楊文東 安振國(guó)

相關(guān)研究顯示，胰島素抵抗與氧化應(yīng)激是導(dǎo)致2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)患者并發(fā)心、腦、腎等重要器官功能和結(jié)構(gòu)改變的主要原因，且幽門螺旋桿菌(helicobacter pylori，Hp)感染可加劇病情的發(fā)生及發(fā)展[1-3]。為此，筆者鑒于游離脂肪酸(free fatty acid，F(xiàn)FA)表達(dá)水平的升高與胰島素抵抗密切相關(guān)[4-5]，丙二醛(malondialdehyde，MDA)的表達(dá)水平及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)的活性可直接反映氧化應(yīng)激的程度[6]，遂于本研究中對(duì)比觀察了T2DM合并Hp感染對(duì)血清FFA、MDA表達(dá)水平及SOD活性的影響，以期為T2DM合并Hp感染者易患心、腦、腎等重要器官疾病的作用機(jī)制提供理論依據(jù)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 臨床資料

1.1 研究對(duì)象

選取2017年1月至2018年6月利津縣第二人民醫(yī)院收治的160例T2DM患者(設(shè)為T2DM組)及50例健康體檢者(設(shè)為對(duì)照組)作為研究對(duì)象，其中T2DM組男性96例、女性64例，年齡(58.1±10.3)歲；對(duì)照組男性29例、女性21例，年齡(57.6±9.8)歲。兩組研究對(duì)象性別分布情況對(duì)比采用四格表資料的卡方檢驗(yàn)，χ2=0.063，P=0.801，P>0.05，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性；年齡對(duì)比采用t檢驗(yàn)，t=0.303，P=0.762，P>0.05，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。本研究經(jīng)利津縣第二人民醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，且所有研究對(duì)象均簽署了知情同意書。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)

(1)T2DM組患者：符合2013年中華醫(yī)學(xué)會(huì)糖尿病學(xué)分會(huì)制定的中國(guó)糖尿病防治指南中的診斷及分型標(biāo)準(zhǔn)[7]；對(duì)本研究知情，并自愿簽署知情同意書。(2)對(duì)照組健康體檢者：經(jīng)體檢科體檢，身體基本健康；對(duì)本研究知情，并自愿簽署知情同意書。

1.3 排除標(biāo)準(zhǔn)

(1)患有嚴(yán)重心、腦、肝、腎等重要器官疾病者；(2)患有嚴(yán)重血液系統(tǒng)疾病者；(3)患有精神疾病者；(4)因各種原因無(wú)法配合完成試驗(yàn)者。

1.4 主要試劑與儀器

FFA檢測(cè)試劑盒：上海申能-德賽診斷技術(shù)有限公司提供；SOD活性檢測(cè)試劑盒：美康生物科技股份有限公司提供；MDA檢測(cè)試劑盒：南京建成生物工程研究所提供；14C-尿素膠囊及HUBT-20P型幽門螺旋桿菌測(cè)試儀：深圳市中核海得威生物科技公司提供；AU680全自動(dòng)生化分析儀：美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特有限公司提供；752型紫外可見分光光度計(jì)(532 nm)：上?，F(xiàn)科分光儀器有限公司提供。

2 方法

2.1 標(biāo)本采集

晨起(空腹10 h以上)抽取肘部靜脈血5 mL，并于自然凝固后1400 g離心10 min，取2 mL血清備用(需12 h內(nèi)使用完畢)。

2.2 標(biāo)本檢測(cè)

標(biāo)本采集完畢后，按照試劑盒說(shuō)明書采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清中FFA的表達(dá)水平、TBA法檢測(cè)血清中MDA的表達(dá)水平、比色法檢測(cè)血清中SOD的活性。

采用14C尿素呼氣試驗(yàn)(14C-UBT)檢測(cè)研究對(duì)象的Hp感染情況：空腹或進(jìn)食2 h后漱口并用約20 mL的溫開水送服1粒尿素膠囊，靜坐25 min后行呼氣試驗(yàn)。

2.3 Hp感染診斷標(biāo)準(zhǔn)

14C-UBT測(cè)定值<50 dpm/mmol CO2為Hp陰性；14C-UBT測(cè)定值≥50 dpm/mmol CO2為Hp陽(yáng)性，即現(xiàn)存Hp感染。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

