胡昌勤

(中國食品藥品檢定研究院，北京 102629)

2015年8月18日，國務(wù)院印發(fā)的《關(guān)于改革藥品醫(yī)療器械審評審批制度的意見》，將“提高仿制藥質(zhì)量，加快仿制藥質(zhì)量一致性評價”作為改革藥品審評審批制度的5大目標(biāo)之一；以2016年3月5日國務(wù)院辦公廳發(fā)布的《關(guān)于開展仿制藥質(zhì)量和療效一致性評價的意見》為節(jié)點(diǎn)，國內(nèi)以生物等效為目標(biāo)的口服制劑一致性評價工作蓬勃開展； 2017年12月CED一致性評價辦公室又發(fā)布了《已上市化學(xué)仿制藥(注射劑)一致性評價技術(shù)要求(征求意見稿)》，揭開了注射劑仿制藥一致性評價的大幕?？股厮幬镌谧⑸鋭┲兴嫉谋壤^大，我們曾對國內(nèi)市場抗生素藥品的質(zhì)量現(xiàn)狀進(jìn)行過分析，探討國產(chǎn)仿制藥與原研藥品的主要質(zhì)量差距[1]，本文針對抗生素注射劑的特點(diǎn)，進(jìn)一步探討抗生素注射劑一致性評價中的關(guān)鍵點(diǎn)及評價策略。

1 注射劑一致性評價的主要關(guān)注點(diǎn)

據(jù)文獻(xiàn)報道[2]，日本有17.2%的醫(yī)生和37.2%的患者不愿意使用仿制藥，其原因主要與療效和安全性的差異有關(guān)，如仿制的萬古霉素和替考拉寧注射劑，其在實際治療中抗菌活性較原研產(chǎn)品分別低于14.6%和17.3%。因此，保證仿制藥與原研制劑在治療中具有相同的有效性和安全性是仿制藥一致性評價應(yīng)重點(diǎn)解決的問題。

對口服制劑，目前人們普遍將生物等效性作為評價仿制藥與參比制劑是否具有臨床一致性的關(guān)鍵指標(biāo)。但對于注射劑，特別是水溶性注射劑，其生物等效性不是影響臨床等效的主要原因，有哪些關(guān)鍵因素可能影響國產(chǎn)抗生素注射劑的臨床一致性呢？

抗生素藥物按其結(jié)構(gòu)通常分為β-內(nèi)酰胺類(包括青霉素與頭孢菌素)、氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)酯類、喹諾酮類、糖肽類等，評價抗生素類藥物臨床有效性的最理想?yún)?shù)是PK/PD(pharmacokinetic/pharmacodynamic)。由于不同類抗生素的抗菌作用機(jī)理不同，用于評價臨床有效性的關(guān)鍵PK/PD參數(shù)也不相同。對β-內(nèi)酰胺類抗生素，藥物在體液中有效血藥濃度(Ceff)的持續(xù)時間(T＞MIC)是最關(guān)鍵參數(shù)；對氨基糖苷類抗生素和喹諾酮類抗生素，24h體內(nèi)的AUC/MIC比值是最關(guān)鍵參數(shù)；而對大環(huán)內(nèi)脂類和糖肽類等非濃度依賴性抗生素，如阿奇霉素和萬古霉素等，AUC/MIC比值是最關(guān)鍵參數(shù)[3]。

Schito等[4]利用數(shù)學(xué)模擬的方法對多家注射用頭孢曲松鈉仿制藥與原研制劑羅氏芬?(Rocephin?)在胸腔積液的有效游離藥物濃度(Ceff)進(jìn)行了預(yù)測，認(rèn)為只有羅氏芬的Ceff可達(dá)到要求的濃度范圍。國內(nèi)臨床反映，國產(chǎn)注射用頭孢曲松鈉較羅氏芬?起效約慢30～40min；由于頭孢曲松鈉為高血清蛋白結(jié)合藥物，未成鹽的頭孢曲松酸較頭孢曲松鈉具有更高的蛋白結(jié)合率，而早期國產(chǎn)的頭孢曲松鈉成鹽率相對較低，因此，與血清蛋白具有較高的蛋白結(jié)合率，導(dǎo)致早期國產(chǎn)仿制品在給藥初期游離的藥物濃度達(dá)不到Ceff，進(jìn)而使得其起效時間延長[5]。

