余 歡,管敬喜,楊 瑩*,黃曉云,成 果,謝太理,謝林君
(廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院葡萄與葡萄酒研究所,廣西 南寧 530007)
‘桂葡3號(hào)’是歐美雜交種葡萄“金香(Vitis vinifera×Vitis labrusca)”中選育出的芽變新品種。成熟時(shí)果皮金黃,可溶性固形物含量高,果香濃郁,適合釀造南方特色優(yōu)質(zhì)干白葡萄酒[1]。其平均單果粒質(zhì)量5.5 g,且果實(shí)肉囊較多[2],出汁率較低(50%~55%)[3]。
葡萄酒的芳香物質(zhì)在葡萄酒風(fēng)格與質(zhì)量評(píng)價(jià)中起著重要作用,其中葡萄果實(shí)、釀造前處理、釀酒酵母及陳釀過程[3-9]的相關(guān)香氣物質(zhì)起決定作用。研究發(fā)現(xiàn)葡萄酒中的揮發(fā)性物質(zhì)主要包括酯類、醇類、醛酮類、萜烯類、硫醇類等,而關(guān)鍵呈香物質(zhì)只是其中的小部分[10-11]。在葡萄酒風(fēng)味物質(zhì)形成過程中,酵母起主要作用,而不同酵母代謝途徑不同,從而使葡萄酒具有不同的風(fēng)味特征[12-14]。
由于葡萄原料、釀造工藝等相同或相似,使國(guó)內(nèi)葡萄酒產(chǎn)品有嚴(yán)重的同質(zhì)化現(xiàn)象,而程序化使用商業(yè)活性干酵母讓葡萄酒沒有地方特色。研究人員發(fā)現(xiàn)解決葡萄酒同質(zhì)化問題,關(guān)鍵在于采用不同酵母釀造葡萄酒[15],通過選擇適應(yīng)當(dāng)?shù)刈匀画h(huán)境和葡萄品種的野生酵母釀造葡萄酒,使葡萄酒具有獨(dú)一無(wú)二的地方特色[16]。
前期實(shí)驗(yàn)從廣西毛葡萄產(chǎn)區(qū)分離篩選得到7 株野生葡萄酒酵母,經(jīng)鑒定為漢遜酵母屬的Hanseniaspora thailandica MSF1-4、伊薩酵母屬的Issatchenkia terricola MG3-1、釀酒酵母屬的Saccharomyas cerevisiae MSF8-1、漢遜酵母屬Hanseniaspora thailandica MG4、漢遜酵母屬的Hanseniaspora opuntiae MG6、漢遜酵母屬的Hanseniaspora ocdidentalis MSF6-2、畢赤酵母屬的Pichia pastoris MG1[17]。為探究該7 株野生葡萄酒酵母是否對(duì)本地葡萄品種有良好的釀造特性,本實(shí)驗(yàn)以7 株酵母菌發(fā)酵的‘桂葡3號(hào)’干白葡萄酒為材料,通過氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用對(duì)酒樣的揮發(fā)性成分檢測(cè),采用主成分分析法對(duì)7 個(gè)酒樣的特征香氣成分進(jìn)行分析比較,以期獲得有地方特色的葡萄酒酵母,為釀造有南方特色的葡萄酒提供酵母資源。
