陳君君
(蘇州農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院,江蘇蘇州 215008)
脂質(zhì)過(guò)氧化是造成肉類(lèi)品質(zhì)下降的主要原因,包括產(chǎn)生異味、多不飽和脂肪酸、脂溶性維生素和色素,以及產(chǎn)生過(guò)氧化物和醛類(lèi)等有毒化合物(Morrissey等,1994)。通常添加在豬飼料中添加抗氧化劑改善抗氧化狀態(tài),防止肉類(lèi)發(fā)生氧化反應(yīng)。生育酚是體內(nèi)主要的脂溶性抗氧化劑(Burton等,1982),而維生素E是8種天然化合物的統(tǒng)稱(chēng)(Rimbach等,2002)。有研究表明,日糧添加維生素E超過(guò)需要量時(shí),可以顯著改善生長(zhǎng)和育肥期豬肉的肉質(zhì)和屠宰性能,如肌肉pH、導(dǎo)電性、肉色和滴水損失(Guo等,2006),但 Hasty等(2002)研究顯示,日糧添加維生素E對(duì)上述指標(biāo)無(wú)顯著影響。茶多酚是由綠茶中提取的富含黃酮醇的物質(zhì),其中表兒茶素-3-沒(méi)食子酸酯、表兒茶素-3-沒(méi)食子酸酯和表兒茶素是綠茶中主要的兒茶素,具有強(qiáng)大的抗氧化活性,可直接抑制自由基或再生維生素E等內(nèi)源性抗氧化劑(Leung等,2001)。Frank等(2006)研究發(fā)現(xiàn),日糧添加2 mg/kg表兒茶素和兒茶酸可以顯著提高大鼠組織和血漿α-生育酚含量,同時(shí)也可以抑制自由基的產(chǎn)生。因此,本試驗(yàn)在日糧中添加不同水平的茶多酚,研究其對(duì)生長(zhǎng)豬體內(nèi)維生素E狀態(tài)、抗氧化性能和肉質(zhì)的影響。
1.1 試驗(yàn)日糧與分組 試驗(yàn)選擇平均體重為(31.24±0.48)kg的三元豬240頭,隨機(jī)分為3組,每組4個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)20頭豬。試驗(yàn)共設(shè)計(jì)3種日糧,對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧,處理組在基礎(chǔ)日糧中分別添加10和100 mg/kg茶多酚,試驗(yàn)共進(jìn)行5周。試驗(yàn)前所有豬只均用相應(yīng)組別的飼料預(yù)飼5 d。試驗(yàn)期間豬只自由飲水和采食?;A(chǔ)日糧原料組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。
試驗(yàn)豬只在飼喂前通過(guò)穿刺頸靜脈將血樣抽入肝素鈉真空管,在2000 g 4℃條件下離心10 min,分離血漿,-80℃保存。試驗(yàn)進(jìn)行5周后,豬只禁食24 h二氧化碳窒息處死,同樣用肝素鈉真空管收集血液,分離血漿,-80℃保存。之后對(duì)豬只進(jìn)行屠宰,屠體在70℃熱水中浸泡10 min,收集肌肉、肝臟和肺,液氮-80℃保存。
表1 基礎(chǔ)日糧原料組成及營(yíng)養(yǎng)水平
表2 茶多酚化學(xué)組成及含量 %
1.2 血漿抗氧化性能測(cè)定 參考Re等(1999)的研究結(jié)果分析血漿總抗氧化力,同時(shí)參考Schlesier等(2002)的研究方法分析鐵還原力。
1.3 血漿和組織中生育酚和膽固醇含量 取100 mg組織樣品,2 mL乙醇處理后加入300 μL飽和氫氧化鉀,50 mL H2O和56.5 g KOH溶液用氮?dú)鉀_洗管,封閉,渦流,搖勻,在70℃下孵育30 min。隨后,樣本立即在冰和50 μL丁基羥基甲苯溶液(0.1%丁基羥基甲苯,乙醇,m/V)和2 mL正己烷。用氮?dú)鉀_洗試管,封閉混合30 s。800 g離心5 min,將1000 μL上清液轉(zhuǎn)移到干凈的試管中,血樣樣品操作方法如上,但不皂化。制備好的樣品用HPLC法分析生育酚含量。血漿膽固醇含量采用南京建成生物試劑盒測(cè)定。
1.4 肉質(zhì) 測(cè)定肌肉溫度、pH、導(dǎo)電率、顏色和滴水損失指標(biāo),用于評(píng)估肉品質(zhì)。收集的腰肌和腿肌分別在屠宰后45 min和24 h后測(cè)定肌間溫度和pH。參考Lee等(2002)的研究方法測(cè)定肌肉導(dǎo)電率、肉色和滴水損失。
1.5 統(tǒng)計(jì)分析 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS軟件,試驗(yàn)收集的數(shù)據(jù)用單因素方差分析,Ducan’s多重比較,結(jié)果用“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤差”表示。P<0.05表示組間顯著差異。
