郭鈺潔 ,胡曉宇 ,陸樹林 ,楊新軍 ,陸彥名 ,沈鴻武 ,馬彩虹 ,郝志明
(1.天津農(nóng)學(xué)院動科系,天津 300384;2.甘肅龍麒生物科技股份有限公司,瓜州 736100)
尿液檢查是獸醫(yī)臨床上的常規(guī)檢查,其對泌尿器官疾病、內(nèi)分泌和代謝疾病、肝膽疾病以及血液和造血系統(tǒng)疾病等的診斷具有重要意義[1]。然而,在包括驢在內(nèi)的許多動物,由于尿液采集困難,致使尿液檢查并沒有得到切實(shí)的應(yīng)用,即使在科研領(lǐng)域,也未曾見到相關(guān)的報(bào)道。因此,本試驗(yàn)采集了17頭輸精母驢的尿液樣品,并對其進(jìn)行了顯微鏡檢查和尿10項(xiàng)檢查,現(xiàn)就檢查結(jié)果總結(jié)如下。
母驢在人工輸精后,通常會排尿。在母驢排尿時(shí),接收尿液至樣品收集管中,做好標(biāo)記,記錄驢號和采樣時(shí)間,放入-18℃冰箱冷凍室保存待用。
尿液解凍后混合均勻,觀察其顏色和渾濁度;此后將尿液樣品放入離心機(jī)(TAZ4A-WS,湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開發(fā)有限公司產(chǎn)品),3 000 r/min離心10 min,然后對上清液的顏色和渾濁度以及下部沉淀進(jìn)行觀察,并對尿液總重量以及沉淀重量稱量。
取少量混合均勻的尿液于載玻片上,蓋上蓋玻片,置顯微鏡下觀察。重點(diǎn)觀察尿液中的結(jié)晶成分和細(xì)胞成分。
取少許尿液離心上清液,滴于尿10項(xiàng)檢查試紙條上,保證試紙條上每個(gè)反應(yīng)塊都有尿液浸潤,然后用吸水紙吸去多余尿液,將試紙條放入尿10項(xiàng)測定儀(型號BM260,北京寶靈曼陽光科技有限公司產(chǎn)品)中進(jìn)行測定,并做好記錄。
混勻的尿液為白色或黃色的渾濁液體,看上去似面湯或小米湯。離心后,上清液為無色或黃色透明液體,底部見有白色細(xì)沙樣沉淀,見圖1。13個(gè)無精子尿液樣品中全部都有沉淀存在,白色沉淀發(fā)生的比率為100%。對沉淀物進(jìn)行干燥后稱重發(fā)現(xiàn),沉淀物的平均重量占尿液總重量的3.0%(0.4%~7.3%)。
圖1 離心后的輸精母驢尿液
2.2.1 尿結(jié)石結(jié)晶 驢尿液中的尿結(jié)晶有大、中和小3種(見圖2),大的結(jié)晶多為較不規(guī)則的長塊狀,有的則呈較規(guī)則的長六邊形;小的結(jié)晶很小,形狀較為一致,呈雙聯(lián)球形或“8”字形;中等大小的結(jié)晶色較暗,圓球形,相互聚集成小的葡萄串樣。經(jīng)與有關(guān)資料[2]核對,它們分別與馬尿酸結(jié)晶和尿酸鹽結(jié)晶相類似。
圖2 顯微鏡下的尿結(jié)晶
2.2.2 精子 本試驗(yàn)共鏡檢了17頭輸精母驢的尿液,其中發(fā)現(xiàn)4頭母驢的尿液中含有精子,尿液中精子的檢出率23.5%(4/17)。另外,由于精液中還含有精漿和卵黃,造成尿液中紅白細(xì)胞、蛋白質(zhì)和葡萄糖明顯增加,因此在尿10項(xiàng)檢查中去除了這4頭含有精子的尿液樣品,以保證尿液檢查的準(zhǔn)確性。