3 結(jié)果

3.1 血清FFA、MDA表達(dá)水平及SOD活性對(duì)比

T2DM組患者血清FFA表達(dá)水平為(0.78±0.21)mmol/L、MDA表達(dá)水平為(11.17±2.48)nmol/mL、SOD活性值為(91.53±8.79)U/mL，對(duì)照組健康體檢者血清FFA表達(dá)水平為(0.47±0.14)mmol/L、MDA表達(dá)水平為(4.81±1.04)nmol/mL、SOD活性值為(135.90±9.99)U/mL，兩組研究對(duì)象血清FFA、MDA表達(dá)水平及SOD活性對(duì)比，P均<0.01，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表1)。即T2DM患者體內(nèi)FFA表達(dá)水平明顯升高，氧化應(yīng)激反應(yīng)明顯增強(qiáng)。

表1 兩組研究對(duì)象血清FFA、MDA表達(dá)水平及SOD活性對(duì)比Table 1 Comparison of the expression levels of FFA and MAD, and SOD activity between the two

注：兩組研究對(duì)象血清FFA、MDA表達(dá)水平及SOD活性對(duì)比，P均<0.01，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

Note: Statistically significant differences were observed when the expression levels of serum FFA and MDA, and SOD activity were respectively compared between the two groups, allP<0.01

3.2 Hp感染情況及Hp感染者與非感染者血清FFA、MDA表達(dá)水平與SOD活性對(duì)比

對(duì)照組健康體檢者均無(wú)Hp感染；T2DM組患者中存在Hp感染者69例(Hp感染率為43.1%)，其中男性39例、女性30例，年齡(59.7±9.4)歲；非Hp感染者中男性57例、女性34例，年齡(56.9±9.9)歲。Hp感染者與非感染者性別分布情況對(duì)比采用四格表資料的卡方檢驗(yàn)，χ2=0.612，P=0.515，P>0.05，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性；年齡對(duì)比采用t檢驗(yàn)，t=1.811，P=0.072，P>0.05，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

Hp感染者血清FFA表達(dá)水平為(0.91±0.24)mmol/L、MDA表達(dá)水平為(14.65±2.30)nmol/mL、SOD活性值為(77.49±7.98)U/mL，非Hp感染者血清FFA表達(dá)水平為(0.68±0.16)mmol/L、MDA表達(dá)水平為(8.53±1.97)nmol/mL、SOD活性值為(102.17±9.05)U/mL，Hp感染者與非感染者血清FFA、MDA表達(dá)水平及SOD活性對(duì)比，P均<0.01，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表2)。即Hp感染者體內(nèi)FFA表達(dá)水平顯著升高，氧化應(yīng)激反應(yīng)明顯增強(qiáng)。

表2 兩組患者血清FFA、MDA表達(dá)水平及SOD活性對(duì)比Table 2 Comparison of the expression levels of FFA and MAD, and SOD activity between Hp-infected T2DM patients and Hp-free T2DM

注：Hp感染者與非感染者血清FFA、MDA表達(dá)水平及SOD活性對(duì)比，P均<0.01，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

Note: The expression levels of serum FFA and MDA, and SOD activity were respectively compared between Hp-infected T2DM patients and Hp-free T2DM patients, which all showed statistically significant differences,P<0.01

3.3 T2DM合并Hp感染者血清FFA表達(dá)水平與其他各項(xiàng)指標(biāo)的相關(guān)性分析

Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，以血清MDA表達(dá)水平和SOD活性為自變量、FFA表達(dá)水平為應(yīng)變量，T2DM合并Hp感染者血清FFA表達(dá)水平與MDA表達(dá)水平呈顯著正相關(guān)(r=0.482，P<0.01)、與SOD活性呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.409，P<0.01)。即T2DM合并Hp感染者血清FFA表達(dá)水平與氧化應(yīng)激反應(yīng)密切相關(guān)。

4 討論

相關(guān)研究顯示，T2DM患者極易引發(fā)心、腦、腎等重要器官功能和結(jié)構(gòu)改變，且Hp感染可加劇此類患者病情的發(fā)生及發(fā)展，而目前我國(guó)人群Hp感染率已高達(dá)59%，由此導(dǎo)致的T2DM并發(fā)疾病增多的現(xiàn)實(shí)問(wèn)題不容樂(lè)觀[8-9]。本研究中，筆者觀察了T2DM合并Hp感染對(duì)血清FFA、MDA表達(dá)水平及SOD活性的影響，旨在探尋T2DM合并Hp感染者易患心、腦、腎等重要器官疾病的作用機(jī)制，為此類患者的進(jìn)一步臨床防治提供思路與幫助。