‘桂葡3號(hào)’葡萄:2016年12月15日采摘自廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院葡萄與葡萄酒研究所明陽(yáng)雙季葡萄示范基地園(東經(jīng)108°14’31.76’’、北緯22°51’34.86’’),2014年3月種植,樹勢(shì)健壯,無(wú)病蟲害發(fā)生。株行距為3.3 m×4.0 m,水平棚架栽培,采用“一字”型修剪方式,常規(guī)的水肥、噴藥等田間管理[18]。果實(shí)可溶性固形物質(zhì)量分?jǐn)?shù)為18.1%,總糖質(zhì)量濃度為212.9 g/L,可滴定酸質(zhì)量濃度為9.23 g/L。
從廣西河池市都安瑤族自治縣青盛鄉(xiāng)樹齡50 a以上的野生毛葡萄植株的漿果篩選得到的7 株野生葡萄酒酵母:MSF1-4、MG3-1、MSF8-1、MG4、MG6、MSF6-2、MG1[17],純化后的單菌株在YPD液體培養(yǎng)基中活化1 d,將活化的菌液與30%無(wú)菌甘油以1∶1混合于1.5 mL離心管中,-80 ℃保藏。
商業(yè)葡萄酒釀酒酵母K1(Lalvin) 丹麥Lallemand公司。
YPD液體培養(yǎng)基:1 L培養(yǎng)基中含有10 g酵母浸粉、20 g蛋白胨和20 g葡萄糖。YPDA固體培養(yǎng)基:1 L培養(yǎng)基中含有10 g酵母浸粉、20 g蛋白胨、20 g葡萄糖和20 g瓊脂。
LRH-250-MS霉菌培養(yǎng)箱 韶關(guān)市泰宏醫(yī)療器械有限公司;SW-CJ-IFD潔凈工作臺(tái) 蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司;DW-86L388超低溫保存箱 青島海爾特種電器有限公司;5810R臺(tái)式高速大容量冷凍離心機(jī) 德國(guó)Eppendorf公司;UV-2700紫外-可見分光光度計(jì) 日本島津公司;HV-110高壓滅菌鍋 日本Hirayama 公司;SCION SQ 456-GC單四極桿氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀、DB-WAX毛細(xì)管色譜柱(30 m×0.25 mm,0.25 μm) 美國(guó)Bruker公司。
1.3.1 菌種活化
將-80 ℃冷凍保藏的7 株酵母于常溫解凍后,28 ℃ YPDA固體培養(yǎng)基劃線培養(yǎng)24 h后重復(fù)活化1 次。將菌落特征明顯的酵母菌株接種于YPD液體培養(yǎng)基中,28 ℃、150 r/min振蕩培養(yǎng)24 h,培養(yǎng)物6 000 r/min離心10 min[19],加無(wú)菌水混合后離心洗滌2 次,收集菌體,4 ℃冷藏備用。
商業(yè)酵母K1參照使用說明進(jìn)行活化。
1.3.2 發(fā)酵實(shí)驗(yàn)
將機(jī)械除梗破碎后的‘桂葡3號(hào)’葡萄醪,裝入2.5 L發(fā)酵容器中,裝液量為1.7 L,添加SO2至其質(zhì)量濃度為60 mg/L(即體積分?jǐn)?shù)為6%的H2SO3),接著將發(fā)酵容器放置在20~25 ℃靜置[20]。將酵母分別按照107CFU/mL接入葡萄醪,28 ℃恒溫發(fā)酵,每組3 個(gè)重復(fù),采用二氧化碳失重法監(jiān)測(cè)發(fā)酵進(jìn)程,直至發(fā)酵結(jié)束(連續(xù)2 d的發(fā)酵液質(zhì)量濃度變化小于2 g/L)。發(fā)酵結(jié)束后收集葡萄酒,將樣品低溫(4 ℃)3 000 r/min離心20 min后去除殘菌,保留上清液于4 ℃冷藏[21]。