注射用美羅培南為美羅培南與碳酸鈉的混粉。Agudelo等[6]利用豚鼠感染模型等證明，雖然仿制和原研注射用美羅培南在動物體內(nèi)為生物等效，但部分仿制品的抗感染效果不如原研制劑；其原因是由于體內(nèi)的腎毒性肽酶(DHP-I)對部分仿制藥較原研制劑具有更強(qiáng)的水解能力。提示在臨床應(yīng)用中仿制藥和原研注射用美羅培南可能出現(xiàn)不等效現(xiàn)象。由于國內(nèi)注射用美羅培南仿制藥和原研藥的主要差異為產(chǎn)品中碳酸鈉含量的不同，表現(xiàn)為仿制藥溶液的pH明顯高于原研制劑[7]，這種差異是否會影響體內(nèi)DHP-I酶的活性值得探討。

利用GastroPlus軟件，以萬古霉素B為對象建立藥代動力學(xué)模型，我們曾模擬多次給藥條件下注射用鹽酸萬古霉素的人體內(nèi)血藥濃度曲線。結(jié)果顯示，規(guī)格為500mg的注射用鹽酸萬古霉素，靜脈滴注(給藥時間為1h，間隔6h給藥)，健康成年男性體內(nèi)的萬古霉素血藥谷濃度均達(dá)不到《中國萬古霉素治療藥物監(jiān)測指南》中推薦的10mg/L谷濃度；提示規(guī)格為500mg制劑藥物劑量偏低。比較仿制藥與原研制劑的裝量，發(fā)現(xiàn)規(guī)格為500mg的原研制劑實際是按標(biāo)示量的110%～115%投料，通常較國產(chǎn)制劑的裝量約高13%[8]；此外，由于萬古霉素來源于生物發(fā)酵，產(chǎn)品中的小組分/雜質(zhì)可以與萬古霉素B競爭結(jié)合萬古霉素靶位，導(dǎo)致療效降低[9]；而目前國產(chǎn)注射用鹽酸萬古霉素中萬古霉素B的含量約較原研產(chǎn)品約低2%～3%[8]；綜上，注射用萬古霉素由于裝量及萬古霉素B純度的差異可導(dǎo)致國產(chǎn)仿制藥較原研制劑的活性低約15%。

而對于多組分抗生素如慶大霉素、替考拉寧等，不同的組分對特定致病菌可能表現(xiàn)出不同的抗菌活性[10]。由于多組分抗生素的組分差異是客觀存在的，當(dāng)仿制藥與參比制劑的組分比例不相同時，可能導(dǎo)致在特定的動物抗感染模型中表現(xiàn)出不同的抗感染效果[11]，雖然其提示在對特定的病人治療時候，可能出現(xiàn)療效不一致現(xiàn)象；但這種差異可能在治療其它致病菌的感染時呈現(xiàn)出完全不同的治療效果。因此從整體角度，對多組分抗生素，僅依據(jù)個別致病菌建立的動物抗感染模型，比較仿制藥與參比制劑的療效一致性是不夠嚴(yán)謹(jǐn)?shù)摹?/p>

對注射劑臨床一致性評價的另一關(guān)注點(diǎn)是藥物的安全性。原研注射用頭孢孟多酯鈉產(chǎn)品為頭孢孟多酯鈉與5%碳酸鈉的混粉，而國內(nèi)的仿制品中大多不含碳酸鈉。注射用頭孢孟多酯鈉中加入適量的碳酸鈉可以明顯改善貯存過程中樣品溶液的澄清度易變渾濁這一現(xiàn)象[12]；而樣品溶液的澄清度與藥物的不良反應(yīng)例數(shù)呈正相關(guān)，即不含碳酸鈉的注射用頭孢孟多酯鈉較含5%碳酸鈉的制劑的總不良反應(yīng)例數(shù)更高，即含5%碳酸鈉的注射用頭孢孟多酯鈉的安全性更高[13]。

