章 波，伊貝拜汗·買(mǎi)賣提 綜述,張 新△ 審校

(1.新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)醫(yī)院/石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，新疆烏魯木齊830002；2.石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院，新疆石河子832000)

血流感染(BSI)是一種發(fā)病率及病死率高的病原微生物全身感染性疾病[1]。研究表明，延遲、不足或不適當(dāng)?shù)目垢腥局委熍cBSI患者病死率增加有關(guān)[2]。雖然在感染24 h內(nèi)經(jīng)驗(yàn)性治療能改善患者預(yù)后，但可導(dǎo)致耐藥菌的出現(xiàn)和傳播，并增加侵襲性真菌感染的機(jī)會(huì)[3]。因此，正確且及時(shí)的抗感染治療對(duì)患者的生存和抑制病原微生物的耐藥性至關(guān)重要。BSI病原微生物的快速鑒定和藥敏試驗(yàn)是臨床微生物實(shí)驗(yàn)室最重要的任務(wù)之一，對(duì)于BSI病原微生物快速鑒定、藥敏技術(shù)的研究及臨床應(yīng)用應(yīng)引起檢驗(yàn)人員的高度關(guān)注。本文討論了病原微生物診斷的最新技術(shù)研究，為促進(jìn)BSI的診斷和治療提供新的視角。

1 基于血培養(yǎng)的病原微生物檢測(cè)技術(shù)

血培養(yǎng)仍然是BSI病原微生物診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但血培養(yǎng)儀陽(yáng)性報(bào)警后，需分離純化病原微生物進(jìn)行鑒定和藥敏試驗(yàn)，因而導(dǎo)致報(bào)告結(jié)果周期長(zhǎng)。目前，已有較多方法可快速鑒定陽(yáng)性血培養(yǎng)中的病原菌，這些檢測(cè)方法簡(jiǎn)化了常規(guī)血培養(yǎng)的工作流程，縮短了結(jié)果報(bào)告時(shí)間。

1.1陽(yáng)性報(bào)警時(shí)間(TTP)的應(yīng)用 TTP是指從血培養(yǎng)瓶放入監(jiān)測(cè)系統(tǒng)到儀器報(bào)告陽(yáng)性的時(shí)間。根據(jù)不同微生物在血培養(yǎng)瓶中生長(zhǎng)速度的快慢，利用TTP可初步推斷微生物的類型。謝香梅等[4]統(tǒng)計(jì)大腸桿菌、葡萄球菌、肺炎克雷伯桿菌、腸球菌、鏈球菌及真菌等各有不同的TTP，結(jié)合革蘭染色可對(duì)BSI病原微生物類型進(jìn)行初步鑒定。同時(shí)TTP對(duì)于鑒別分離菌株是否為污染菌具有一定的參考價(jià)值，朱珠等[5]對(duì)1 300例BSI分離菌株的TTP、實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)及臨床資料進(jìn)行綜合分析，并將這些細(xì)菌分為感染菌組與污染菌組，兩組比較TTP差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。根據(jù)血培養(yǎng)瓶TTP的早晚可對(duì)病原微生物進(jìn)行初步鑒定或判斷是否存在污染菌的情況等受諸多因素的影響，如抗菌藥物的使用、標(biāo)本含菌量、取樣時(shí)間、取樣量等，因此其在臨床的應(yīng)用仍有待于不斷研究。

1.2顯色培養(yǎng)基 顯色培養(yǎng)基是根據(jù)微生物自身代謝產(chǎn)生酶的特征而設(shè)計(jì)的一種分離培養(yǎng)基，通過(guò)直接觀察菌落顏色即可對(duì)菌株做出鑒定。目前，除了針對(duì)沙門(mén)菌、念珠菌屬、銅綠假單胞菌、無(wú)乳鏈球菌、艱難梭菌、彎曲菌、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌等的特殊顯色培養(yǎng)基外，還有用于篩選耐藥性病原菌的顯色培養(yǎng)基，如耐萬(wàn)古霉素腸球菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)、耐超廣譜β-內(nèi)酰胺酶和碳青霉烯酶的腸桿菌等。將自動(dòng)血培養(yǎng)儀與涂片鏡檢、顯色培養(yǎng)基結(jié)合起來(lái)，可縮短對(duì)血培養(yǎng)中陽(yáng)性病原菌檢測(cè)時(shí)間。陳榮等[6]采用顯色培養(yǎng)基檢測(cè)血培養(yǎng)中MRSA，結(jié)果提示該方法與實(shí)驗(yàn)室常規(guī)鑒定方法及聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測(cè)結(jié)果的符合率高，特異度為98.8%，靈敏度為97.9%，同時(shí)該方法將實(shí)驗(yàn)室診斷MRSA BSI的平均報(bào)告時(shí)間提前1 d。

