如表2所示，采用Mann-Whitney U檢驗(yàn)進(jìn)行兩城市間母乳中蛋白質(zhì)含量差異比較，結(jié)果表明在0～12 月共10 個(gè)采樣時(shí)間點(diǎn)下兩城市母乳中蛋白質(zhì)含量均無顯著差異（P＞0.05）。隨泌乳期的延長(zhǎng)，蛋白質(zhì)含量呈降低趨勢(shì)。

圖 1 不同泌乳階段母乳中蛋白質(zhì)含量差異比較Fig. 1 Comparison of breast milk proteins during different lactation stages

對(duì)相鄰兩組母乳樣品采用Mann-Whitney U檢驗(yàn)進(jìn)行差異分析。從圖1中可以看出，初乳中蛋白質(zhì)含量最高，北京和深圳初乳中蛋白質(zhì)含量分別為（2.24±0.60）g/100 g和（2.42±1.16）g/100 g；隨著泌乳時(shí)間的延長(zhǎng)，蛋白質(zhì)含量均呈顯著下降趨勢(shì)，嬰兒出生后13～15 d的過渡乳中蛋白質(zhì)含量比初乳下降了20%～30%（P＝0.000），北京和深圳過渡乳中蛋白質(zhì)含量分別為（1.81±0.30）g/100 g和（1.69±0.18）g/100 g。而嬰兒出生后3 周和4 周時(shí)蛋白質(zhì)含量無顯著差異（P＝0.098），但到2 月時(shí)又產(chǎn)生高度顯著差異（P＝0.000），這說明3 周內(nèi)的母乳中蛋白質(zhì)含量出現(xiàn)快速下降趨勢(shì)，而之后其降低趨勢(shì)減緩，到3 月時(shí)開始保持穩(wěn)定，總蛋白質(zhì)含量不再隨泌乳期的延長(zhǎng)而顯著降低（P＞0.05），到12 月時(shí)北京母乳蛋白質(zhì)含量平均為（0.95±0.12）g/100 g，深圳為（1.14±0.30）g/100 g。

表 2 北京和深圳不同泌乳階段母乳中蛋白質(zhì)含量Table 2 Comparison of breast milk proteins during different lactation stages from Beijing and Shenzhen

表 3 北京和深圳不同泌乳階段母乳中總氨基酸含量Table 3 Comparison of total amino acid contents in breast milk during different lactation stages from Beijing and Shenzhen

2.3 母乳中氨基酸含量隨泌乳時(shí)間的變化

從表3中可以看出，初乳中總氨基酸、總必需氨基酸和總非必需氨基酸含量均為最高，其中北京和深圳母乳的總氨基酸含量分別為（2 065.5±587.2）mg/100 g和（2 241.2±739.6）mg/100 g；總必需氨基酸含量分別為（860.3±238.9）mg/100 g和（924.4±296.6）mg/100 g；總非必需氨基酸含量分別為（1 205.2±349.1）mg/100 g和（1 316.7±445.8）mg/100 g，隨著泌乳時(shí)間的延長(zhǎng)均呈顯著下降趨勢(shì)（P＜0.05），到12 月時(shí)總氨基酸含量、總必需氨基酸含量和總非必需氨基酸含量均下降了約58%；而采用Mann-Whitney U檢驗(yàn)比較各階段下兩城市母乳間的差異發(fā)現(xiàn)，嬰兒出生13～15 d和3 周時(shí)總氨基酸、總必需氨基酸和總非必需氨基酸含量均為北京顯著高于深圳（P＜0.05），其他泌乳時(shí)間下兩城市間基本無顯著差異（P＞0.05）。