綜上，從臨床應(yīng)用的有效性與安全性出發(fā)，評價仿制藥與參比制劑(原研制劑)工藝、處方差異的影響應(yīng)是注射劑一致性評價的關(guān)鍵。

2 注射劑一致性評價與新仿制藥研發(fā)策略的異同

仿制藥一致性評價是對已上市的藥品與參比制劑的臨床療效差異進(jìn)行評價，通過處方/工藝等的改進(jìn)等，使得產(chǎn)品的療效與參比制劑一致。和藥物研發(fā)中的新藥仿制相比，雖然在研發(fā)/評價過程中都要從安全、有效、質(zhì)量3方面與參比制劑進(jìn)行比較， 但由于仿制藥一致性評價是對“現(xiàn)實藥品”的評估，而藥品仿制是對“未來藥品”的期望，因此，實現(xiàn)相同目標(biāo)所采用的策略應(yīng)不完全相同(圖1)。不同于新仿制藥通常需借助于“反向過程”的結(jié)果進(jìn)行處方/工藝設(shè)計，國產(chǎn)仿制藥的療效與質(zhì)量評價通常已經(jīng)有大量的數(shù)據(jù)可以查閱，特別是歷年的國家評價性抽驗數(shù)據(jù)，其中蘊(yùn)藏著大量的質(zhì)量信息；一些被認(rèn)為與原研藥品處方、工藝有明顯差異的品種，基本已進(jìn)行過對比研究。因此，在進(jìn)行仿制藥一致性評價時，應(yīng)首先通過對文獻(xiàn)的調(diào)研，發(fā)現(xiàn)國產(chǎn)仿制藥與參比制劑的關(guān)鍵質(zhì)量差異，進(jìn)而針對性的進(jìn)行改進(jìn)，而不應(yīng)將精力主要放在與參比制劑的質(zhì)量對比上。

案例1：注射用頭孢曲松鈉：頭孢曲松鈉(ceftriaxone sodiμm)為瑞士Roche公司在20世紀(jì)80年代研制的第三代頭孢菌素，為結(jié)晶性粉末。其通過無菌分裝工藝生產(chǎn)注射用頭孢曲松鈉，即制劑的質(zhì)量主要取決于原料的質(zhì)量。1991年頭孢曲松鈉及制劑在國內(nèi)仿制成功。國內(nèi)臨床曾反映國產(chǎn)注射用頭孢曲松鈉較原研藥品起效約慢30～40min。 2018年、2019年和2011年，中國食品藥品檢定研究院(以下簡稱中檢院)對該品種曾組織過3次國家評價性抽驗，發(fā)現(xiàn)國產(chǎn)頭孢曲松鈉的突出質(zhì)量問題為溶液的澄清度差。據(jù)文獻(xiàn)報道，國產(chǎn)頭孢曲松鈉的溶液澄清度[14-15]，有關(guān)物質(zhì)[15]，成鹽率[5]等方面與原研羅氏芬均存在差異, 成鹽率偏低可導(dǎo)致頭孢曲松鈉具有更強(qiáng)的血清白蛋白結(jié)合率，可能導(dǎo)致給藥初期血漿中的游離藥物濃度偏低，影響藥品的起效速率[5]。

頭孢曲松鈉分子含兩個鈉離子，3.5個水分子(圖2a)，濕品中頭孢曲松含量的理論值為83.5%，水分子的理論值為9.52%；按無水物計，頭孢曲松鈉中頭孢曲松含量的理論值為95.7%。頭孢曲松鈉結(jié)晶工藝的差異可導(dǎo)致產(chǎn)品成鹽率偏低[16]，進(jìn)而使其與血漿蛋白的結(jié)合率增加，給藥初期的游離藥物濃度偏低，導(dǎo)致起效慢。采用粉末X射線衍射技術(shù)結(jié)合聚類分析手段，薛晶等[17]將頭孢曲松鈉的晶體特征分為不同的亞型，原研羅氏芬樣品屬第Ⅱ亞型；通過比較不同亞型樣品的成鹽率、水分等與結(jié)晶工藝相關(guān)的指標(biāo), 并比較加速實驗過程中不同亞型樣品晶格穩(wěn)定性的差異與藥用丁基膠塞相容性的差異，證明提高國產(chǎn)頭孢曲松鈉產(chǎn)品質(zhì)量的關(guān)鍵應(yīng)從控制產(chǎn)品的結(jié)晶工藝入手，保證終產(chǎn)品為第Ⅱ亞型的樣品。

