郭永清，趙宇飛，任 宏，韓志金，陳愛(ài)君

（1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，內(nèi)蒙古包頭 014109；2.內(nèi)蒙古和林格爾縣職業(yè)高級(jí)中學(xué)，內(nèi)蒙古和林格爾 011500）

作為動(dòng)物的必需微量元素，硒具有促進(jìn)免疫、抗氧化和抗癌等功能。硒的缺乏可能導(dǎo)致肌肉營(yíng)養(yǎng)不良，肉質(zhì)發(fā)生滲出性素質(zhì)，肝臟壞死及桑葚心病。然而，日糧高劑量的硒會(huì)導(dǎo)致豬發(fā)生硒中毒癥狀，如脫毛，蹄裂，冠狀動(dòng)脈帶發(fā)育中斷等。飼料工業(yè)中常用的硒源是亞硒酸鈉，其價(jià)格較低，但屬于劇毒物質(zhì)，而有機(jī)硒，如酵母硒、硒代蛋氨酸的毒性小，生物學(xué)利用率高，在抗氧化、組織硒沉積等方面有顯著優(yōu)勢(shì)（Zhan等，2007）。在相關(guān)研究和應(yīng)用中，酵母硒作為營(yíng)養(yǎng)素在動(dòng)物日糧中使用較多。富硒酵母具有促進(jìn)肉雞或肥豬生長(zhǎng)性能、提高谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）活力、組織硒沉積及肉品質(zhì)（Wang和Xu，2008；Upton等，2008）。此外，硒代蛋氨酸被認(rèn)為是酵母硒中有機(jī)硒的主要形式（Kelly和 Power，1995），因此，人們認(rèn)為硒代蛋氨酸的功能可能好于酵母硒。有研究表明，硒代蛋氨酸可以改善豬、禽抗氧化性能和肉質(zhì)（Jiang等，2009）。NRC（2012）推薦的豬硒需要水平為0.15～0.30 mg/kg，而中國(guó)飼料添加劑規(guī)范中飼料中硒的最大限量為0.5 mg/kg（無(wú)論是以亞硒酸鈉還是酵母硒），但目前關(guān)于硒代蛋氨酸在斷奶仔豬中的應(yīng)用及添加量研究報(bào)道較少。因此，本試驗(yàn)在日糧中添加不同水平的硒代蛋氨酸，同時(shí)對(duì)比無(wú)機(jī)硒（亞硒酸鈉），研究其對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、抗氧化、免疫功能及血清硒含量的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與管理 試驗(yàn)選擇26 d斷奶的杜×長(zhǎng) ×大仔豬1080頭 [平均體重（9.82±1.18）kg]，隨機(jī)分為6組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)45頭。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧（硒含量為0.03 mg/kg），無(wú)機(jī)組飼喂在基礎(chǔ)日糧中添加0.4 mg/kg硒（亞硒酸鈉），有機(jī)硒組在基礎(chǔ)日糧中分別添加0.2、0.4、0.6和0.8 mg/kg硒（硒代蛋氨酸），試驗(yàn)共進(jìn)行42 d。試驗(yàn)用L-硒代蛋氨酸、亞硒酸鈉由四川新一美生物科技有限公司提供。基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。豬舍溫度維持在25℃左右，試驗(yàn)期間動(dòng)物自由采食和飲水。每天觀察仔豬的健康狀況，記錄死淘率和飼料用量。分別在試驗(yàn)第21和42天按照重復(fù)對(duì)仔豬進(jìn)行稱重。分別計(jì)算試驗(yàn)第1～21天、22～42天和1～42天平均日增重、平均日采食量、料重比和死淘率。

表1 日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.2 樣品收集與測(cè)定 在試驗(yàn)第21天和試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇10頭仔豬，禁食12 h后頸靜脈采血10 mL，分離血清，血清用于測(cè)定硒含量及生化指標(biāo)。生化指標(biāo)包括抗氧化指標(biāo)：谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）、總抗氧化力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）。免疫指標(biāo)：免疫球蛋白A、G、M（IgA、IgG和IgM）。生化指標(biāo)采用南京建成生物工程研究所的試劑盒測(cè)定。試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天，每個(gè)重復(fù)選擇的10頭仔豬采血后，進(jìn)行屠宰，分離肝臟和最長(zhǎng)肌，用于測(cè)定抗氧化指標(biāo)，測(cè)定方法同血清。

