李金莉 吳曉怡

隨著中國人均經(jīng)濟收入大幅提高，人們對吃、穿、住、行有更高要求，飲食上對魚、夏、蟹、貝殼等水產(chǎn)品需求與日俱增。特別對養(yǎng)殖需求量大大刺激了中國水產(chǎn)業(yè)的迅猛發(fā)展，但也浮現(xiàn)出了水產(chǎn)品病害嚴重的問題，導(dǎo)致抗生素等藥物大量使用，其中的水產(chǎn)品藥物殘留威脅著人類身體健康，引起人們對水產(chǎn)品中的獸藥殘留等健康安全問題更加關(guān)注。而廣譜抗菌抗生素藥物里屬于人工合成的硝基呋喃類藥物，其分子結(jié)構(gòu)中具有5-硝基呋喃及對應(yīng)代謝物分別為：AOZ、AMOZ、AHD、SEM，該藥在動物體內(nèi)迅速代謝穩(wěn)定數(shù)小時后，其代謝物與蛋白質(zhì)結(jié)合成蛋白結(jié)合代謝產(chǎn)物，殘留時間很長。

研究表明， 該類藥物具有遺傳毒性、潛在致畸、致癌和誘導(dǎo)機體產(chǎn)生突變的作用， 出于安全性考慮， 歐盟、美國等發(fā)達國家先后頒布了禁止使用該類獸藥的禁令。但仍然有養(yǎng)殖戶使用該類藥物，因此第三方食品檢測公司對水產(chǎn)品進行嚴格監(jiān)控。

1污染源排查過程

1.1樣品液上液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜

由于硝基呋喃類液相條件是梯度洗脫，改變梯度延長洗脫時間，排查是否存在基質(zhì)干擾;目標(biāo)峰出完后提高有機相比例至甲醇95%沖洗，排查是否上一針殘留;在進樣前、后增加洗針時間6S，排查是否是針污染;裝流動相的容器用水沖洗干凈再裝一級純水、甲醇，排查流動相或器皿帶入;用異丙醇、70℃熱水沖洗管路，排查管路污染及材料析出污染;調(diào)整質(zhì)譜條件、重新優(yōu)化定量離子對、定性離子對， 排查干擾離子的影響;進樣小瓶選用新開封的玻璃瓶不加襯管，排查多次使用的污染帶入。

儀器：Waters Xevo TQD液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀，色譜柱（Waters T3 150mm×2.1mm×1.8μm）;柱溫（45℃），進樣量（10μL）;流動相A為0.05%甲酸水+5mmol乙酸銨溶液;流動相B為HPLC級甲醇。采用電噴霧離子源，毛細管電壓0.5kV，去溶劑化600℃、1000L/Hr，高壓50L/hr。定型離子對和定量離子對等見參數(shù)表2。

最后分析結(jié)果，儀器條件優(yōu)化后，污染源依然存在，所以流動相、玻璃容器、液相條件、質(zhì)譜條件都不是帶入污染源的主要因素。

1.2實驗污染源排查衍生后階段

磷酸氫二鉀溶液、氫氧化鈉溶液用一級水現(xiàn)配現(xiàn)用，排除新污染物帶入;樣品離心、過濾紙后再過HLB小柱對比離心完直接過HLB小柱，排查濾紙是否帶入污染物;其它步驟一致，樣品手動過HLB小柱比對儀器設(shè)備自動過HLB小柱，排查設(shè)備帶入污染物。氮吹時氮吹儀的管頭都嚴用乙酸乙酯超聲、沖洗2遍。

最后結(jié)果污染源依然存在，說明以上試劑、濾紙、設(shè)備不是帶入污染源的主要因素。

1.3實驗污染源排查衍生前階段

采用最新的50ml塑料離心管，稱取陰性樣品與直接空白實驗比較，排查陰性樣品稱量前已被污染;甲醇-水溶液、鹽酸溶液、2-硝基苯甲醛衍生試劑均現(xiàn)配現(xiàn)用減少污染帶入;內(nèi)標(biāo)儲備液、標(biāo)準(zhǔn)儲備液從固標(biāo)開始重新配置排除標(biāo)液在源頭污染問題、用最新的塑料移液槍頭移取試劑;最后衍生、避光、上搖床反應(yīng)16h。

最后排查結(jié)果，污染源依然存在，說明以上試劑、衍生試劑、內(nèi)標(biāo)儲備液、標(biāo)準(zhǔn)溶液不是帶入污染源的主要因素。

2結(jié)論

水產(chǎn)品中硝基呋喃類獸殘檢測污染源有兩處，一來自于聚丙烯材質(zhì)的耗材帶入污染，包括：50ml塑料離心管（聚丙烯材質(zhì)）、10ml塑料移液槍頭（聚丙烯材質(zhì)）、塑料小襯管;二來自于耗材清洗中采用的洗衣粉洗滌劑帶入;而濾紙因與樣品液接觸時間在衍生后且時間短，實驗證明不影響可以放心使用。而在實驗改進中50ml玻璃離心管在離心時易碎，為實驗過程更順利建議采用50ml聚四氟乙烯塑料離心管、10ml單向管（玻璃材質(zhì)）、玻璃襯管。

（作者單位：510000 ?廣東省廣州市精益和泰質(zhì)量檢測股份有限公司）