圖1 仿制藥一致性評價與新藥仿制策略的比較Fig.1 Strategy comparison between quality consistency evaluation of marketing drug and new generic drug R&D

圖2 國內(nèi)不同企業(yè)注射用頭孢曲松鈉的質(zhì)量對比Fig.2 Quality comparison of ceftriaxone sodiμm for injection in different domestic manufacture

對2009年的評價性抽驗數(shù)據(jù)進(jìn)行分析(圖2b、圖2c)。雖然全部產(chǎn)品均符合中國藥典的規(guī)定，但不同企業(yè)產(chǎn)品的頭孢曲松濕品含量和水分含量差異明顯，且部分企業(yè)產(chǎn)品的批間差異較大，提示企業(yè)對產(chǎn)品的工藝控制能力較差；進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，國產(chǎn)制劑的水分含量明顯低于理論值(9.52%)，且多數(shù)低于羅氏的產(chǎn)品(9.1%)，提示部分產(chǎn)品中結(jié)晶水不足；濕品中頭孢曲松的含量偏高，部分高于理論值(83.5%)，提示部分產(chǎn)品存在成鹽不完全現(xiàn)象；而上述差異又均與頭孢曲松鈉的結(jié)晶過程有關(guān)(未發(fā)表資料)。即提示頭孢曲松鈉的晶體特征是關(guān)鍵質(zhì)量屬性，對原料結(jié)晶工藝的控制是關(guān)鍵質(zhì)控點(diǎn)。

綜上所述，在對注射用頭孢曲松鈉進(jìn)行一致性評價時，應(yīng)以原料的結(jié)晶工藝及工藝控制為切入點(diǎn)，首先證明結(jié)晶工藝可以保證產(chǎn)品的晶體特征屬于第Ⅱ亞型，再以產(chǎn)品濕品的頭孢曲松含量和水分含量為指標(biāo)對工藝過程進(jìn)行優(yōu)化，保證生產(chǎn)過程的一致性，降低批間差異。

3 注射劑一致性評價/再評價之一般策略

質(zhì)量源于設(shè)計(QbD)理念在藥品研發(fā)、生產(chǎn)、監(jiān)管等領(lǐng)域已經(jīng)被普遍接受。通常目標(biāo)產(chǎn)品的質(zhì)量可通過產(chǎn)品的關(guān)鍵質(zhì)量屬性(CQAs)進(jìn)行表征[18-19]。因此，在進(jìn)行仿制藥一致性評價中，應(yīng)首先對參比制劑的CQAs有深入的理解，在此基礎(chǔ)上確定參比制劑生產(chǎn)過程中的關(guān)鍵原輔料屬性(CMAs)和關(guān)鍵工藝參數(shù)(CPPs)，建立CMAs 、CPPs和產(chǎn)品CQAs的關(guān)系。這不僅有助于揭示仿制藥與參比制劑的主要質(zhì)量差異，且可以針對性的對仿制藥的處方、工藝進(jìn)行評價；并通過對仿制藥CMAs和CPPs的控制，實現(xiàn)對產(chǎn)品CQAs的控制，保證仿制藥與參比制劑的一致性。只有當(dāng)確認(rèn)仿制藥與參比制劑的CQAs基本一致時，對二者的藥學(xué)指標(biāo)進(jìn)行系統(tǒng)的比較才有意義(圖3)。

發(fā)現(xiàn)藥品關(guān)鍵質(zhì)量屬性并與生產(chǎn)工藝相關(guān)聯(lián)通常可以采用以下方法。

圖3 進(jìn)行仿制藥一致性評價的一般策略Fig.3 General strategy for quality consistency evaluation of generic drug