1.3.3 葡萄酒理化指標(biāo)測(cè)定
參照GB 15037—2006《葡萄酒》分析測(cè)定葡萄酒中pH值、殘?zhí)恰⒌味ㄋ幔ㄒ跃剖嵊?jì))、揮發(fā)酸(以乙酸計(jì))、乙醇體積分?jǐn)?shù)、總酚等基本理化指標(biāo)。
1.3.4 葡萄酒中揮發(fā)性香氣成分提取檢測(cè)[22]
頂空-固相微萃取條件:取8 mL樣品置于20 mL頂空瓶中,頂空瓶中加入磁力轉(zhuǎn)子,加入10 μL 100 μg/mL的2-辛醇作為內(nèi)標(biāo)。將老化后的75 μm CAR/PDMS萃取頭插入樣品瓶頂空部分,45 ℃吸附30 min,吸附后的萃取頭取出后插入氣相色譜進(jìn)樣口,于250 ℃解吸3 min,同時(shí)啟動(dòng)儀器采集數(shù)據(jù)。
色譜條件:色譜柱為DB-WAX毛細(xì)管色譜柱(30 m×0.25 mm,0.25 μm);初始溫度40 ℃保持4 min,以5.0 ℃/min升至90 ℃,保持0 min;再以10.0 ℃/min升至230 ℃,保持7 min;進(jìn)樣溫度250 ℃,載氣為He,流速0.8 mL/min,不分流。
質(zhì)譜條件:電子電離源,發(fā)射電子流80 μA,電子能量70 eV,傳輸線溫度250 ℃,離子源溫度200 ℃,質(zhì)量掃描范圍m/z30~500。
1.3.5 揮發(fā)性香氣成分的定性與定量分析
定性分析:香氣成分經(jīng)氣相色譜-質(zhì)譜分析鑒定后,通過計(jì)算機(jī)譜庫(kù)(NIST98)進(jìn)行初步檢索及資料分析,再結(jié)合文獻(xiàn)[23-24]進(jìn)行人工譜圖解析,從而確認(rèn)香氣物質(zhì)的各種化學(xué)物質(zhì)。
定量分析:利用2-辛醇內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量。計(jì)算公式[25]如下:
通過SPSS 20.0(美國(guó)IBM公司)對(duì)酒樣的理化指標(biāo)進(jìn)行單因素方差分析(多組間比較采用One-Way ANOVA法,P<0.05,差異顯著),并運(yùn)用主成分分析對(duì)超過其閾值(大于1)的香氣物質(zhì)進(jìn)行分析。
表1 ‘桂葡3號(hào)’干白葡萄酒的理化指標(biāo)Table 1 Physicochemical characteristics of ‘Guipu 3’ dry white wine
由表1可知,8 個(gè)酒樣的pH值均在2.8~3.8之間。pH值表示葡萄酒中酸的強(qiáng)弱,對(duì)葡萄酒的穩(wěn)定性和感官質(zhì)量都起著非常重要的作用。葡萄酒的pH值一般在2.8~3.8之間,否則穩(wěn)定性較差,各種病蟲害微生物均易生長(zhǎng)繁殖。
總酸即葡萄酒中的所有可滴定酸,為揮發(fā)酸和固定酸的總和??偹岷繉?duì)葡萄酒的色澤和風(fēng)味均具有不同的影響[28]。由表1可知,7 株野生酵母均具有一定的降酸能力,其中MG3-1降酸最強(qiáng),而MG1降酸最弱。乙酸對(duì)葡萄酒的風(fēng)味影響是負(fù)面的[27],由表1可知,所有酒樣揮發(fā)酸質(zhì)量濃度(以乙酸計(jì))均小于1.2 g/L,符合GB 15037—2006要求,研究發(fā)現(xiàn)其質(zhì)量濃度在0.2~0.7 g/L 左右較為適宜,而在0.7~1.1 g/L時(shí),會(huì)讓葡萄酒產(chǎn)生酸敗感和溶劑味[26]。MG1酒樣的滴定酸顯著高于其他7 個(gè)酒樣說明其產(chǎn)酸能力最強(qiáng);MG3-1酒樣滴定酸顯著低于其他酒樣,即其產(chǎn)酸能力最弱。