1.3基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF MS) MALDI-TOF MS是依據(jù)微生物生物標(biāo)志蛋白各自特異度肽質(zhì)量指紋圖譜的不同，通過(guò)與商業(yè)化的參考數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì)，進(jìn)而確定待測(cè)微生物的種屬。該技術(shù)對(duì)陽(yáng)性血培養(yǎng)中病原菌分離純化后進(jìn)行鑒定僅需幾分鐘，并且對(duì)臨床常見(jiàn)細(xì)菌鑒定準(zhǔn)確率達(dá)到90%～95%[7]。對(duì)從陽(yáng)性血培養(yǎng)中病原菌不分離純化直接鑒定而言，也僅需幾十分鐘，但該方法仍需探索以提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性。馬堅(jiān)等[8]采用MALDI-TOF MS直接檢測(cè)312份陽(yáng)性血培養(yǎng)中病原菌，與常規(guī)方法比較，屬水平鑒定符合率僅為84.0%，種水平符合率為64.7%，對(duì)革蘭陽(yáng)性菌鑒定準(zhǔn)確率不佳且低于革蘭陰性菌。MALDI-TOF MS對(duì)檢測(cè)病原菌耐藥性也有潛在的幫助，如檢測(cè)β-內(nèi)酰胺酶或碳青霉烯類耐藥菌、檢測(cè)金黃色葡萄球菌耐藥基因及毒力因子以及區(qū)分萬(wàn)古霉素敏感和萬(wàn)古霉素耐藥腸球菌等[3]。盡管MALDI-TOF MS現(xiàn)已成為臨床實(shí)驗(yàn)室鑒定微生物的有效工具，但依然存在諸多問(wèn)題，如病原菌肽質(zhì)量指紋圖譜重復(fù)性問(wèn)題、質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)亟待完善及細(xì)菌耐藥性研究應(yīng)用于臨床等均需要進(jìn)一步改進(jìn)和完善。

1.4熒光原位雜交(FISH)技術(shù) FISH是一種利用熒光標(biāo)記探針對(duì)不同病原微生物的rRNA分子進(jìn)行靶向雜交的技術(shù)。該技術(shù)可用于金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、腸球菌屬、鏈球菌屬、銅綠假單胞菌、大腸桿菌、布魯菌屬和真菌等微生物的檢測(cè)。目前已有較多商業(yè)性試劑盒可用于直接鑒定陽(yáng)性血培養(yǎng)中特定病原菌，如PNA-FISH?(AdvanDx)、Quick FISH?(AdvanDx)、The AccuProbe system?(Hologic)、Accelerate DiagnosticsTM(Arizona)等，這些均可在數(shù)小時(shí)內(nèi)完成陽(yáng)性血培養(yǎng)分離菌株的檢測(cè)，檢測(cè)的靈敏度和特異度可達(dá)到96%～100%[9]。一項(xiàng)多中心研究中，用肽核酸熒光原位雜交法(PNA-FISH)檢測(cè)陽(yáng)性血培養(yǎng)中分離的355株腸球菌，檢測(cè)特異度和靈敏度分別為100%和97%[10]。盡管該技術(shù)在陽(yáng)性血培養(yǎng)病原微生物檢測(cè)中表現(xiàn)出較好的應(yīng)用前景，但可用的特異度探針數(shù)量有限，一些微生物只能在屬的水平上鑒定，并且缺乏所鑒定微生物的抗菌藥物敏感信息。