3.1 利于國家評價性抽驗數(shù)據(jù)結(jié)合文獻(xiàn)進(jìn)行分析

2015年，中檢院通過對從2008年起歷年國家評價性抽驗涉及的15個注射用頭孢菌素質(zhì)量的系統(tǒng)回顧性分析[20]，認(rèn)為市場上注射用頭孢菌素的突出質(zhì)量問題是“溶液的澄清度與顏色”。通過對2008—2013年國家藥品不良反應(yīng)監(jiān)測數(shù)據(jù)庫的檢索，將注射用頭孢菌素的主要不良反應(yīng)(ADR)報告與市場抽驗結(jié)果相關(guān)聯(lián)，發(fā)現(xiàn)注射用頭孢曲松鈉和注射用頭孢唑林鈉的嚴(yán)重不良反應(yīng)比率在2011年后呈下降趨勢，與二者在2010年后溶液的澄清度問題明顯好轉(zhuǎn)有直接相關(guān)。將“溶液的澄清度”作為CQAs，發(fā)現(xiàn)頭孢菌素原料與膠塞的相容性直接影響注射劑的澄清度；使用鍍膜/覆膜膠塞或選用質(zhì)量較好的頭孢菌素原料可以有效地阻斷膠塞揮發(fā)物與頭孢菌素的相互作用，改善頭孢菌素與膠塞的相容性；而頭孢菌素原料的結(jié)晶工藝是影響原料質(zhì)量的關(guān)鍵工藝，優(yōu)化CPPs是獲得理想頭孢菌素原料的關(guān)鍵，這也是目前國產(chǎn)仿制藥與原研藥品之間的最大差異。

對頭孢菌素晶型、工藝與穩(wěn)定性關(guān)系的研究揭示，頭孢菌素可以形成不同晶型的晶體，也可以與水分子或溶劑相互作用形成不同的水合物或溶劑化物，通常具有不同空間結(jié)構(gòu)的晶體(晶型/水合物)的固體穩(wěn)定性不同[21-25]。如頭孢哌酮鈉具有A、B兩種晶型，A晶型為三斜晶系，B晶型為單斜晶系；A晶型較B晶型更穩(wěn)定。根據(jù)粉末X-衍射圖譜特征衍射峰(峰位置、峰強(qiáng)度)的差異，A晶型樣品又可分為多個亞晶型，亞晶型Ⅰ和亞晶型II在加速試驗中表現(xiàn)出更高的穩(wěn)定性，原研藥品“先鋒必”和“舒普深”中的頭孢哌酮鈉即為此亞晶型[23]。頭孢米諾鈉晶體含有7個水分子，根據(jù)單晶X-衍射結(jié)果，理想狀態(tài)下每一晶格中含3個游離態(tài)的水分子和4個通過氫鍵與頭孢米諾結(jié)合的水分子；但水分子在晶格中可以存在于多個位置，導(dǎo)致不同的結(jié)晶條件下可形成不同的亞晶型，在粉末X-衍射圖譜中表現(xiàn)出細(xì)微的差異；不同亞晶型的頭孢米諾鈉樣品具有不同的化學(xué)穩(wěn)定性[25]。同樣，頭孢他啶含有5分子結(jié)晶水，不同工藝的頭孢他啶產(chǎn)品在TGA中表現(xiàn)出不同的失水特性，提示其晶體中結(jié)晶水的穩(wěn)定狀態(tài)不同，這種差異使其在加速實驗中表現(xiàn)出色澤變化速率的不同；而注射用頭孢噻肟鈉晶體結(jié)晶度的差異是影響其穩(wěn)定性的主要因素(未發(fā)表資料)。

上述結(jié)果提示，合理利用國家評價性抽驗數(shù)據(jù)是發(fā)現(xiàn)國產(chǎn)制劑與參比制劑質(zhì)量差異的有效途徑。

3.2 根據(jù)雜質(zhì)譜進(jìn)行分析

2009年，中檢院在國家評價性抽驗中對不同成鹽工藝的國產(chǎn)注射用阿奇霉素的雜質(zhì)譜進(jìn)行了考察，發(fā)現(xiàn)其中的主要雜質(zhì)有阿奇霉素-N-氧化物、3'-去克拉定糖阿奇霉素、氮紅霉素和阿奇霉素B；氮紅霉素和阿奇霉素B為工藝雜質(zhì)；阿奇霉素-N-氧化物和3'-去克拉定糖阿奇霉素分別為阿奇霉素的氧化和酸降解雜質(zhì)，其中3'-去克拉定糖阿奇霉素主要在成鹽過程中產(chǎn)生，并與成鹽劑的種類密切相關(guān)，提示注射用阿奇霉素的成鹽工藝是關(guān)鍵生產(chǎn)工藝；以3'-去克拉定糖阿奇霉素為指針，發(fā)現(xiàn)以檸檬酸(原研產(chǎn)品中的成鹽劑)為代表的弱酸是理想的成鹽劑，而鹽酸等強(qiáng)酸不易作為注射用阿奇霉素的成鹽劑[26]。