從表4中可以看出，母乳中含量最豐富的氨基酸為谷氨酸（初乳中約330 mg/100 g），其次為亮氨酸和天冬氨酸（初乳中約200 mg/100 g）；而含量最低的氨基酸為蛋氨酸（初乳中約30 mg/100 g）和色氨酸（初乳中約40 mg/100 g）；18 種氨基酸含量均在初乳中最高，隨著泌乳時(shí)間的延長(zhǎng)均呈顯著下降趨勢(shì)（P＜0.05），且到12 月時(shí)18 種氨基酸的含量均降低50%以上，與總氨基酸變化趨勢(shì)一致。橫向比較兩城市間的差異，發(fā)現(xiàn)除初乳和4 月的成熟乳以外，其他各月時(shí)兩城市間氨基酸均有差異，其中3 周、6 月和9 月的差異氨基酸數(shù)量分別達(dá)到10、8 種和11 種。而比較兩城市母乳中每一種氨基酸隨泌乳時(shí)間延長(zhǎng)的差異發(fā)現(xiàn)，北京母乳必需氨基酸中的賴氨酸、纈氨酸和亮氨酸在出生后的2～4 周內(nèi)以及3、6、9 月時(shí)基本顯著高于深圳母乳（P＜0.05）；而非必需氨基酸中的精氨酸和半胱氨酸分別在2～4 周、2、3、6 月及3～4 周、6、9 月時(shí)在兩城市間有顯著差異（P＜0.05）。

表 4 北京和深圳不同泌乳階段母乳中18 種氨基酸含量Table 4 Comparison of contents of 18 amino acids in breast milk during different lactation stages from Beijing and Shenzhen

續(xù)表4

表 5 北京和深圳不同哺乳階段單體氨基酸在總氨基酸中比例Table 5 Comparison of proportion of each amino acid to total amino acids in breast milk during different lactation stages from Beijing and Shenzhen

續(xù)表5

盡管各單體氨基酸含量隨泌乳時(shí)間延長(zhǎng)呈顯著下降趨勢(shì)，但其在總氨基酸中的比例卻保持穩(wěn)定。從表5中可以看出，從初乳到12 月的成熟乳中必需氨基酸和非必需氨基酸分別占總氨基酸的42%和58%左右。與單體氨基酸含量類似，在總氨基酸中比例最高的氨基酸為谷氨酸，其次為亮氨酸；比例最低的為蛋氨酸，其次為色氨酸。而進(jìn)行兩城市間比較后發(fā)現(xiàn)，從6 月齡開始兩城市母乳中的差異氨基酸數(shù)量逐漸增多，到9 月齡時(shí)達(dá)到12 種。其中深圳母乳中苯丙氨酸在總氨基酸中的比例在除3～5 d以外的其他9 個(gè)時(shí)間點(diǎn)下均高于北京母乳，且除4 月外其他時(shí)間點(diǎn)下的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討 論

本研究采用縱向隊(duì)列跟蹤調(diào)查的方式考察了我國(guó)0～12 月不同泌乳階段母乳蛋白質(zhì)和氨基酸構(gòu)成，樣本采集點(diǎn)為城市經(jīng)濟(jì)發(fā)展水平基本一致的北京市和深圳市，由此探討我國(guó)南北地區(qū)差異對(duì)母乳中氨基酸和蛋白質(zhì)隨泌乳時(shí)間變化的影響。