1.3 數(shù)據(jù)分析 試驗(yàn)得到的數(shù)據(jù)用SAS軟件一般線性模型進(jìn)行分析，每個(gè)重復(fù)作為一個(gè)試驗(yàn)單元，血清生化指標(biāo)每個(gè)重復(fù)做兩個(gè)平行。組間差異用SNK法進(jìn)行多重比較，P＜0.05判定為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 硒代蛋氨酸對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響由表2可知，與對(duì)照組相比，日糧添加0.4和0.8 mg/kg有機(jī)硒組顯著降低了斷奶仔豬22～42 d的料重比（P＜0.05）。對(duì)照組、無(wú)機(jī)硒組和有機(jī)硒組對(duì)1～21 d和1～42 d日增重、日采食量、料重比和死亡率均無(wú)顯著影響（P＞0.05）。

表2 硒代蛋氨酸對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

2.2 硒代蛋氨酸對(duì)斷奶仔豬抗氧化性能的影響由表3可知，與對(duì)照組和0.4 mg/kg無(wú)機(jī)硒組相比，0.4 mg/kg有機(jī)硒組血清GSH-Px和T-AOC活力顯著提高（P＜0.05）。與0.4 mg/kg無(wú)機(jī)硒組相比，0.4和0.8 mg/kg有機(jī)硒組顯著提高了血清GSH-Px活力（P＜0.05）。對(duì)照組、無(wú)機(jī)硒組和有機(jī)硒組對(duì)血清MDA含量無(wú)顯著影響（P＞0.05）。與對(duì)照組相比，0.2和0.4 mg/kg有機(jī)硒組顯著提高了肝臟GSH-Px活力（P＜0.05），而0.2 mg/kg有機(jī)組肝臟T-AOC活力最高（P＜0.05）。與對(duì)照組相比，無(wú)機(jī)硒組和有機(jī)硒組顯著降低了肝臟MDA含量（P＜0.05）。與對(duì)照組和無(wú)機(jī)硒組相比，0.4和0.6 mg/kg有機(jī)硒組肌肉GSHPx的活力顯著提高（P＜0.05）。無(wú)機(jī)硒組和有機(jī)硒組較對(duì)照組顯著降低了肌肉MDA含量（P＜0.05），各組對(duì)肌肉T-AOC活力的影響無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

表3 硒代蛋氨酸對(duì)斷奶仔豬血清、肝臟和肌肉抗氧化性能的影響

表4 硒代蛋氨酸對(duì)斷奶仔豬血清硒含量的影響 mg/L

2.3 硒代蛋氨酸對(duì)斷奶仔豬血清硒含量的影響由表4可知，0.6 mg/kg有機(jī)硒組較對(duì)照組、0.4 mg/kg無(wú)機(jī)硒組和0.2、0.4 mg/kg有機(jī)硒組顯著提高了斷奶仔豬21 d血清硒含量（P＜0.05），0.6和0.8 mg/kg有機(jī)硒組對(duì)斷奶仔豬21 d血清硒含量無(wú)顯著影響（P＞0.05）。仔豬在42 d血清硒含量隨著日糧有機(jī)硒添加水平的升高而升高，與對(duì)照組相比，0.4和0.6 mg/kg有機(jī)硒組顯著提高了仔豬42 d血清硒含量（P＜0.05）。0.8 mg/kg有機(jī)硒組較對(duì)照組和0.4 mg/kg無(wú)機(jī)硒組顯著提高了仔豬42 d血清硒含量（P＜0.05）。

2.4 硒代蛋氨酸對(duì)斷奶仔豬免疫性能的影響由表5可知，對(duì)照組、無(wú)機(jī)硒組和有機(jī)硒組對(duì)斷奶仔豬21和42 d血清IgA、IgG和IgM水平的影響無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