發(fā)酵結(jié)束后殘?zhí)橇康停f明酵母對(duì)糖的代謝轉(zhuǎn)化率高,發(fā)酵能力強(qiáng)[29]。乙醇發(fā)酵結(jié)束時(shí)殘?zhí)橇咳舸笥? g/L則表明發(fā)酵不徹底,有酸敗的危險(xiǎn)[30]。由表1可以看出,8 個(gè)酒樣殘?zhí)嵌驾^低,發(fā)酵都較徹底,沒有酸敗的風(fēng)險(xiǎn)。商用酵母K1的總酚含量最低,而單寧含量最高。
通過對(duì)7 種酵母與商用酵母K1的發(fā)酵酒揮發(fā)性物質(zhì)分析檢測(cè),共檢測(cè)到68 種香氣物質(zhì),其中包括3 種酸類、14 種醇類、22 種乙酯類、18 種其他酯類、6 種醛酮類、5 種萜烯類,見表2。
表2 不同酵母的發(fā)酵香氣成分及含量Table 2 Aroma compounds of wines fermented with different yeast strains μg/L
續(xù)表2 μg/L
2.2.1 酯類
酯類賦予葡萄酒濃郁的果香[31]。由表2可知,酒樣中共檢測(cè)到40 種酯類,其中乙酯類22 種,其他酯類18 種。由圖1可知,8 個(gè)酒樣的香氣物質(zhì)主要為乙酯類。
MG1酒樣中共有18 種乙酯類,占香氣物質(zhì)總含量79.03%;其他酯類9 種,占香氣物質(zhì)總含量5.96%。其中辛酸乙酯54 300.00 μg/L,占乙酯類總量42.93%,為K1辛酸乙酯含量的15.66 倍。與K1酒樣相比,MG1酒樣含有亞油酸乙酯、乳酸乙酯、十五酸乙酯和辛酸正丁酯,而K1酒樣沒有。其中亞油酸乙酯具有降低膽固醇和血脂的作用,可預(yù)防或減輕脈粥樣硬化癥。
MG4酒樣中共有14 種乙酯類,占香氣物質(zhì)總含量76.80%;其他酯類5 種,占香氣物質(zhì)總含量8.29%。其中辛酸乙酯31 751.00 μg/L,占乙酯類總量46.05%,為K1辛酸乙酯含量的9.16 倍。與K1酒樣相比,MG4酒樣含有乙酸異戊酯,而K1酒樣沒有。
MSF1-4酒樣中共有18 種乙酯類,占香氣物質(zhì)總量84.04%;其他酯類10 種,占香氣物質(zhì)總量2.35%。其中辛酸乙酯67 300.00 μg/L,占乙酯類總量42.41%,為K1辛酸乙酯含量的19.41 倍。與K1酒樣相比,MSF1-4酒樣含有亞油酸乙酯、己酸丙酯、十五酸乙酯、辛酸3-甲基丁酯和辛酸丙酯,而K1酒樣沒有。
MSF6-2酒樣中共有20 種乙酯類,占香氣物質(zhì)總量78.91%;其他酯類12 種,占香氣物質(zhì)總量7.22%。其中辛酸乙酯48 900.00 μg/L,占乙酯類總量40.78%,為K1辛酸乙酯含量的14.10 倍。MSF6-2酒樣含有硬脂酸乙酯、十五酸乙酯、辛酸正丁酯、亞油酸乙酯、順式-2-丁烯酸乙酯、乙酸葉醇酯、水楊酸甲酯和辛酸-3-甲基丁酯,而K1酒樣沒有。