2014年，中檢院在的國家評價性抽驗中對阿莫西林克拉維酸鉀片劑的雜質(zhì)譜進(jìn)行了分析，在17個廠家的152批樣品中共發(fā)現(xiàn)有13個雜質(zhì)，其中阿莫西林閉環(huán)二聚體和阿莫西林噻唑酸被認(rèn)為是影響該品種關(guān)鍵質(zhì)量屬性的雜質(zhì)；通過對其來源和降解途徑的分析，認(rèn)為生產(chǎn)中的關(guān)鍵工藝為制粒工藝，其中的干燥參數(shù)為關(guān)鍵工藝參數(shù)。此外，處方的合理性也是影響樣品雜質(zhì)產(chǎn)生的關(guān)鍵因素[27]。

2017年，中檢院在的國家評價性抽驗中對頭孢拉定顆粒劑的雜質(zhì)譜進(jìn)行了分析，依據(jù)質(zhì)量源于設(shè)計的理念，探尋其關(guān)鍵質(zhì)量屬性和關(guān)鍵工藝參數(shù)。在頭孢拉定顆粒劑的特征雜質(zhì)譜中有27個雜質(zhì)，其中10個主要雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)已經(jīng)了確認(rèn)，結(jié)合對不合格產(chǎn)品的雜質(zhì)分析結(jié)果，確認(rèn)生產(chǎn)過程中防止頭孢拉定的氧化是關(guān)鍵工藝控制點(diǎn)，粒制劑過程中對制粒前溫濕度的控制是工藝控制的關(guān)鍵[28]。

3.3 利于多變量數(shù)據(jù)分析方法

對某企業(yè)不同時間段生產(chǎn)的215批五水頭孢唑林鈉原料的28項質(zhì)檢項目包括：比旋度、吸收系數(shù)、pH值、水分、有關(guān)物質(zhì)(雜質(zhì)A、雜質(zhì)B、雜質(zhì)C、雜質(zhì)F、雜質(zhì)G、雜質(zhì)H、雜質(zhì)I、雜質(zhì)J、雜質(zhì)K、雜質(zhì)L、雜質(zhì)M、雜質(zhì)N、單個未知雜質(zhì)、總雜質(zhì))、聚合物、殘留溶劑(N,N-二甲基乙酰胺、丙酮、異丙醇、二氯甲烷)、不溶性微粒(≥10μm不溶性微粒、≥25μm不溶性微粒)、松密度、緊密度、含量進(jìn)行分析，所有產(chǎn)品均符合藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定。將檢驗數(shù)值(質(zhì)量屬性)經(jīng)Z-score法標(biāo)準(zhǔn)化處理后，再利用one-way ANOVA分析，發(fā)現(xiàn)10項指標(biāo)(比旋度、水分、雜質(zhì)H、雜質(zhì)I、雜質(zhì)M、雜質(zhì)N、總雜、丙酮、≥25μm不溶性微粒、緊密度)受批次變化(類別)的影響顯著(P值＜0.01)，認(rèn)為它們可能是影響產(chǎn)品質(zhì)量的關(guān)鍵質(zhì)量屬性。通過對五水頭孢唑林鈉生產(chǎn)工藝的了解，上述10項指標(biāo)分別與結(jié)晶過程、干燥過程和GMP廠房的潔凈度控制環(huán)節(jié)相關(guān)聯(lián)：結(jié)晶過程中的最適溫度范圍、持續(xù)時間等因素均可影響各種工藝雜質(zhì)(雜質(zhì)H、雜質(zhì)I、雜質(zhì)M和雜質(zhì)N)在成品中的含量，進(jìn)而影響產(chǎn)品的比旋度、總雜質(zhì)含量等質(zhì)量屬性；結(jié)晶過程中有機(jī)溶劑的添加速率和溫度等可影響晶體粒度的大小，進(jìn)而影響成品的緊密度等質(zhì)量屬性。即在上述的10項指標(biāo)中，7項(比旋度、雜質(zhì)H、雜質(zhì)I、雜質(zhì)M、雜質(zhì)N、總雜質(zhì)、緊密度)與結(jié)晶工藝息息相關(guān)，產(chǎn)品間丙酮和水分含量的變異與干燥工藝相關(guān)，≥25μm不溶性微粒的數(shù)目可在一定程度上反映廠房的潔凈程度。由此可知，結(jié)晶過程和干燥過程是五水頭孢唑林鈉原料藥生產(chǎn)的關(guān)鍵工藝。利用這10項指標(biāo)通過聚類分析，產(chǎn)品可被劃分為不同的類；逐一分析這些指標(biāo)對產(chǎn)品聚類結(jié)果的影響，發(fā)現(xiàn)比旋度可有效地反映出五水頭孢唑林鈉原料結(jié)晶工藝的變異；水分或丙酮的含量可反映干燥工藝對五水頭孢唑林鈉終產(chǎn)品的影響。即在上述可能影響產(chǎn)品質(zhì)量的10個關(guān)鍵質(zhì)量屬性中，比旋度、水分/丙酮可用來表征五水頭孢唑林鈉生產(chǎn)過程一致性的最有效指針(未發(fā)表資料)。

