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        兒童社區(qū)獲得性肺炎病原體分析及對患兒T細胞水平的影響

        2019-03-13 05:06:34田慶玲陳冬梅
        中國免疫學雜志 2019年3期
        關鍵詞:原體性肺炎病原菌

        馮 雪 田慶玲 張 雙 陳冬梅 宋 鵬

        (唐山市婦幼保健院,唐山063000)

        社區(qū)獲得性肺炎是在院外由細菌、病毒、衣原體、支原體等多種微生物引起。臨床表現(xiàn)為咳嗽、伴或不伴咳痰和胸疼,前驅癥狀呈伴有鼻炎樣癥狀、上呼吸道感染癥狀,包括:鼻塞、噴嚏、聲音嘶啞等,但是并非每一個社區(qū)獲得性肺炎患者均有前驅癥狀,并且臨床發(fā)病率根據(jù)病原體不同通常在30.0%~65.0%之間,近年來該病發(fā)生率呈上升趨勢,成為研究熱點[1]。兒童社區(qū)獲得性肺炎疾病誘因較多,發(fā)病過程中常伴有炎癥因子增加及T細胞水平的改變,IL-17、IL-10及轉化生長因子β1(TGF-β1)均為常見的炎癥因子[2]。IL-17則反映炎癥嚴重程度,多與炎癥反應呈正相關;IL-10與TGF-β1均能激活Th17細胞信號通路增加IL-17細胞因子水平;IL-10是臨床上相對重要的抗炎因子,在抗炎中發(fā)揮了重要的作用[3]。國內學者研究表明:兒童免疫功能發(fā)育欠完善,感染后免疫失調,導致炎癥反應加劇,從而加劇疾病的發(fā)生、發(fā)展[4,5]。因此,加強不同病原菌感染兒童社區(qū)獲得性感染肺炎患者炎癥因子、T細胞水平測定對改善患者預后具有重要的意義。本課題以2015年5月~2017年10月入院治療的兒童社區(qū)獲得性肺炎患者248例作為對象,探討探討兒童社區(qū)獲得性肺炎病原體分析及對患兒T細胞水平的影響,報道如下。

        1 資料與方法

        1.1一般資料 將2015年5月~2017年10月入院治療的兒童社區(qū)獲得性肺炎患者248例作為研究對象,男134例,女114例,年齡1~12歲,平均(6.74±1.31)歲,病程1~7 d,平均(3.56±1.04)d。納入標準:①符合《兒童社區(qū)獲得性肺炎管理指南(2013修訂)》[6,7]中兒童社區(qū)獲得性肺炎臨床診斷標準;②均經過胸片、體征及實驗室、痰培養(yǎng)、咽拭子、影像學檢查最終得到確診;③均能遵循醫(yī)囑完成相關檢查、治療者。排除標準:①合并嚴重心、肝、腎功能異常及伴有明顯精神異常者;②合并支氣管炎、支氣管哮喘、支氣管異物及肺結核等肺部疾病者;③合并營養(yǎng)不良、肺寄生蟲病、免疫異常性肺疾病者;④難以遵循醫(yī)囑完成相關檢查或檢查過程中伴有嚴重并發(fā)癥者。本課題均得到醫(yī)院倫理委員會同意,患者及家屬對檢查方案知情同意。

        1.2方法

        1.2.1病原菌鑒定 (1)標本采集。①痰液標本。所有患兒入院后第1天由檢驗科專業(yè)醫(yī)生利用無菌吸痰器完成痰液的采集,將其放置在消毒試管中,標本采集后立即送檢完成細菌的培養(yǎng)[8]。②咽拭子。利用壓舌板輕壓患者舌部,迅速擦拭咽及兩側腭弓部位的分泌物,將拭子放入試管中,及時送檢。③肺泡灌洗液。對于支氣管肺泡灌洗患者取5~6 ml,灌洗液,4 500 r/min,離心5 min,取獲得的沉淀,采用革蘭染色、抗酸染色、細菌培養(yǎng)等方法進行測定[9]。④尿液標本的采集。遵循醫(yī)囑取所有患者10~20 ml中段尿,放置在無菌杯中完成SP尿抗原測定[10]。⑤血液標本采集?;純喝朐汉蟠稳赵绯靠崭谷‰p份靜脈血3 ml,4 500 r/min 離心15 min,完成血清分離后放置在-20℃冰箱中,備用[11]。