3.1 0～12 月泌乳期母乳蛋白質(zhì)的變化

母乳中蛋白質(zhì)是嬰幼兒生長(zhǎng)發(fā)育過程中的關(guān)鍵營(yíng)養(yǎng)素之一，是機(jī)體構(gòu)造的物質(zhì)基礎(chǔ)，也是氨基酸的重要來源。關(guān)于母乳中蛋白質(zhì)含量及影響因素國(guó)外學(xué)者進(jìn)行了大量研究，結(jié)果表明母乳中蛋白質(zhì)平均質(zhì)量濃度約為0.9～1.2 g/100 mL[3]，隨著泌乳期的延長(zhǎng)，蛋白質(zhì)量濃度呈下降趨勢(shì)。Guo Mingruo等[12]的研究表明3～4 月的母乳中蛋白質(zhì)量濃度為0.8～1.0 g/100 mL，6 個(gè)月以后降為0.7～0.8 g/100 mL；Grote等[13]的研究發(fā)現(xiàn)產(chǎn)后1、2、3、6 月母乳蛋白質(zhì)量濃度分別為1.38、1.16、1.04、0.96 g/100 mL；Nommsen等[14]縱向測(cè)試了產(chǎn)后3、6、9、12 月成熟乳蛋白質(zhì)量濃度，分別為1.21、1.14、1.16、1.24 g/100 mL；Michaelsen等[15]分析母乳中蛋白質(zhì)量濃度，分別于產(chǎn)后第4、14天采集母乳，之后每隔2 周采集，持續(xù)3 個(gè)月，再持續(xù)每月采集直到8 個(gè)月，樣本全面覆蓋初乳、過渡乳和成熟乳，結(jié)果發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)量濃度從產(chǎn)后第4天的1.73 g/100 mL下降到第8個(gè)月的0.77 g/100 mL，下降了約55%；Hester等[16]對(duì)健康、單胎、足月新生兒母親乳汁成分的meta分析顯示，初乳（1～5 d）蛋白質(zhì)量濃度平均為2.5 g/100 mL，過渡乳（6～14 d）平均質(zhì)量濃度為1.7 g/100 mL，成熟乳（大于14 d）平均質(zhì)量濃度為1.3 g/100 mL。關(guān)于我國(guó)母乳中蛋白質(zhì)隨泌乳期的變化也有一些報(bào)道：張?zhí)m威等[17]以黑龍江哈爾濱市為采樣點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)初乳到產(chǎn)后3 個(gè)月成熟乳蛋白質(zhì)含量逐漸下降；Shi Yudong等[18]采集了內(nèi)蒙古地區(qū)母乳樣品，分析了初乳、過渡乳和22～180 d成熟乳的營(yíng)養(yǎng)組成，結(jié)果發(fā)現(xiàn)初乳中總氮含量為（1.38±0.07）g/100 g，到成熟乳后其含量降低為（1.27±0.33）g/100 g。

盡管前人對(duì)母乳中蛋白質(zhì)含量進(jìn)行了大量研究，但關(guān)于我國(guó)母乳中蛋白質(zhì)含量的研究通常樣本量少，采集時(shí)間點(diǎn)寬泛，對(duì)蛋白質(zhì)隨泌乳時(shí)間變化的研究受限；因此本研究采用縱向隊(duì)列的方法全面考察了我國(guó)母乳從初乳、過渡乳到成熟乳共10 個(gè)時(shí)間點(diǎn)下蛋白質(zhì)的含量，結(jié)果表明蛋白質(zhì)含量從初乳中的平均2.3 g/100 g下降到12 月時(shí)的平均1.0 g/100 g，與前人的研究結(jié)果一致。關(guān)于蛋白質(zhì)含量隨泌乳時(shí)間的延長(zhǎng)而下降的過程前人也進(jìn)行了詳細(xì)分析，Mitoulas等[19]研究了產(chǎn)后1～12 月成熟乳的蛋白質(zhì)含量變化，結(jié)果顯示泌乳期前6 個(gè)月蛋白質(zhì)含量明顯下降，6、9、12 個(gè)月則變化不大；而本研究發(fā)現(xiàn)母乳中蛋白質(zhì)含量隨著泌乳期的延長(zhǎng)顯著下降，但到4 月時(shí)保持穩(wěn)定。Packard[20]認(rèn)為成熟乳的蛋白質(zhì)含量比較恒定，除膳食蛋白質(zhì)攝入量不足且質(zhì)量差的情況外，一般不受膳食的影響?；谇叭说难芯拷Y(jié)果，本研究在經(jīng)濟(jì)水平較發(fā)達(dá)的一線城市開展，因此未進(jìn)行膳食調(diào)查分析。Villalpando等[9]認(rèn)為地域不會(huì)對(duì)母乳中蛋白質(zhì)的含量產(chǎn)生影響，而我國(guó)21世紀(jì)初母乳調(diào)查結(jié)果發(fā)現(xiàn)上海城區(qū)母乳中蛋白質(zhì)含量明顯高于其他城市[21]；本研究發(fā)現(xiàn)我國(guó)南、北兩城市母乳中蛋白質(zhì)含量從初乳、過渡乳到成熟乳均無顯著差異。

