文/劉園園

虹鱒魚(yú)屬鮭形目、鮭科魚(yú)類(lèi)。目前是葫蘆島市冷水魚(yú)類(lèi)養(yǎng)殖的主要品種。然而，隨著虹鱒魚(yú)養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)大，養(yǎng)殖產(chǎn)量、產(chǎn)值的不斷提高，疫病問(wèn)題也日漸突顯，特別是近年來(lái)，困擾筆者和養(yǎng)殖戶(hù)的傳染性造血器官壞死?。↖HN），給養(yǎng)殖戶(hù)造成極大的經(jīng)濟(jì)損失，嚴(yán)重的挫傷了養(yǎng)殖者的積極性，也給科技人員帶來(lái)了很大困擾。2017年4月結(jié)合遼寧省水產(chǎn)技術(shù)推廣總站實(shí)施的“虹鱒魚(yú)IHN疫苗的初步應(yīng)用”項(xiàng)目，葫蘆島市水產(chǎn)技術(shù)推廣站在本地區(qū)采用滅活疫苗分別進(jìn)行了注射滅活疫苗與無(wú)注射魚(yú)苗的對(duì)比、注射不同部位及運(yùn)用浸泡滅活疫苗的方法的對(duì)比試驗(yàn)。本人有幸參與了項(xiàng)目全程，現(xiàn)將試驗(yàn)情況總結(jié)如下：

一、材料與方法

（一）試驗(yàn)時(shí)間與地點(diǎn)

本次試驗(yàn)時(shí)間為：2017年4月27日～2018年4月30日；試驗(yàn)地點(diǎn)選在建昌縣文臣冷水魚(yú)養(yǎng)殖專(zhuān)業(yè)合作社。

（二）試驗(yàn)材料

1.接種疫苗、試驗(yàn)物質(zhì)的準(zhǔn)備

此次虹鱒魚(yú)滅活疫苗是由遼寧出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心動(dòng)物檢驗(yàn)科利用遼寧省本溪市虹鱒魚(yú)養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)病魚(yú)研制的油乳劑滅活疫苗。疫苗性狀為乳白色油狀液體，規(guī)格500mL；麻醉藥品為乙二醇苯醚（分析純AR）；注射器選擇一次性1mL獸醫(yī)用塑料注射器。另備有16號(hào)針頭、抄網(wǎng)、矮凳、魚(yú)桶、下水褲、手套、水質(zhì)監(jiān)測(cè)儀、酒精、棉簽、食鹽等。

2.接種虹鱒魚(yú)的選擇和暫養(yǎng)

本次接種疫苗的虹鱒魚(yú)為養(yǎng)成商品魚(yú)的魚(yú)種和親魚(yú)，虹鱒魚(yú)的選擇要求規(guī)格一致、健康。本試驗(yàn)選擇的是25g/尾～30g/尾的虹鱒魚(yú)魚(yú)種。

3.注射前的準(zhǔn)備工作

（1）麻醉藥物的配制和魚(yú)體麻醉操作：將50g乙二醇苯醚加入200L清水進(jìn)行稀釋配制成麻醉液，然后將麻醉液放入魚(yú)桶中。將挑選后需要接種疫苗的虹鱒魚(yú)魚(yú)種放入盛有麻醉液的魚(yú)桶中進(jìn)行麻醉（圖1），以魚(yú)種在魚(yú)桶中不游動(dòng)為宜，然后開(kāi)始疫苗接種。

（2）暫養(yǎng)網(wǎng)箱制作與安裝：暫養(yǎng)網(wǎng)箱采用的是聚乙烯網(wǎng)布，網(wǎng)目為0.1cm?？蚣転椤疤铩币?guī)格為1.2m×0.8m×0.3m，材料采用Φ10螺紋鋼進(jìn)行焊接，在“田”字形框架中間用螺紋鋼焊接，以增加框架強(qiáng)度。整體網(wǎng)用直徑為3mm的聚乙烯繩與框架固定。暫養(yǎng)網(wǎng)箱一般安裝在要注射疫苗的魚(yú)池中，要求網(wǎng)箱柱腳距池底8cm為宜，便于水體流通。

（3）注射部位及劑量的選擇：本次疫苗注射部位為背鰭基部或腹鰭基部注射（圖2）；注射劑量是0.1mL/尾。

（三）試驗(yàn)方法

1.注射法接種疫苗效果試驗(yàn)