        (2)檢測方法。①呼吸道病毒檢測。酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA,歐盟醫(yī)學實驗診斷股份公司)法測定采集的血清標本檢測腺病毒(ADV)、合胞病毒(RSV)、流感病毒A型(INFA)、流感病毒B型(INFB)及副流感病毒型(PIVS),對于上述檢測方法結果1項顯示陽性則判斷該疾病[12]。②細菌培養(yǎng)及檢測。取上述采集標本,將其接種在血瓊脂平板、巧克力平板中進行培養(yǎng),37℃下進行72 h~7 d培養(yǎng);采用間接免疫熒光法(IFA)、被動凝集法、膠體金法完成尿液、肺泡灌洗液中細菌測定,測定細菌包括:肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、肺炎克雷伯菌、金黃色葡萄球菌、人葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大腸埃希菌等,有關操作嚴格遵循儀器操作說明完成[13]。③肺炎支原體(MP)、肺炎衣原體(CP)檢測。采用IFA、被動凝集法測定兒童MP及CP,對于測定為陽性者表明MP或CP感染[14]。

        1.2.2炎癥因子及T細胞水平測定 根據(jù)不同病原菌將患者分為肺炎支(衣)原體肺炎、病毒性肺炎、細菌性肺炎、混合感染性肺炎及不明原因肺炎。取一份靜脈血3 ml,4 500 r/min,離心15 min,完成血清分離后放置在-20℃冰箱中,采用ELISA測定IL-17、IL-10及TGF-β1水平;采用流式細胞儀測定入組患者CD3+、CD4+、CD8+及CD19+水平,有關操作嚴格遵循儀器操作說明完成[15,16]。

        2 結果

        2.1病原學檢測陽性例數(shù)及構成比 見表1。病原學檢測結果表明:248例患者病原學檢測排在前三位的分別為:MP、細菌、RSV,分別占:43.55%、13.71%和10.89%。

        2.2不同病原菌感染類型CAP炎癥因子水平比較 見表2。248例患者中肺炎支(衣)原體肺炎149例,病毒性肺炎23例,細菌性肺炎31例,混合感染性肺炎15例,不明原因肺炎30例。不同病原菌感染類型CAP性別比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);不同病原菌感染類型CAP IL-10水平比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);肺炎支(衣)原體肺炎、混合感染性肺炎IL-17、TGF-β1水平比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);病毒性肺炎、細菌性肺炎IL-17、TGF-β1水平比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);肺炎支(衣)原體肺炎、混合感染性肺炎IL-17、TGF-β1,均高于病毒性肺炎、細菌性肺炎、不明原因肺炎(P<0.05)。

        表1病原學檢測陽性例數(shù)及構成比

        Tab.1Etiologicaldetectionofpositivecasesandconstitu-entratio

        Pathogen typePositive casesPositive rateMP10843.55Bacterial3413.71RSV2710.89CP249.68PIVs208.06INFB114.44ADV83.23INFA83.23Total248100.00

        2.3不同病原菌感染類型CAPT細胞水平比較 見表3。不同病原菌感染類型CAP CD3+、CD4+及CD19+水平比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);肺炎支(衣)原體肺炎、混合感染性肺炎 CD8+水平比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);病毒性肺炎、細菌性肺炎 CD8+水平比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);肺炎支(衣)原體肺炎、混合感染性肺炎CD8+水平均高于病毒性肺炎、細菌性肺炎及不明原因肺炎(P<0.05)。肺炎支(衣)原體肺炎、混合感染性肺炎CD4+/CD8+比值,均低于病毒性肺炎、細菌性肺炎及不明原因肺炎(P<0.05),見表3和圖1。