MSF8-1酒樣中共有15 種乙酯類,占香氣物質(zhì)總量85.26%;其他酯類10 種,占香氣物質(zhì)總量5.83%。其中辛酸乙酯為58 800.00 μg/L,占乙酯類總量44.20%,為K1辛酸乙酯含量的16.96 倍。與K1酒樣相比,MSF8-1酒樣含有辛酸正丁酯、辛酸-3-甲基丁酯和辛酸丙酯,而K1酒樣沒有。
MG6酒樣中共有17 種乙酯類,占香氣物質(zhì)總量73.94%;其他酯類10 種,占香氣物質(zhì)總量10.63%。其中辛酸乙酯為26 400.00 μg/L,占乙酯類總量40.91%,為K1辛酸乙酯含量的7.61 倍。與K1酒樣相比,MG6酒樣含有順式-2-丁烯酸乙酯和乙酸異戊酯,而K1酒樣沒有。
MG3-1酒樣中共有17 種乙酯類,占香氣物質(zhì)總量79.00%;其他酯類12 種,占香氣物質(zhì)總量5.44%。其中辛酸乙酯為48 100.00 μg/L,占乙酯類總量42.93%,為K1辛酸乙酯含量的13.87 倍。與K1酒樣相比,MG3-1酒樣含有乙酸葉醇酯、異戊酸乙酯、乙酯庚酯、辛酸正丁酯、水楊酸甲酯和乙酸異戊酯,而K1酒樣沒有。
2.2.2 醇類
醇類來源于酵母埃利希代謝途徑和酵母對(duì)相應(yīng)醛類還原過程的次級(jí)產(chǎn)物[32-34]。葡萄酒中的高級(jí)醇質(zhì)量濃度低于300 mg/L時(shí),能提高酒的復(fù)雜感;而質(zhì)量濃度超過400 mg/L時(shí),影響酒的感官品質(zhì)[35]。由表2可知,MG1、MG4、MSF1-4、MSF6-2、MSF8-1、MG6、MG3-1、K1酒樣中醇類分別有7、6、10、7、7、5、11 種和8 種。由圖1和表2可知,醇類含量由高到低為MSF1-4>MG3-1>MSF6-2>MG1>K1>MG4>MG6>MSF8-1。8 個(gè)酒樣均含一定量苯乙醇,給酒樣帶來獨(dú)特的紫羅蘭香、丁香、茴香和玫瑰香味。
2.2.3 酸類
乙醇發(fā)酵過程帶來?yè)]發(fā)酸,其含量由葡萄汁的營(yíng)養(yǎng)水平、發(fā)酵環(huán)境和釀造酵母[35]決定。葡萄酒中的有機(jī)酸給葡萄酒帶來了奶酪味和脂肪味[37-38]。由表2可知,8 個(gè)酒樣共檢測(cè)出辛酸、月桂酸和癸酸3 種揮發(fā)酸。由圖1可知,酸類含量由高到低為MSF1-4>MG1>MSF8-1>MG3-1>MSF6-2>K1>MG6>MG4。
2.2.4 醛酮類
醛類主要來源于微生物的發(fā)酵。氨基酸在酶作用下轉(zhuǎn)氨基或氧化脫氨基產(chǎn)生醛。由表2可知,8 個(gè)酒樣共檢測(cè)出癸醛、苯甲醛、壬醛、十二醛、大馬士酮、香葉基丙酮,共4 種醛類2 種酮類。由圖1可知,醛酮類含量由高到低為MG1>MG3-1>MSF8-1>MSF6-2>MSF1-4>MG4>MG6>K1。
2.2.5 萜烯類
微生物合成萜烯類化合物是通過二磷酸異戊烯生物合成途徑合成的[39-41]。二磷酸異戊烯之間結(jié)合形成香葉基二磷酸、法呢基二磷酸、香葉基二磷酸,分別是形成單萜、倍半萜和二萜的前驅(qū)物。其他萜烯類化合物來源于這3 個(gè)前驅(qū)物的環(huán)化或二次修飾。由于萜烯類化合物的香氣閾值低,所以少量的萜烯對(duì)增加葡萄酒風(fēng)味的豐富性起重要作用[42]。由表2可知,8 個(gè)酒樣共檢測(cè)出4-萜烯醇、香茅醇、芳樟醇、α-松油醇、玫瑰醚共5 種萜烯類。由圖1可知,萜烯類含量由高到低為MG6>K1>MG1>MG3-1>MG4>MSF6-2>MSF1-4>MSF8-1。