1.5核酸擴(kuò)增技術(shù) 核酸擴(kuò)增技術(shù)是一種體外擴(kuò)增核酸片段的技術(shù)，以PCR技術(shù)最為常用，可從血液或陽(yáng)性血培養(yǎng)中直接進(jìn)行病原微生物鑒定及耐藥基因的檢測(cè)，具有較高的特異度和靈敏度[11]。該技術(shù)通常是使用特異引物擴(kuò)增病原微生物目標(biāo)基因或使用通用引物擴(kuò)增細(xì)菌(16S/23S)或真菌(18S)基因組的保守rRNA區(qū)域，隨后對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行凝膠電泳、高分辨率熔解曲線、微陣列雜交或基因測(cè)序等分析。MASEK等[12]使用PCR方法聯(lián)合高分辨率熔解曲線分析有效地檢出BSI中沙門(mén)菌。MOORE等[13]檢測(cè)1 130份疑似菌血癥患者血樣，采用PCR擴(kuò)增病原菌16S和/或23S rRNA，然后進(jìn)行焦磷酸測(cè)序，該方法與傳統(tǒng)培養(yǎng)法的一致性為96.9%，靈敏度為77.8%，特異度為99.3%。

由PCR衍變相關(guān)核酸擴(kuò)增技術(shù)也廣泛用于BSI病原微生物檢測(cè)，如實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)、多重PCR技術(shù)和環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(LAMP)等。這些方法提高了PCR的靈敏度、特異度和檢測(cè)速度，更有利于BSI中多重病原微生物的檢測(cè)，同時(shí)也可對(duì)常見(jiàn)耐藥基因檢測(cè)，如mecA、vanA/B、vanC1/C2/C3、blaKPC、blaNDM-1、blaVIM或blaIMP等。胡翀等[14]采用多重PCR法鑒定200份陽(yáng)性血培養(yǎng)標(biāo)本，約4 h可完成細(xì)菌鑒定，與傳統(tǒng)血培養(yǎng)法結(jié)果符合率為100.0%；任春陽(yáng)等[15]應(yīng)用環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)直接檢測(cè)300份陽(yáng)性血培養(yǎng)瓶中大腸埃希菌，檢出時(shí)間約1 h，與傳統(tǒng)培養(yǎng)法比較，靈敏度和特異度均達(dá)100.0%。

目前，已有較多基于PCR技術(shù)的商業(yè)性平臺(tái)應(yīng)用于陽(yáng)性血培養(yǎng)中病原微生物鑒定及耐藥基因的直接檢測(cè)，如FilmArray?(bioMérieux，F(xiàn)rance)、The GeneXpert?MRSA/SA BC assay(Cepheid，USA)、BD MaxTM StaphSR Assay(BD，Canada)、Cognitor?Minus(Momentum Bioscience，UK)和Eazyplex?(Amplex ByoSistems GmbH，Germany)等。雖然這些商業(yè)性平臺(tái)提高了檢測(cè)速度，但仍然無(wú)法擺脫P(yáng)CR方法的局限性，如血液中PCR抑制劑及污染物DNA或死亡微生物的DNA的存在等影響檢測(cè)結(jié)果；在病原菌未明的情況下，難以做到逐一檢測(cè)用于BSI多重病原菌感染的診斷。其次，在國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室推廣應(yīng)用上也受多種因素限制，如基層實(shí)驗(yàn)室條件限制、PCR試劑盒診斷價(jià)格和某些技術(shù)平臺(tái)國(guó)內(nèi)批準(zhǔn)文號(hào)等。

1.6基因芯片(DNA微陣列) DNA微陣列由固定在固體表面特異度DNA探針組成，通過(guò)識(shí)別待分析靶DNA與陣列雜交的熒光信號(hào)從而對(duì)多種病原微生物進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)該技術(shù)也用于檢測(cè)耐藥基因和基因分型。目前，DNA微陣列可檢測(cè)90%～95%已知導(dǎo)致BSI的病原菌，靈敏度范圍為101～105個(gè)細(xì)胞/mL，適用于陽(yáng)性血培養(yǎng)中病原微生物檢測(cè)[16]。