3.2 0～12 月泌乳期母乳氨基酸的變化

氨基酸是嬰幼兒早期生命中必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，眾多研究表明母乳中氨基酸的構(gòu)成模式最適合嬰幼兒生長(zhǎng)發(fā)育需求，常常被用來評(píng)價(jià)嬰幼兒配方奶粉的質(zhì)量。母乳中氨基酸含量相對(duì)穩(wěn)定，對(duì)其影響最大的是泌乳時(shí)間，多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)不同泌乳階段母乳氨基酸含量變化明顯[7-8,10,22-23]。本研究采用縱向隊(duì)列研究方式探討母乳氨基酸在初乳、過渡乳及成熟乳中的含量及變化趨勢(shì)，同樣發(fā)現(xiàn)氨基酸含量受泌乳時(shí)間影響最大，總氨基酸、必需氨基酸、非必需氨基酸和各單體氨基酸含量隨泌乳時(shí)間延長(zhǎng)而明顯下降。Zhang Zhiying等[24]采用meta法分析了來自于13 個(gè)國(guó)家的26 項(xiàng)關(guān)于總氨基酸隨泌乳時(shí)間變化的研究。由于文獻(xiàn)中氨基酸質(zhì)量濃度單位為mg/100 mL，本研究中依據(jù)100 mL母乳質(zhì)量為104 g進(jìn)行統(tǒng)一換算。從表6中可以看出，本研究得到的半胱氨酸和胱氨酸含量在初乳和過渡乳時(shí)高于Zhang Zhiying等[24]研究的來自13 個(gè)國(guó)家的平均含量，而其他類型氨基酸在同一泌乳時(shí)間下的含量均無顯著差異。同時(shí)本研究結(jié)果與Ding Ming[11]和Garcia-Rodenas[25]等的研究結(jié)果一致：母乳蛋白質(zhì)中含量最豐富的氨基酸是谷氨酸，含量最低的是蛋氨酸。谷氨酸在總氨基酸中的比例隨泌乳時(shí)間延長(zhǎng)逐漸升高，盡管谷氨酸為非必需氨基酸，可由人體代謝過程合成，但其參與乳腺代謝等重要生命過程，對(duì)嬰幼兒早期營(yíng)養(yǎng)攝入及生長(zhǎng)發(fā)育具有重要影響[26]；蛋氨酸是一種含硫氨基酸，具有多種生物功能，新生兒不僅需要蛋氨酸用于蛋白質(zhì)的周轉(zhuǎn)和生長(zhǎng)，而且其還為快速擴(kuò)張的甲基化產(chǎn)物儲(chǔ)備提供基質(zhì)，盡管其含量最低，但由于其不能被人體代謝合成而成為嬰幼兒早期發(fā)育中的必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[27]。另外，Wu等[8]報(bào)道隨著泌乳期延長(zhǎng)，谷氨酸、脯氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、組氨酸含量有增加的趨勢(shì)，苯丙氨酸、酪氨酸、天冬氨酸、丙氨酸、蛋氨酸、纈氨酸、蘇氨酸含量變化不大，精氨酸、甘氨酸、絲氨酸、半胱氨酸、色氨酸含量有下降的趨勢(shì)。本研究也發(fā)現(xiàn)類似的結(jié)果：亮氨酸、異亮氨酸、谷氨酸和脯氨酸比例隨著泌乳期延長(zhǎng)明顯增加，色氨酸、纈氨酸、酪氨酸和半胱氨酸比例基本保持不變，但經(jīng)過統(tǒng)計(jì)分析后認(rèn)為這種變化趨勢(shì)非常微弱，組間差異不具有顯著性。盡管母乳中總氨基酸和各單體氨基酸的絕對(duì)含量隨泌乳期延長(zhǎng)而顯著下降，但必需氨基酸和非必需氨基酸占總氨基酸比例隨泌乳時(shí)間的延長(zhǎng)基本保持穩(wěn)定，而各單體氨基酸在總氨基酸中的構(gòu)成比例表現(xiàn)出不同的變化趨勢(shì)，這種變化趨勢(shì)與母乳蛋白質(zhì)種類的變化有關(guān)。有研究表明富含含硫氨基酸和甘氨酸的乳清蛋白和富含谷氨酸及谷氨酰胺的酪蛋白的比例隨著泌乳期的延長(zhǎng)而降低，從初乳的90∶10變?yōu)槌墒烊榈?5∶45，甚至到6 個(gè)月后成熟乳的50∶50[28]，這與氨基酸構(gòu)成模式的變化一致[29]。本研究結(jié)果顯示含硫氨基酸和甘氨酸在總氨基酸中的比例隨泌乳時(shí)間的延長(zhǎng)保持穩(wěn)定，而酪氨酸在總氨基酸中的比例隨泌乳時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸升高，同樣說明乳清蛋白與酪蛋白比例隨泌乳時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸降低。