4 抗生素注射劑參比制劑的選擇

仿制藥一致性評價過程中，需要以參比制劑實物標(biāo)準(zhǔn)，通過質(zhì)量對比研究，保證仿制藥品與參比制劑在臨床中具有相同安全性與有效性。因此，參比制劑的選擇直接影響仿制藥一致性評價工作的質(zhì)量。本文通過對3個典型抗生素注射劑的分析，探討參比制劑選擇過程中的關(guān)注點(diǎn)。

4.1 關(guān)注原研產(chǎn)品處方工藝的合理性

注射用頭孢孟多酯鈉的原研產(chǎn)品為頭孢孟多酯鈉與5%碳酸鈉的混粉，1978年由美國禮來公司研發(fā)上市。貯存中注射用頭孢孟多酯鈉易水解產(chǎn)生頭孢孟多，溶解時引起溶液的pH下降，可能導(dǎo)致溶液變渾濁。在產(chǎn)品中加入碳酸鈉或氨基丁三醇可以改善溶液的渾濁[12]。國內(nèi)的研究發(fā)現(xiàn)，含5%碳酸鈉的注射用頭孢孟多酯鈉的溶液澄清度的不合格率明顯降低，其總不良反應(yīng)例數(shù)也遠(yuǎn)低于不含碳酸鈉的注射用頭孢孟多酯鈉[13]。提示含5%碳酸鈉的混粉產(chǎn)品更合理，即參比制劑應(yīng)選擇原研處方的注射用頭孢孟多酯鈉。

4.2 關(guān)注制藥技術(shù)的發(fā)展方向

注射用頭孢匹胺鈉原研產(chǎn)品系1985年在日本上市的由日本住友制藥公司與山之內(nèi)制藥公司聯(lián)合開發(fā)的產(chǎn)品。因為當(dāng)時沒能找到適宜的成鹽劑與頭孢匹胺成鹽，并獲得頭孢匹胺鈉結(jié)晶，故選用成鹽后直接凍干工藝生產(chǎn)；由于苯甲酸鈉作為成鹽反應(yīng)的相轉(zhuǎn)移催化劑無法從產(chǎn)品中去除，導(dǎo)致終產(chǎn)品為頭孢匹胺鈉與一定量的苯甲酸鈉的混合物。伴隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，目前已經(jīng)尋找到適宜成鹽劑，并能得到穩(wěn)定的頭孢匹胺鈉晶體，使得溶媒結(jié)晶工藝成為生產(chǎn)頭孢匹胺鈉的主流工藝。相對于溶媒結(jié)晶工藝產(chǎn)品，凍干工藝的產(chǎn)品雜質(zhì)含量偏高且穩(wěn)定性較差，且由于含有一定量的苯甲酸鈉，作為靜脈給藥的注射劑使其增加了不必要的安全性風(fēng)險。近10年的不良反應(yīng)監(jiān)測結(jié)果揭示，溶媒結(jié)晶工藝產(chǎn)品的總不良反應(yīng)例數(shù)遠(yuǎn)低于凍干工藝產(chǎn)品[29]。因此，參比制劑應(yīng)選擇溶媒結(jié)晶工藝的注射用頭孢匹胺鈉，以代表當(dāng)前制藥技術(shù)的發(fā)展方向。