已有用于臨床陽(yáng)性血培養(yǎng)中病原微生物檢測(cè)的商品化基因芯片，如Prove-itTMSepsis (Mobidiag，F(xiàn)inland)可在3.5 h內(nèi)檢測(cè)60種細(xì)菌和30種真菌，并且可檢測(cè)mecA、vanA、vanB耐藥基因，靈敏度和特異度分別達(dá)到95.0%和99.0%[17]，但該商品盒目前已停產(chǎn)。另一種是美國(guó)食品和藥物管理局(FDA)批準(zhǔn)基于DNA微陣列的Verigene?系統(tǒng)(Nanosphere，USA)，該系統(tǒng)用于檢測(cè)12種革蘭陽(yáng)性菌以及相關(guān)耐藥基因(mecA、vanA和vanB)和另外9種革蘭陰性細(xì)菌(1種未經(jīng)FDA批準(zhǔn))及其耐藥基因(blaNDM、blaVIM、blaKPC、blaOXA和blaCTX-M)，可在2.5 h內(nèi)直接從陽(yáng)性血培養(yǎng)中識(shí)別細(xì)菌及其相關(guān)耐藥基因，靈敏度為92.6%～100.0%，特異度94.3%～100.0%[18]。然而，昂貴的基因芯片及檢測(cè)儀器嚴(yán)重限制了這種技術(shù)的臨床普及與應(yīng)用。

1.7綜合檢測(cè)平臺(tái) 近年來(lái)，結(jié)合不同的分子生物學(xué)技術(shù)而開(kāi)發(fā)的綜合檢測(cè)平臺(tái)已用于臨床陽(yáng)性血培養(yǎng)中病原微生物直接檢測(cè)。如Sepsis Flow Chip (Master Diagnostica，Spain)利用多重PCR和低密度DNA微陣列技術(shù)，可在3 h內(nèi)同時(shí)檢測(cè)36種細(xì)菌、念珠菌屬(白色念珠菌和其他念珠菌屬)和20種耐藥基因。GALIANA等[19]對(duì)該檢測(cè)方法進(jìn)行性能評(píng)價(jià)，細(xì)菌鑒定的靈敏度和特異度分別為93.3%和100.0%，檢測(cè)耐藥基因的靈敏度和特異度分別為93.6%和100.0%；The ePlex?system(Carlsbad，USA)全自動(dòng)多重分子診斷系統(tǒng)，結(jié)合多重PCR擴(kuò)增和數(shù)字微流控技術(shù)，可在1.5 h內(nèi)檢測(cè)41種細(xì)菌、16種真菌和10種耐藥基因(blaNDM、blaVIM、blaKPC、blaOXA、blaCTX-M、blaIMP、mecA/C和vanA/B等)，與實(shí)驗(yàn)室常規(guī)方法比較，該檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)真菌、革蘭陰性菌和革蘭陽(yáng)性菌的一致性分別為100.0%、97.8%和97.8%[9,20]。綜合性檢測(cè)平臺(tái)診斷性能上具有較好的優(yōu)勢(shì)，但仍需進(jìn)一步研究以獲取可靠數(shù)據(jù)，同時(shí)也需綜合考慮其臨床效益。

2 基于全血標(biāo)本的病原微生物檢測(cè)技術(shù)

從疑似BSI患者血液樣本中直接檢測(cè)病原微生物的技術(shù)，因無(wú)需進(jìn)行血培養(yǎng)而有可能顯著縮短檢測(cè)時(shí)間。已有較多基于全血標(biāo)本的快速病原微生物檢測(cè)技術(shù)，如基于PCR技術(shù)、MALDI-TOF法、宏基因組學(xué)、基于聲學(xué)分離的集成微系統(tǒng)和微芯片法、基于表面等離子體共振成像儀與抗體微陣列耦合的無(wú)標(biāo)記方法、基于微流控分離細(xì)菌方法、基于T2磁共振(T2MR)法等[3]。在這里，筆者討論最近可應(yīng)用于臨床的商業(yè)性平臺(tái)和直接從全血診斷BSI的方法。