表 6 本研究與國(guó)際上關(guān)于母乳氨基酸在不同泌乳階段下的差異比較Table 6 Comparison of amino acid contents in breast milk during different lactation stages reported in this study and the literature mg/100 g

Feng Ping等[30]報(bào)道不同地區(qū)之間母乳氨基酸含量并沒有明顯差異；而其他研究者發(fā)現(xiàn)地域會(huì)對(duì)氨基酸的含量產(chǎn)生影響[31-32]。因此，本研究比較了我國(guó)南北母乳蛋白質(zhì)和氨基酸的地域差異，結(jié)果發(fā)現(xiàn)單體氨基酸含量在除初乳和4 月成熟乳外的各泌乳時(shí)間點(diǎn)下均有差異；而比較各單體氨基酸在總氨基酸中的比例發(fā)現(xiàn)，從6 月開始南北兩個(gè)城市的差異單體氨基酸數(shù)量開始增多，而6 月前主要是深圳地區(qū)的苯丙氨酸含量顯著高于北京地區(qū)。這種母乳氨基酸構(gòu)成的地域性差異可能是由于飲食差異所造成的[33]，但也有研究認(rèn)為盡管飲食是影響母乳中氨基酸組成的基礎(chǔ)，飲食中氨基酸含量與母乳中氨基酸的含量卻沒有直接聯(lián)系[11]。因此，對(duì)于不同地區(qū)母乳氨基酸構(gòu)成差異的影響因素以及對(duì)嬰兒生長(zhǎng)發(fā)育的可能影響有待于進(jìn)一步的研究。

另外，本研究中檢測(cè)的是總氨基酸含量，包括蛋白質(zhì)氨基酸和非蛋白質(zhì)游離氨基酸。前人的研究表明游離氨基酸含量隨泌乳時(shí)間的變化也會(huì)影響各氨基酸的變化趨勢(shì)，如有研究發(fā)現(xiàn)游離谷氨酸含量隨著泌乳期延長(zhǎng)顯著增加[34-35]。但由于在整個(gè)泌乳期游離氨基酸占總氨基酸比例不足3%[36]，其對(duì)嬰幼兒早期的營(yíng)養(yǎng)需求貢獻(xiàn)也較低，同時(shí)由于游離氨基酸可直接被血液快速吸收，在整個(gè)體循環(huán)過程中存在時(shí)間非常短，受限于現(xiàn)有檢測(cè)技術(shù)未能明確其生物學(xué)功能[24]，因此本研究未對(duì)其進(jìn)行分析。

母乳中蛋白質(zhì)和氨基酸的構(gòu)成模式最適合嬰兒生長(zhǎng)發(fā)育的需要。由于牛乳與人乳在營(yíng)養(yǎng)組成上的巨大差異，嬰幼兒配方奶粉的營(yíng)養(yǎng)組成無法完全復(fù)制母乳。配方奶粉研發(fā)過程中，當(dāng)滿足嬰兒對(duì)必需氨基酸的需求時(shí)，往往蛋白質(zhì)的含量與母乳相比過高；而蛋白含量與母乳相近時(shí)，部分必需氨基酸如色氨酸、半胱氨酸等的含量則不能滿足要求。目前，市售的嬰兒配方奶粉中蛋白質(zhì)總量普遍高于母乳，而蛋白質(zhì)含量過高會(huì)加重嬰幼兒腎臟的代謝負(fù)擔(dān)。已有多項(xiàng)臨床實(shí)驗(yàn)證明，低蛋白的配方奶粉不影響嬰兒的各項(xiàng)生理指標(biāo)，且有降低其未來患有肥胖和慢性疾病的可能。同時(shí)，平衡嬰兒配方奶粉中總蛋白含量與必需氨基酸含量是其在蛋白質(zhì)和氨基酸組成上是否能夠更貼近母乳的關(guān)鍵技術(shù)要點(diǎn)。因此，本研究將為未來營(yíng)養(yǎng)精準(zhǔn)化的嬰幼兒配方奶粉的開發(fā)提供理論支撐。