2.1 日糧添加茶多酚對(duì)生長(zhǎng)豬抗氧化狀態(tài)的影響 試驗(yàn)結(jié)束后發(fā)現(xiàn),各處理組對(duì)生長(zhǎng)豬采食量、日增重和屠宰重均無(wú)顯著影響(P>0.05)(數(shù)據(jù)未列出)。日糧添加茶多酚對(duì)生長(zhǎng)豬血漿總抗氧化力和鐵還原力的影響見(jiàn)表3。結(jié)果顯示,各處理組對(duì)生長(zhǎng)豬試驗(yàn)初期和末期血漿總抗氧化力和鐵還原力均無(wú)顯著影響(P>0.05),但對(duì)照組、10和100 mg/kg茶多酚添加組血漿試驗(yàn)?zāi)┢阼F還原力均顯著高于試驗(yàn)初期(P<0.05)。
表3 茶多酚對(duì)生長(zhǎng)豬血漿抗氧化狀態(tài)的影響
2.2 茶多酚對(duì)生長(zhǎng)豬血漿和組織維生素E狀態(tài)的影響 由表4可知,日糧添加茶多酚對(duì)生長(zhǎng)豬肝臟、肌肉、血漿α-生育酚和γ-生育酚含量均無(wú)顯著影響(P>0.05),其中肝臟生育酚含量最高,之后依次是肌肉、肺和血漿。日糧添加10或100 mg/kg茶多酚肺中α-生育酚和γ-生育酚含量較對(duì)照組有提高趨勢(shì)(P=0.09)。對(duì)照組、10和100 mg/kg茶多酚組血漿膽固醇含量分別是100.1、101.9和 101.1 mg/dL,差異不顯著(P>0.05)。
2.3 茶多酚對(duì)生長(zhǎng)豬肉質(zhì)的影響 日糧添加茶多酚對(duì)生長(zhǎng)豬肌肉pH、滴水損失和肉色的影響見(jiàn)表4。結(jié)果顯示,各組對(duì)生長(zhǎng)豬肌肉pH、滴水損失、導(dǎo)電率及亮度均無(wú)顯著影響(P>0.05)。與對(duì)照組相比,日糧添加100 mg/kg茶多酚提高了生長(zhǎng)豬屠宰后48 h肌肉的滴水損失。各組肌肉硫代巴比妥酸含量分別為1.0、1.1和0.5 μmol/kg,統(tǒng)計(jì)學(xué)分析均無(wú)顯著差異(P>0.05)。
表4 茶多酚對(duì)生長(zhǎng)豬血漿和組織α-生育酚和γ-生育酚含量的影響
表5 茶多酚對(duì)生長(zhǎng)豬肉質(zhì)的影響
α-生育酚是哺乳動(dòng)物體內(nèi)重要的脂溶性抗氧化劑(Burton等,1982)。一些研究表明,在豬飼糧中添加α-生育酚可以改善肉質(zhì)和動(dòng)物健康(Guo等,2006;Corino等,1999),但也有研究得出了不顯著的結(jié)果(Hasty等,2002)。Leung等(2001)在體外的研究表明,茶多酚含有多種抗氧化成分,但體外試驗(yàn)結(jié)果并不能完全應(yīng)用到體內(nèi)。Zhou等(2005)報(bào)道了維生素E與茶多酚的抗氧化協(xié)同作用,因此,作者推測(cè),茶多酚可以改善機(jī)體維生素E狀態(tài),保護(hù)α-生育酚被自由基氧化,所以在本試驗(yàn)中探討茶多酚對(duì)生長(zhǎng)豬機(jī)體維生素E狀態(tài)、抗氧化性能和肉品質(zhì)的影響。
本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),日糧添加茶多酚對(duì)生長(zhǎng)豬血漿總抗氧化力無(wú)顯著影響,但對(duì)照組、10和100 mg/kg茶多酚添加組血漿試驗(yàn)?zāi)┢阼F還原力均顯著高于試驗(yàn)初期,這與Yeum等(2004)的研究結(jié)果一致。末期總抗氧化力的升高與內(nèi)源性維生素C的合成量提高有關(guān),而維生素C是生長(zhǎng)豬主要的水溶性抗氧化劑,日糧茶多酚對(duì)改善血漿和組織抗氧化性能的作用受限。與人不同的是,在豬上還未有相關(guān)研究去探討過(guò)茶多酚是否可以作為機(jī)體氧化應(yīng)激和抗氧化狀態(tài)的生物標(biāo)記物(Higdon和 Frei,2003)。本試驗(yàn)日糧添加 10和100 mg/kg茶多酚,這相當(dāng)于一個(gè)70 kg的成年人攝入12或120杯綠茶所含的量(Astill等,2001)。
日糧添加茶多酚對(duì)生長(zhǎng)豬肝臟、肌肉、血漿α-生育酚和γ-生育酚含量均無(wú)顯著影響,其中肝臟生育酚含量最高,之后依次是肌肉、肺和血漿。日糧添加10或100 mg/kg茶多酚肺中α-生育酚和γ-生育酚含量較對(duì)照組有提高趨勢(shì),這與Frank等(2006)的研究結(jié)果一致。在老鼠身上已經(jīng)發(fā)現(xiàn),灌胃茶多酚使淋巴吸收的α-生育酚減少(Loest等,2002)。因此,維生素E消耗量相對(duì)較高,而茶多酚可以降低其還原作用,使機(jī)體維生素E保留的量升高。由于日糧添加茶多酚對(duì)生長(zhǎng)豬抗氧化性能無(wú)顯著影響,也對(duì)肉質(zhì)相關(guān)參數(shù)如溫度、pH、導(dǎo)電率、肉色和滴水損失無(wú)顯著影響。目前,關(guān)于茶多酚在豬上的生物學(xué)利用率還缺乏相關(guān)資料。在人上,茶多酚的損失量在1.7~3.4 h(Lee等,2002)。由于豬只屠宰前禁食24 h,可以推測(cè)茶多酚的活性可能也受到損失,從而對(duì)肉質(zhì)的影響也是短暫的。
生長(zhǎng)豬日糧添加茶多酚對(duì)組織維生素E水平、血漿抗氧化力及肌肉品質(zhì)無(wú)顯著改善作用。