4.1 持續(xù)高血糖狀態(tài)可提高T2DM患者血清FFA的表達(dá)水平及氧化應(yīng)激反應(yīng)程度

本研究結(jié)果顯示，T2DM組研究對(duì)象血清FFA及MDA表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組、SOD活性明顯低于對(duì)照組，P均<0.01，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。即持續(xù)高血糖狀態(tài)可提高T2DM患者血清FFA的表達(dá)水平及氧化應(yīng)激反應(yīng)程度，其原因可能為：持續(xù)的高血糖狀態(tài)可導(dǎo)致胰島素抵抗加劇，致使脂肪降解速度增快，進(jìn)而引起血清FFA的表達(dá)水平升高，而高水平的FFA又可加劇胰島素抵抗，最終形成惡性循環(huán)[10-11]。持續(xù)高血糖狀態(tài)可誘發(fā)產(chǎn)生過(guò)量的活性氧簇，進(jìn)而損壞線粒體功能，降低機(jī)體的抗氧化能力，引發(fā)氧化應(yīng)激反應(yīng)[12-13]，最終表現(xiàn)為血清MDA表達(dá)水平升高及SOD活性降低。

4.2 Hp感染可提高T2DM患者血清FFA的表達(dá)水平

FFA是脂肪組織的降解產(chǎn)物，可反映血脂代謝狀態(tài)，適量的FFA是機(jī)體的供能物質(zhì)，而高濃度的FFA具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，可損傷細(xì)胞膜及線粒體、溶酶體等細(xì)胞器[14]。本研究結(jié)果顯示，T2DM合并Hp感染者血清FFA表達(dá)水平明顯高于非感染者，P<0.01，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。即Hp感染可提高T2DM患者血清FFA的表達(dá)水平[15]，其原因可能為：Hp持續(xù)感染可影響胃腸道激素的分泌及pH值而引發(fā)血脂代謝紊亂，從而導(dǎo)致FFA的表達(dá)水平升高[16-18]。

4.3 Hp感染可增強(qiáng)T2DM患者的氧化應(yīng)激反應(yīng)程度

血清MDA表達(dá)水平可反映機(jī)體的氧化應(yīng)激狀態(tài)，血清SOD活性可反映機(jī)體的抗氧化能力[19]。本研究結(jié)果顯示，T2DM合并Hp感染者血清MDA表達(dá)水平明顯高于非感染者、SOD活性明顯低于非感染者，P均<0.01，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。即Hp感染可降低T2DM患者的抗氧化能力，增強(qiáng)患者的氧化應(yīng)激反應(yīng)程度，其原因可能為：高濃度的FFA可損傷細(xì)胞膜及線粒體、溶酶體等細(xì)胞器，促使活性氧簇的生成增加，進(jìn)而導(dǎo)致患者的抗氧化能力降低，氧化應(yīng)激反應(yīng)增強(qiáng)。與本研究中T2DM合并Hp感染者血清FFA表達(dá)水平與MDA表達(dá)水平呈顯著正相關(guān)、與SOD活性呈顯著負(fù)相關(guān)的結(jié)果一致。

綜上所述，持續(xù)的高血糖狀態(tài)及Hp感染均可提高T2DM患者體內(nèi)FFA及MDA的表達(dá)水平，降低SOD的活性，增強(qiáng)患者體內(nèi)的氧化應(yīng)激反應(yīng)程度，且以T2DM合并Hp感染者最為顯著，而高濃度的FFA及高強(qiáng)度的氧化應(yīng)激反應(yīng)均可損傷胰島β細(xì)胞的功能，進(jìn)而引發(fā)胰島素抵抗，加劇T2DM患者心、腦、腎等重要器官疾病的發(fā)生發(fā)展[20]。糾正T2DM合并Hp感染者的血脂代謝紊亂及抗Hp感染治療可能是延緩T2DM患者心、腦、腎等重要器官疾病發(fā)生發(fā)展的策略之一。