從表1和表2測定結(jié)果來看,輸精母驢尿液的比重平均 1.012(1.000~1.030),pH 值平均 8.23(8.00~9.00)。所有輸精母驢的尿液中均未檢出紅細(xì)胞、亞硝酸鹽、酮體、膽紅素、尿膽原以及葡萄糖,大部分輸精母驢尿液中也未檢出白細(xì)胞(92.3%)和蛋白質(zhì)(69.2%),13頭母驢中只有1頭檢出15 ery/μL的白細(xì)胞,4頭檢出15 g/L或30 g/L的蛋白質(zhì)。不同尿液顏色間進(jìn)行比較,各指標(biāo)間均沒有明顯差異(P>0.05);烏驢和三粉驢相比,除了白細(xì)胞數(shù)差異顯著(P<0.05)外,其他各指標(biāo)間也沒有顯著不同(P>0.05)。
表1 輸精母驢尿液10項(xiàng)檢查結(jié)果(n=13)
表2 不同品種驢和不同顏色尿液的10項(xiàng)檢查結(jié)果
驢尿液的研究其實(shí)主要是其醫(yī)用功能的研究。在我國古中醫(yī)中,驢尿是一味藥,其性辛寒,有小毒,主治癥癖、反胃不止和牙痛。2018年,左曉佳等[3]對驢尿中的結(jié)合雌激素進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)驢尿中含有較強(qiáng)雌激素活性的馬烯雌酮,該提取物在小鼠上應(yīng)用,不僅能夠增強(qiáng)子宮的功能,還能使子宮頸口打開和陰道上皮細(xì)胞角質(zhì)化。但不管怎樣,截至目前還未見到有人將在人和寵物醫(yī)療中廣泛應(yīng)用的尿液檢查應(yīng)用于驢的疾病診斷上,連驢尿液檢查的研究報(bào)道也未見到,更不用說尿10項(xiàng)檢查項(xiàng)目的正常范圍了。從本試驗(yàn)對輸精母驢的研究結(jié)果來看,與人和大多數(shù)的動物一樣,正常驢的尿液中不含紅細(xì)胞、亞硝酸鹽、酮體、膽紅素、尿膽原和葡萄糖,大多數(shù)情況下也不含白細(xì)胞和蛋白質(zhì),少數(shù)驢尿液中出現(xiàn)白細(xì)胞或/和蛋白質(zhì),可能與母驢處在發(fā)情期以及輸精精液的返流有關(guān)。另外,就尿的比重和pH值而言,似乎驢的尿比重上限較犬貓的明顯偏低(犬:1.001~1.065;貓:1.001~1.080)[4];而驢的尿液 pH 值則比犬貓明顯高(犬:4.5~7.5;貓:4.4~7.5)[5],說明驢的尿液明顯偏堿性。
有不少人認(rèn)為,驢的尿液應(yīng)該與人或其他動物的一樣,是清亮的透明液體,看到渾濁的面湯樣的驢尿認(rèn)為驢患有疾病,但從本研究來看,所有驢的尿液中都含有微小的白色尿結(jié)晶,正是這些白色結(jié)晶造成了尿液的渾濁,因此驢尿渾濁屬正?,F(xiàn)象。從形態(tài)上初步判斷,這些白色的尿結(jié)晶可能是馬尿酸結(jié)晶和尿酸鹽結(jié)晶。至于為什么驢的尿結(jié)晶這么常見,可能與驢的消化道結(jié)構(gòu)、草料組成以及堿性體質(zhì)有關(guān)。
本研究的尿液鏡檢發(fā)現(xiàn),有4頭母驢的尿液中含有精子,精子的檢出率23.5%(4/17)。尿液中含有精子與尿液樣品從剛輸精后的母驢上收集有關(guān)。驢輸精或本交后母驢通常會出現(xiàn)排尿,正是排尿時(shí)的努責(zé)將輸入或射入子宮的精子隨尿液排出體外,可見輸精母驢精液返流的嚴(yán)重性,這也應(yīng)該是母驢配種受胎率較低的原因之一,表明抑制輸精后母驢的排尿,可能能夠提高輸精和本交母驢的受胎率。