2.1PCR技術(shù) 目前，傳統(tǒng)PCR方法以及PCR衍變的相關(guān)核酸擴(kuò)增技術(shù)在直接檢測(cè)血液中病原菌及其耐藥基因中均有報(bào)道。同時(shí)也出現(xiàn)了較多商業(yè)性平臺(tái)或試劑盒，如LightCycler?SeptiFast Test (Roche，Germany)、SepsiTest(Molzym，Germany)、Magicplex?Sepsis Real-time Test(Seegene，Korea)和Vyoo?(Analytik Jena，Germany)等，這些均可顯著縮短檢測(cè)時(shí)間，并逐步應(yīng)用于臨床BSI診斷之中。如應(yīng)用廣泛的LightCycler?SeptiFast Test平臺(tái)，該系統(tǒng)可直接檢測(cè)全血標(biāo)本中25種病原體(10種革蘭陰性菌、9種革蘭陽(yáng)性菌、6種真菌)，整個(gè)過(guò)程需4～6 h[21]。然而這些商業(yè)性平臺(tái)或試劑盒仍需經(jīng)過(guò)臨床驗(yàn)證才能進(jìn)行推廣，一項(xiàng)薈萃分析顯示，SeptiFast法與培養(yǎng)法比較，靈敏度和特異度分別為68%和86%，因此其特異度和靈敏度仍有待提高[22]。

與直接從陽(yáng)性血培養(yǎng)中檢測(cè)病原微生物相比，采用PCR技術(shù)直接檢測(cè)全血標(biāo)本具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，如檢測(cè)生長(zhǎng)緩慢及無(wú)法培養(yǎng)的微生物、處理接受過(guò)抗菌藥物治療的血樣或抽血量較少的血液樣本等。但是該方法更易造成假陽(yáng)性結(jié)果，未感染時(shí)血液中存在的死細(xì)菌/真菌DNA或者有效抗感染治療后血液殘存的致病DNA等均可影響檢測(cè)。總的來(lái)說(shuō)，由于檢測(cè)成本高、檢測(cè)過(guò)程標(biāo)準(zhǔn)化和結(jié)果解釋困難、靈敏度和/或特異度有限等嚴(yán)重影響了PCR方法直接檢測(cè)BSI全血標(biāo)本的臨床應(yīng)用。

2.2PCR-電噴霧離子質(zhì)譜法(PCR ESI-MS) PCR ESI-MS通過(guò)PCR擴(kuò)增及電噴霧離子質(zhì)譜(ESI-MS)檢測(cè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，然后將其與數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比較以確定檢測(cè)的微生物。研究表明，該方法可直接用于全血標(biāo)本中病原微生物檢測(cè)，與傳統(tǒng)培養(yǎng)法的總體一致性為77.1%，靈敏度為50.0%，特異度為93.8%；而采用該方法直接檢測(cè)陽(yáng)性血培養(yǎng)中病原微生物時(shí)，與傳統(tǒng)培養(yǎng)法總體一致性為94.2%，靈敏度為96.8%，特異度為98.5%，因此優(yōu)選用于陽(yáng)性血培養(yǎng)檢測(cè)[23]。

最近，已經(jīng)開(kāi)發(fā)了用于全血標(biāo)本中病原菌及耐藥基因的PCR ESI-MS檢測(cè)平臺(tái)。如雅培公司的IRIDICA系統(tǒng)允許6 h內(nèi)鑒定約800種微生物及4種耐藥基因(mecA、vanA、vanB、blaKPC)[24]。對(duì)疑似BSI患者中300份全血標(biāo)本進(jìn)行的前瞻性研究發(fā)現(xiàn)，采用該系統(tǒng)與常規(guī)血培養(yǎng)法總體一致性為86%，靈敏度為76%，特異度為90%[25]。由于該方法檢測(cè)結(jié)果需根據(jù)醫(yī)學(xué)圖表進(jìn)行解釋，并且無(wú)法確定抗菌藥物耐藥表型。因此，PCR ESI-MS測(cè)定應(yīng)被視為輔助而不是取代常規(guī)培養(yǎng)的方法。