圖1 工作人員對(duì)虹鱒魚(yú)苗進(jìn)行麻醉

圖2 工作人員對(duì)虹鱒魚(yú)苗進(jìn)行滅活疫苗注射

本次試驗(yàn)所用對(duì)象為虹鱒魚(yú)和金鱒魚(yú)，規(guī)格為25g/尾～30g/尾，體長(zhǎng)為10cm～13cm。試驗(yàn)魚(yú)種共60尾，30尾虹鱒魚(yú)和30尾金鱒魚(yú)。先將選擇好的虹鱒魚(yú)和金鱒魚(yú)放入事先配制好的麻醉液中進(jìn)行麻醉。待所有魚(yú)種麻醉好后，以每尾魚(yú)0.1mL的劑量進(jìn)行疫苗注射接種。30尾虹鱒魚(yú)進(jìn)行腹鰭基部注射，30尾金鱒魚(yú)進(jìn)行背鰭基部注射。具體操作方法是用手托住麻醉好的魚(yú)，針頭與注射部位成45°夾角，注射深度0.3cm～0.5cm，注射劑量是0.1mL/尾。然后迅速將注射疫苗后的魚(yú)放入暫養(yǎng)網(wǎng)箱中，并監(jiān)測(cè)和記錄接種疫苗后虹鱒魚(yú)的相關(guān)數(shù)據(jù)（表1）。同樣，對(duì)照組所用的網(wǎng)箱、魚(yú)體的規(guī)格及養(yǎng)殖條件和管理水平要與試驗(yàn)組相同，并做好相關(guān)數(shù)據(jù)的監(jiān)測(cè)和記錄，以便于對(duì)比。

從表1可以看出：注射疫苗的虹鱒魚(yú)的成活率遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于無(wú)注射疫苗的虹鱒魚(yú)；背鰭基部部位注射的虹鱒魚(yú)成活率大于腹鰭基部注射的虹鱒魚(yú)。

2.浸泡法接種滅活疫苗效果試驗(yàn)

浸泡滅活疫苗試驗(yàn)是水溫在13℃～18℃時(shí)進(jìn)行的。浸泡苗種規(guī)格為25g/尾～30g/尾，體長(zhǎng)在10cm～13cm虹鱒魚(yú)苗。方法是先按0.5%疫苗濃度進(jìn)行配置于魚(yú)桶中，并加入充氧設(shè)備，然后將需接種的虹鱒魚(yú)放入盛有疫苗的魚(yú)桶中進(jìn)行浸浴接種；一般每次接種時(shí)間2h為宜。本試驗(yàn)接種虹鱒魚(yú)數(shù)量為300尾（試驗(yàn)數(shù)據(jù)見(jiàn)表2）。

表1 注射滅活疫苗對(duì)虹鱒魚(yú)預(yù)防效果的試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)

表2 浸泡滅活疫苗對(duì)虹鱒魚(yú)預(yù)防效果的試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)

從表2可以看出浸泡法接種該疫苗，免疫效果也很好，成活率可達(dá)90%。

二、結(jié)果與討論

利用傳染性造血器官壞死病毒滅活疫苗進(jìn)行預(yù)防接種在本地區(qū)虹鱒魚(yú)養(yǎng)殖中尚屬首次，從試驗(yàn)效果來(lái)看，不管是注射法還是浸泡法接種，免疫效果都很好，接種后虹鱒魚(yú)的成活率都達(dá)到90%以上。試驗(yàn)證明接種虹鱒魚(yú)IHN疫苗是預(yù)防虹鱒魚(yú)傳染性造血器官壞死病毒病很好的方法。

從試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，注射法和浸泡法接種該疫苗，在虹鱒魚(yú)成活率上還有不同，注射法接種成活率要高于浸泡法接種，分析其原因主要是注射法接種疫苗直接注射到魚(yú)體肌肉中，疫苗的免疫效果直接也較快，再就是魚(yú)體獲得的疫苗量準(zhǔn)確。浸泡法接種是通過(guò)魚(yú)體的滲透作用原理使疫苗進(jìn)入魚(yú)體的，受水溫、疫苗濃度、每次接種魚(yú)的數(shù)量等原因影響，所以接種效果就差些。但注射法接種在技術(shù)操作中專(zhuān)業(yè)性較強(qiáng)，如果操作不熟練或操作不當(dāng)對(duì)魚(yú)體的損傷較大，相反浸泡法接種操作相對(duì)簡(jiǎn)單些、實(shí)用些，對(duì)魚(yú)體傷害也較小。建議在實(shí)際操作過(guò)程中要根據(jù)具體情況，選擇適合的方法，要具體分析，因人而異。

本次接種疫苗的虹鱒魚(yú)規(guī)格為25g/尾～30g/尾，接種劑量是項(xiàng)目專(zhuān)家組的建議的用量即注射劑量是0.1mL/尾、浸浴濃度為0.5%。但在實(shí)際生產(chǎn)中，虹鱒魚(yú)的規(guī)格不可能都是25g/尾～30g/尾，可能大也可能小，因此接種劑量也要不同，具體采取什么濃度需要在今后的試驗(yàn)中繼續(xù)總結(jié)。

眾所周知，疫苗的制作一般是使用當(dāng)?shù)夭◆~(yú)的病毒，再對(duì)該地區(qū)的魚(yú)進(jìn)行接種免疫是最科學(xué)，效果也是最好的。本次試驗(yàn)的疫苗是取自本溪市患病的魚(yú)體，由遼寧出入境檢驗(yàn)檢疫局研制的虹鱒魚(yú)IHN滅活疫苗。而本地區(qū)本批虹鱒魚(yú)的發(fā)眼卵來(lái)自本溪，試驗(yàn)證明，本次試驗(yàn)的免疫效果也很好。如若采用本地區(qū)的虹鱒魚(yú)發(fā)病的魚(yú)制作疫苗效果可能會(huì)更好。