圖1 ‘桂葡3號(hào)’干白葡萄酒各類香氣物質(zhì)的種類及其含量Fig. 1 Various classes of aroma components and their relative contents in ‘Guipu 3’ dry white wine
表3 8 種酵母發(fā)酵‘桂葡3號(hào)’干白葡萄酒中揮發(fā)性物質(zhì)的OAV(OAV>1)Table 3 OAV values of volatile substances in ‘Guipu 3’ dry white wines fermented with eight yeasts (OAV > 1)
為更準(zhǔn)確地確定各種香氣物質(zhì)對(duì)葡萄酒的香氣特征作用大小,通過查找文獻(xiàn)得到相關(guān)香氣物質(zhì)的香氣活力值(odour activity value,OAV),進(jìn)一步分析探討8 個(gè)酒樣中的關(guān)鍵揮發(fā)性香氣物質(zhì),OAV是由該物質(zhì)的含量除以其閾值得到的[43],研究發(fā)現(xiàn)OAV大于1的香氣物質(zhì)對(duì)葡萄酒的風(fēng)味特征作用明顯,且OAV越大對(duì)香氣特征作用越明顯,而OAV小于1的物質(zhì)只起協(xié)香作用[44]。
由表3可知,共有19 種香氣物質(zhì)的OAV大于1,主要是脂類、醛類和萜烯類。其中10 種物質(zhì)(辛酸、丁酸乙酯、己酸乙酯、辛酸乙酯、癸酸乙酯、乙酸苯乙酯、乙酸異戊酯、壬醛、4-萜烯醇、玫瑰醚)OAV大于10,(辛酸乙酯、己酸乙酯、癸酸乙酯、乙酸異戊酯、乙酸己酯、壬醛、玫瑰醚)OAV大于100,2 種物質(zhì)(己酸乙酯、辛酸乙酯)OAV大于1 000。這些物質(zhì)被認(rèn)為是發(fā)酵酒中必不可少的香氣物質(zhì),且含量最多的是酯類,說明酯類是本實(shí)驗(yàn)酒樣中的特征香氣物質(zhì)。
將葡萄酒中同類揮發(fā)性香氣成分歸為一組,并計(jì)算該組的OAV總和,即可對(duì)樣品的香氣輪廓進(jìn)行模擬。由圖2可知,采用不同的酵母發(fā)酵獲得的‘桂葡3號(hào)’葡萄酒具有不同的香氣特征,但是8 個(gè)酒樣的香氣特征均是由乙酯類決定。
圖2 葡萄酒香氣輪廓圖(OAV>1)Fig. 2 Wine aroma profile (OAV > 1)
由表4可知,2 個(gè)主成分的總貢獻(xiàn)率為67.116%,其中主成分1的貢獻(xiàn)率為48.564%,主成分2的貢獻(xiàn)率為18.553%。
由圖3可知,MG3-1、MG1、MSF6-2發(fā)酵實(shí)驗(yàn)組接近,其特征香氣物質(zhì)為乙酸苯乙酯、壬醛、4-萜烯醇、芳樟醇、1-辛醇、1-癸醇,這些物質(zhì)具有花香、玫瑰香、橙子花香、水果香等香氣;MG6的特征香氣物質(zhì)為乙酸異戊酯、香茅醇,這些物質(zhì)具有香蕉、薔薇花香、青草香;MSF8-1、K1、MG4發(fā)酵實(shí)驗(yàn)組接近,其特征香氣物質(zhì)為乙酸乙酯,其具有水果味;MSF1-4的香氣特征物質(zhì)為玫瑰醚、月桂酸乙酯、辛酸、癸酸、癸酸乙酯、辛酸乙酯、丁酸乙酯、乙酸己酯、己酸乙酯、辛酸甲酯,這些物質(zhì)具有奶酪味、香蕉、菠蘿、草莓、蘋果、梨、橘子、花香等香氣。其中K1、MG4發(fā)酵實(shí)驗(yàn)組最為接近,MG6、MSF1-4發(fā)酵實(shí)驗(yàn)組差異最大。