表5 硒代蛋氨酸對(duì)斷奶仔豬免疫性能的影響 g/L

3 討論

3.1 硒代蛋氨酸對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響硒對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)性能的影響存在一定的差異。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，日糧添加0.4和0.8 mg/kg有機(jī)硒較對(duì)照組顯著降低了斷奶仔豬22～42 d的料重比，對(duì)照組、無(wú)機(jī)硒組和有機(jī)硒組對(duì)1～21 d和1～42 d日增重、日采食量、料重比和死亡率的影響均無(wú)顯著差異。Jiang等（2009）發(fā)現(xiàn)，日糧添加0.225 mg/kg硒代蛋氨酸可以顯著提高肉雞生長(zhǎng)性能，而Zhan等（2011）報(bào)道，日糧中添加0.3 mg/kg硒代蛋氨酸較亞硒酸鈉可以顯著提高仔豬從出生到斷奶的日增重。但也有研究發(fā)現(xiàn)，無(wú)論硒的添加水平還是添加形式對(duì)生長(zhǎng)豬和肉雞的生長(zhǎng)性能均無(wú)顯著影響（Payne和Southem，2005）。結(jié)果差異與動(dòng)物品種和使用階段有很大關(guān)系，此外日糧維生素E的添加水平也對(duì)硒的效果有影響，因?yàn)榫S生素E也具有抗氧化功能，可以降低硒缺乏的影響。

3.2 硒代蛋氨酸對(duì)斷奶仔豬血清和組織抗氧化性能的影響 硒是GSH-Px的組成成分，后者是一種抗氧化酶，可以降低正常代謝過(guò)程中的過(guò)氧化和脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)（Gawel等，2004）。0.4和0.8 mg/kg硒代蛋氨酸組顯著提高了血清GSH-Px活力，而0.4和0.6 mg/kg硒代蛋氨酸組較對(duì)照組和無(wú)機(jī)硒組顯著提高了肌肉GSH-Px的活力，這與Zhan等（2011）研究結(jié)果一致。但Mahan等（1999）研究報(bào)道，亞硒酸鈉比酵母硒更能滿足生長(zhǎng)和育肥豬硒蛋白的需求。T-AOC是反映整個(gè)機(jī)體抗氧化能力的一個(gè)重要指標(biāo)，而MDA的含量可以反映細(xì)胞多不飽和脂肪酸的過(guò)氧化程度，是評(píng)判機(jī)體發(fā)生氧化應(yīng)激的指標(biāo)。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，對(duì)照組、無(wú)機(jī)硒組和有機(jī)硒組對(duì)血清MDA含量的影響無(wú)顯著差異，而0.2 mg/kg有機(jī)組肝臟T-AOC活力最高；與對(duì)照組相比，無(wú)機(jī)硒組和有機(jī)硒組顯著降低了肝臟MDA含量；與對(duì)照組相比，無(wú)機(jī)硒組和有機(jī)硒組顯著降低了肌肉MDA含量。Wang等（2011）指出，與亞硒酸鈉相比，日糧添加0.15 mg/kg硒代蛋氨酸顯著提高了血清和組織中T-AOC活力，顯著降低了MDA含量。

3.3 硒代蛋氨酸對(duì)斷奶仔豬血清硒含量和免疫指標(biāo)的影響 在42 d仔豬血清硒含量隨日糧有機(jī)硒添加水平的升高而升高，與對(duì)照組相比，0.4和0.6 mg/kg有機(jī)硒組顯著提高了仔豬42 d血清硒含量，而0.8 mg/kg有機(jī)硒組較對(duì)照組和0.4 mg/kg無(wú)機(jī)硒組顯著提高了仔豬42 d血清硒含量。Kim和Mahan（2003）研究發(fā)現(xiàn)，與亞硒酸鈉相比，富硒酵母組血清硒含量提高了2倍。無(wú)機(jī)硒和有機(jī)硒的代謝途徑不同，兩種形式的硒都可以作為GSH-Px的成分，但硒代蛋氨酸可以和蛋白質(zhì)結(jié)合替代部分蛋氨酸，同時(shí)它也可以代謝成S-腺苷甲硫氨酸的類似物，進(jìn)一步發(fā)生轉(zhuǎn)甲基反應(yīng)參與多胺合成，與蛋氨酸相應(yīng)的含硫代謝物相似（Schrauzer，2000）。日糧硒或維生素E缺乏會(huì)提高機(jī)體的抗體反應(yīng)，但硒或維生素E中的任何一種滿足動(dòng)物需求時(shí)，抗體反應(yīng)會(huì)降低（Hayek等，1989）。

4 結(jié)論

日糧添加硒代蛋氨酸可以改善斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能，提高抗氧化性能和血清硒含量，斷奶仔豬適宜的硒代蛋氨酸添加水平為0.2～0.4 mg/kg（以硒計(jì)）。