4.3 關(guān)注產(chǎn)品的特殊性

注射用頭孢唑林鈉由日本藤澤藥品株式會社于1971年開發(fā)上市。為保證產(chǎn)品的穩(wěn)定性，原研最初采用結(jié)晶脫水工藝生產(chǎn)：即首先結(jié)晶先得到α-頭孢唑林鈉，再減壓脫水得到脫水結(jié)晶性產(chǎn)品。結(jié)晶脫水工藝的生產(chǎn)成本較高，為降低生產(chǎn)成本，仿制藥多采用冷凍干燥法生產(chǎn)無定型頭孢唑林鈉。無定型頭孢唑林鈉與膠塞的相容性較差，導(dǎo)致貯存過程中產(chǎn)品的澄清度極易不符合中國藥典的規(guī)定[30]。伴隨著對頭孢唑林鈉水合物特性的認(rèn)知，通過完善結(jié)晶工藝，控制貯運(yùn)條件等措施，頭孢唑林鈉水合物(α-頭孢唑林鈉、五水頭孢唑林鈉)產(chǎn)品分別在日本和國內(nèi)上市。頭孢唑林鈉水合物不僅在成本上明顯低于結(jié)晶脫水工藝產(chǎn)品，其制劑在雜質(zhì)含量、與膠塞的相容性等方面均優(yōu)于凍干法生產(chǎn)的無定型頭孢唑林鈉產(chǎn)品；頭孢唑林鈉水合物的嚴(yán)重不良反應(yīng)的發(fā)生率也明顯較無定型產(chǎn)品低[20]；目前原研企業(yè)已經(jīng)放棄結(jié)晶脫水工藝生產(chǎn)頭孢唑林鈉，而直接生產(chǎn)頭孢唑林鈉水合物(α-頭孢唑林鈉)。但頭孢唑林鈉水合物僅適合采用玻璃瓶包裝。對以塑料膜為包材如雙室袋等的新型制劑，由于包材的氣密性較玻璃瓶差，較難保證貯運(yùn)期間頭孢唑林鈉水合物的水分子不從晶格中逸出，因此該類制劑仍需以冷凍干燥法的無定型頭孢唑林鈉為原料進(jìn)行生產(chǎn)。即結(jié)晶工藝生產(chǎn)的頭孢唑林鈉水合物與冷凍干燥法生產(chǎn)的無定型頭孢唑林鈉對特定的制劑類型均體現(xiàn)出一定的優(yōu)勢。對此類產(chǎn)品，是否需要針對不同的制劑類型選擇不同的參比制劑值得思考。

5 結(jié)論

對抗生素注射劑的一致性評價應(yīng)在對仿制藥與原研藥品安全性、有效性與生產(chǎn)一致性(manufacturing consistency)總體評估的基礎(chǔ)上，企業(yè)通過對產(chǎn)品處方、工藝、質(zhì)控水平的評估與提高，保證產(chǎn)品的臨床療效。多年來中檢院組織的國家評價性抽驗工作，已經(jīng)積累了大量的國產(chǎn)仿制藥質(zhì)量信息，對其進(jìn)行合理的分析與利用，有利于促進(jìn)一致性評價工作的開展。適宜的參比制劑的選擇直接影響一致性評價工作的質(zhì)量。應(yīng)以臨床指標(biāo)(安全、有效)為關(guān)鍵指針，選擇處方、工藝合理、代表藥品生產(chǎn)發(fā)展方向的主流產(chǎn)品作為參比制劑，且應(yīng)考慮不同制劑的特殊性。