以主成分1為基準(zhǔn),MSF1-4發(fā)酵酒明顯區(qū)別于其他酒樣,且其香氣特征物質(zhì)的OAV為37 038.67,香氣物質(zhì)質(zhì)量濃度為188 818.00 μg/L,2 個(gè)指標(biāo)在所有實(shí)驗(yàn)組中均排第1;以主成分2為基準(zhǔn),MG1明顯區(qū)別于其他酒樣,且其香氣特征物質(zhì)的OAV為30 376.81,香氣物質(zhì)質(zhì)量濃度為160 058.30 μg/L,2 個(gè)指標(biāo)在所有實(shí)驗(yàn)組中均排第2;說明MG1和MSF1-4發(fā)酵酒的香氣評(píng)價(jià)最好。
圖3 ‘桂葡3號(hào)’干白葡萄酒中OAV大于1的部分香氣化合物PCA圖Fig. 3 PCA graphs of aroma compounds (OAV > 1) in ‘Guipu 3’ dry white wine
通過篩選地方酵母釀造葡萄酒是增加葡萄酒的地域特征的有效方法。Lopes等[47]篩選的本土釀酒酵母MMf9發(fā)酵酒中具有紫羅蘭、桉樹、胡椒等獨(dú)特的香氣,且酒的品質(zhì)明顯優(yōu)于商業(yè)酵母發(fā)酵酒。李艷等[48]從龍眼葡萄自然發(fā)酵篩選的釀酒酵母DHS-1發(fā)酵酒中苯乙醇含量高于安琪和BM45酵母發(fā)酵酒,能賦予葡萄酒紫羅蘭香、茴香、丁香和玫瑰香味。徐麗萍[49]篩選出的高產(chǎn)酯假絲酵母屬1#產(chǎn)酯量比本實(shí)驗(yàn)漢遜酵母屬M(fèi)SF1-4的少19.08%。
通過對(duì)7 株野生酵母釀造的‘桂葡3號(hào)’干白葡萄酒樣,與商業(yè)酵母K1發(fā)酵酒比較研究,對(duì)發(fā)酵酒的揮發(fā)性香氣物質(zhì)進(jìn)行分析檢測(cè),共得到68 種共5大類香氣成分,包括3 種酸類、14 種醇類、22 種乙酯類、18 種其他酯類、6 種醛酮類、5 種萜烯類,比‘桂葡3號(hào)’葡萄漿果[15]多29 種香氣物質(zhì),其中酯類多出19 種,且總含量是‘桂葡3號(hào)’漿果的5.9 倍。辛酸乙酯是干白葡萄酒的重要香味物質(zhì)。本實(shí)驗(yàn)7 株野生葡萄酒酵母產(chǎn)辛酸乙酯能力均高于周金虎等[50]誘變篩選的高產(chǎn)辛酸乙酯地衣芽孢桿菌,其中漢遜酵母屬M(fèi)SF1-4是該菌株的17.26 倍。同時(shí)相對(duì)于商業(yè)酵母K1,7 株野生酵母菌均具有較強(qiáng)的產(chǎn)辛酸乙酯(白蘭地香氣)的能力,其中漢遜酵母屬M(fèi)SF1-4產(chǎn)辛酸乙酯能力最強(qiáng);由于香氣物質(zhì)的總量和OAV均排第1和第2,因此香氣評(píng)價(jià)最好的是漢遜酵母屬M(fèi)SF1-4和畢赤酵母屬M(fèi)G1;而商業(yè)酵母K1發(fā)酵酒的香氣物質(zhì)總量(71 912.33 μg/L)和種類(41 種)均最低。結(jié)果均表明,該7 株野生酵母具有良好的產(chǎn)香特性,有一定的商業(yè)酵母開發(fā)潛力,在后續(xù)工作中可進(jìn)一步展開商業(yè)酵母開發(fā)應(yīng)用相關(guān)實(shí)驗(yàn),如組合菌株的釀造特性、產(chǎn)辛酸乙酯的基因及其控制機(jī)理等。