        CAP typenCD3+CD4+CD8+CD19+CD4+/CD8+Pneumonia branch(clothes)pneumonia14960.35±5.3735.91±4.8629.19±5.6827.38±7.811.23±0.43Viral pneumonia2360.88±5.4135.92±4.8721.95±3.5127.41±7.831.64±0.47Bacterial pneumonia3159.96±5.3335.64±4.6121.55±3.5027.31±7.801.65±0.47Mixed with infectious pneumonia1560.34±5.3535.09±4.7329.18±5.6427.40±7.811.20±0.38Unexplained pneumonia3061.09±5.4636.11±4.9115.77±2.9327.12±7.092.29±0.53F-1.0950.8938.5810.2955.923P-0.0520.0630.0380.1310.039

        圖1 不同類型病原菌感染T淋巴細胞流式細胞圖

        3 討論

        兒童社區(qū)獲得性肺炎病原菌主要包括:肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、衣原體及支原體。由于兒童社區(qū)獲得性肺炎病原體類型不同,導致臨床發(fā)病機制不同,導致病史特點、臨床表現(xiàn)上均存在明顯的差異[17,18]。本研究中,病原學檢測結果表明:248例患者病原學檢測排在前三位的分別為:MP、細菌、RSV,分別占:43.55%、13.71%和10.89%。由此看出:兒童社區(qū)獲得性肺炎致病菌類型較多,且多以肺炎支(衣)原體感染為主,能參與疾病的發(fā)生、發(fā)展。國內學者研究表明:肺炎支原體與衣原體屬于兒童社區(qū)獲得性肺炎中常見的致病菌,且感染率呈上升趨勢[19,20]。同時,肺炎支原體肺炎患兒常伴有其他病原菌感染,形成混合型感染[21,22]。

        國內學者研究表明:肺炎的發(fā)生、發(fā)展與肺部炎癥反應、細胞炎癥因子水平有關,抗炎因子與促炎因子的失衡能造成機體產生炎癥聯(lián)級反應,進一步加劇疾病的發(fā)生、發(fā)展[23,24]。本研究中,肺炎支(衣)原體肺炎、混合感染性肺炎IL-17、TGF-β1,均高于病毒性肺炎、細菌性肺炎、不明原因肺炎(P<0.05)。出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因是多方面的,可能與肺炎鏈球菌及流感嗜血桿菌作用于中性粒細胞、激活中性粒細胞,從而釋放大量的細胞因子,能直接參與炎癥的發(fā)生、發(fā)展,與中性粒細胞激活、IL-17水平呈正相關[25,26]。TGF-β1也是兒童社區(qū)獲得性肺炎中常見的炎癥因子,能直接參與疾病的發(fā)生、發(fā)展。T細胞亞群具有相對重要的調節(jié)機體細胞免疫功能作用,常見的包括:CD3+、CD4+、CD8+及CD19+。CD3+能反映外周血成熟T細胞功能;而CD4+是輔助誘導性T細胞,能刺激B細胞產生Th1、Th2、Th17及Treg等,能分泌多種淋巴細胞因子,直接參與免疫炎癥反應[27,28];CD4+的減少則能讓機體逐漸喪失對于抗原的免疫反應;在感染肺組織中CD4+水平有助于提高吞噬細胞活性,有助于提高B細胞反應,促進CD8+細胞的進一步擴增,能保持CD8+細胞的監(jiān)控、殺傷能力。CD8+屬于細胞毒性T細胞、抑制性T細胞亞群,有助于抑制B細胞產生相應的抗體;而CD19+在兒童社區(qū)獲得性肺炎中能調節(jié)B淋巴細胞水平,增加炎癥反應[29]。本研究中,肺炎支(衣)原體肺炎、混合感染性肺炎CD8+,均高于病毒性肺炎、細菌性肺炎及不明原因肺炎(P<0.05)。因此,不同病原菌感染兒童T細胞水平存在明顯的差異,臨床治療時應加強病原菌鑒定,根據(jù)鑒定結果選擇合適的方法治療,治療過程中重視對機體T細胞水平的調節(jié),促進患者早期恢復[30]。

        綜上所述,兒童社區(qū)獲得性肺炎中肺炎支(衣)原體肺炎占據(jù)比重較大,能引起機體炎癥水平聯(lián)級反應,降低患兒T細胞水平,應及時采取有效措施進行干預,促進患者恢復。

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