2.3宏基因組學(xué) 宏基因組學(xué)是對(duì)樣本中特定或所有遺傳物質(zhì)的基因組分析。目前，對(duì)宏基因組測(cè)序主要有傳統(tǒng)的Sanger/鳥(niǎo)槍法和高通量測(cè)序技術(shù)(又稱二代測(cè)序技術(shù))。這些方法已成功應(yīng)用于陽(yáng)性血培養(yǎng)或全血標(biāo)本中細(xì)菌鑒定，與傳統(tǒng)培養(yǎng)法相比具有相同或更高的靈敏度[26]。一項(xiàng)多中心研究顯示，比較二代測(cè)序與常規(guī)微生物方法對(duì)101例免疫功能低下患者感染診斷價(jià)值，該方法具有更高的陰性預(yù)測(cè)值，并且可檢測(cè)到更多的臨床相關(guān)病毒和細(xì)菌[27]。此外，宏基因組學(xué)可以檢測(cè)耐藥基因和毒力基因，并提供有關(guān)分子流行病學(xué)的重要信息。

目前，基于宏基因組學(xué)方法僅開(kāi)發(fā)了一種可用于血液或血液制品的商業(yè)性系統(tǒng)：The iDTECTTMDx Blood test (PathoQuest SAS，F(xiàn)rance)，該系統(tǒng)利用二代測(cè)序技術(shù)，從單個(gè)血液樣本中可識(shí)別超過(guò)1 200種臨床相關(guān)的細(xì)菌和病毒[9]。目前，由于數(shù)據(jù)庫(kù)限制、檢測(cè)樣本的高成本以及質(zhì)量控制復(fù)雜等問(wèn)題阻礙了該技術(shù)在臨床微生物實(shí)驗(yàn)室的引入。

2.4基于T2磁共振(T2MR)方法 T2MR是一種微型的、基于磁共振的診斷技術(shù)。該方法主要過(guò)程包括PCR擴(kuò)增病原微生物特異度DNA，然后將擴(kuò)增產(chǎn)物雜交到探針修飾的超順磁性納米顆粒上，最后用磁共振技術(shù)檢測(cè)。T2Candida?Panel(T2Biosystems，USA)是FDA批準(zhǔn)的基于T2磁共振檢測(cè)真菌試劑盒。該試劑盒能夠在3～5 h直接從全血中鑒定出5種念珠菌(白色念珠菌、熱帶念珠菌、近平滑念珠菌、光滑念珠菌和克柔念珠菌)，無(wú)需提取DNA，最低檢測(cè)限為1 CFU/mL[28]。一項(xiàng)多中心研究顯示，采用該方法直接檢測(cè)全血標(biāo)本中病原菌的靈敏度和特異度分別為99.4%和91.1%[29]。最近，T2 Biosystems推出了T2Bacteria?Panel，能在3～5 h內(nèi)檢測(cè)引起B(yǎng)SI的6種常見(jiàn)細(xì)菌(大腸桿菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、金黃色葡萄球菌和屎腸球菌)，但尚未公布任何性能數(shù)據(jù)。

3 小 結(jié)

BSI的快速病原菌鑒定和藥敏試驗(yàn)可以減少治療時(shí)間和改善患者預(yù)后。面對(duì)日益嚴(yán)峻的抗菌藥物耐藥性威脅，能夠在幾小時(shí)內(nèi)確定BSI病原菌的快速診斷方法，有望成為BSI治療及抗菌藥物管理最有效的方法。目前，大多數(shù)方法依賴于陽(yáng)性血培養(yǎng)后進(jìn)行細(xì)菌鑒定，但仍為一些不可培養(yǎng)的病原菌留下檢測(cè)缺口。而直接從患者血液進(jìn)行檢測(cè)病原菌的方法可能對(duì)顯著縮短BSI診斷周轉(zhuǎn)時(shí)間更有潛力，但其檢測(cè)的靈敏度和特異度仍然是一個(gè)挑戰(zhàn)。隨著對(duì)各種新技術(shù)研究的深入，一些技術(shù)逐漸從研究階段應(yīng)用于臨床，但理想的BSI病原微生物檢測(cè)技術(shù)不僅應(yīng)該能快速確定病原菌，更重要的是確定其抗菌藥物靈敏度信息。迄今為止對(duì)抗菌藥物靈敏度的測(cè)定仍然取決于對(duì)分離菌株的藥敏分析，因此能夠快速、準(zhǔn)確地鑒定BSI病原菌及同步獲得藥敏信息的新方法仍需不斷探索。